性病的实验室检测及其意义-PPT.ppt
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1、性病的实验室检测及其意义淋病的实验室诊断淋病的实验室诊断 淋病的主要实验室诊断方法淋病的主要实验室诊断方法 直接显微镜检查;直接显微镜检查;分离培养淋球菌;分离培养淋球菌;非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原 或或DNADNA(EIA,PCR/LCREIA,PCR/LCR)2显微镜检查的临床意义显微镜检查的临床意义 男性尿道标本男性尿道标本:多多形形核核细细胞胞内内见见到到形形态态典典型型的的革革兰兰阴阴性性双双球球菌菌具诊断价值具诊断价值 敏感性及特异性:敏感性及特异性:95%99%宫颈标本、无症状男性尿道标本宫颈标本、无症状男性尿道标本 敏感性:敏感性:40
2、70%不不推推荐荐直直接接显显微微镜镜检检查查诊诊断断直直肠肠和和咽咽部部淋淋球球菌菌感染。感染。如如果果在在多多形形核核细细胞胞外外见见到到形形态态典典型型的的革革兰兰阴阴性性双球菌,需进一步培养确认双球菌,需进一步培养确认。3淋球菌培养淋球菌培养n培养法为诊断淋病的金标准。培养法为诊断淋病的金标准。从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。n初步鉴定淋球菌的主要依据初步鉴定淋球菌的主要依据 菌落特征菌落特征 氧化酶试验氧化酶试验 革兰染色革兰染色4淋球菌培养的的临床意义淋球菌培养的的临床意义 n培培养养特特异异性性:100%,敏敏感感性性 81-1
3、00%。n宫宫颈颈、无无症症状状男男性性尿尿道道、直直肠肠、咽咽部部标标本本等等应做淋球菌培养应做淋球菌培养n可发现无症状淋球菌感染患者;可发现无症状淋球菌感染患者;n可用于进一步作药敏试验;可用于进一步作药敏试验;n可用于治疗后的判愈试验。可用于治疗后的判愈试验。5淋病其它诊断技术淋病其它诊断技术核酸检测的特点及临床意义核酸检测的特点及临床意义不依赖于活的病原体的存在,无需特殊运送条件;不依赖于活的病原体的存在,无需特殊运送条件;敏敏感感性性高高,不不仅仅适适合合尿尿道道或或宫宫颈颈标标本本,还还可可以以采采用用尿液、阴道标本;尿液、阴道标本;不能进行抗生素敏感性试验;不能进行抗生素敏感性试
4、验;用于判愈试验需在治疗后至少用于判愈试验需在治疗后至少3 周以上进行周以上进行.6沙眼衣原体感染的实验室诊断沙眼衣原体感染的实验室诊断细胞培养法细胞培养法免疫层析快速抗原检测免疫层析快速抗原检测酶联免疫抗原检测酶联免疫抗原检测核酸扩增检测核酸扩增检测7衣原体培养的临床意义衣原体培养的临床意义 敏感性敏感性70708080特异性特异性100100可用于判愈可用于判愈可用于确诊可用于确诊 缺点缺点费时(需费时(需3 35 5天),费力,技术要求高天),费力,技术要求高不宜作为临床常规检查不宜作为临床常规检查不宜用于大规模的筛查和流行病学调查不宜用于大规模的筛查和流行病学调查8大家应该也有点累了,
5、稍作休息大家有疑问的,可以询问和交流大家有疑问的,可以询问和交流大家有疑问的,可以询问和交流大家有疑问的,可以询问和交流9衣原体抗原快速检测的临床意义衣原体抗原快速检测的临床意义优点:优点:简易,方便,快速,尤其简易,方便,快速,尤其适用于基层单位适用于基层单位缺点:缺点:标本中需要足够数量的沙眼衣标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原,否则有假阴性结果原体抗原,否则有假阴性结果10现有的核酸检测方法现有的核酸检测方法PCR PCR LCR LCR SDA SDA TMA TMA Real time PCRReal time PCR衣原体核酸检测衣原体核酸检测11优优 点点:敏感性:敏感性:-98
6、-98 特异性特异性:-99:-99 缺缺 点:点:实验室条件和技术要求高实验室条件和技术要求高 成本高、费时、假阳性成本高、费时、假阳性衣原体核酸检测的临床意义衣原体核酸检测的临床意义12 生殖器疱疹实验室诊断生殖器疱疹实验室诊断HSV实验室诊断的意义实验室诊断的意义临床诊断的准确性:临床诊断的准确性:50%70%,通过实验室检测手段,通过实验室检测手段可帮助诊断可帮助诊断亚临床感染亚临床感染:孕妇、性伴的检测等孕妇、性伴的检测等进行进行HSV分型的意义分型的意义HSV-2是该病的主要病原体,是该病的主要病原体,HSV-1约占该病的约占该病的30%两型两型HSV感染的预后不同感染的预后不同1
7、3生殖器疱疹实验室诊断方法生殖器疱疹实验室诊断方法病原学诊断病原学诊断 病毒检测病毒检测 抗原检测抗原检测 DNA检测检测血清学检测血清学检测-抗体检测抗体检测 14HSV血清学检测的意义血清学检测的意义nHSVHSV感染的血清流行病学调查感染的血清流行病学调查n感染者性伴的感染者性伴的HSVHSV感染状况的判断感染状况的判断n孕妇产前监测孕妇产前监测 HSVHSV型特异性血清抗体检测是发现亚临床及无症型特异性血清抗体检测是发现亚临床及无症状生殖器状生殖器HSVHSV感染者的最可行手段,对于防止性伴间感染者的最可行手段,对于防止性伴间和母婴间和母婴间HSVHSV传播有着重要意义传播有着重要意义
8、15HPV-DNA检测的意义检测的意义nHPVHPV感染流行病学调查感染流行病学调查nHPV DNA定定型型 高高危危型型HPV病病毒毒负负荷荷的的增增加加可可使使女性发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险显著增加女性发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险显著增加 16梅毒实验室监测及临床意义梅毒实验室监测及临床意义 17 梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum),是一种小而纤细的是一种小而纤细的螺旋状微生物,长螺旋状微生物,长515 m,直径约直径约0.2 m,活活体平均有体平均有814个规则的螺旋。
9、个规则的螺旋。18 梅毒螺旋体透明而不易被染色,在普通显微镜梅毒螺旋体透明而不易被染色,在普通显微镜下不易发现,只有在暗视野显微镜、免疫荧光下不易发现,只有在暗视野显微镜、免疫荧光或或Fontana镀银染色等特殊染色下才能观察到。镀银染色等特殊染色下才能观察到。19 梅梅毒毒螺螺旋旋体体在在体体外外不不易易生生存存,离离开开人人体体很很快快死死亡亡,其其生生存存最最适适温温度度为为37。煮煮沸沸、干干燥燥、肥肥皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。20 梅梅毒毒螺螺旋旋体体不不耐耐热热,加加热热至至42 2个个小小时时可可将将它它杀杀死死,100时时立立即即死
10、死亡亡;但但耐耐低低温温,在在0时时可可存存活活48小小时时,置置于于-78数数年年仍仍具具有有传传染染性。性。21 梅梅毒毒螺螺旋旋体体尚尚不不能能在在体体外外培培养养繁繁殖殖,人人是是其其唯唯一一的的自自然然宿宿主主。梅梅毒毒螺螺旋旋体体可可在在家家兔兔睾睾丸丸中中生生长繁殖,用于抗原制备和实验研究。长繁殖,用于抗原制备和实验研究。22 梅梅毒毒螺螺旋旋体体传传代代时时间间为为3033小小时时,繁繁殖殖方方式式主主要为横断分裂。要为横断分裂。1998年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。23梅毒实验室检测的特点梅毒实验室检测的特点不同原理的方法:检测策略不同原理的
11、方法:检测策略临床意义解释复杂:不同方法结果判断、血清固定、前带现象临床意义解释复杂:不同方法结果判断、血清固定、前带现象缺乏特殊梅毒的有效检测方法:胎传梅毒、神经梅毒缺乏特殊梅毒的有效检测方法:胎传梅毒、神经梅毒24 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 原理原理 暗暗视视野野映映光光检检查查是是采采用用一一个个特特殊殊的的聚聚光光器器,分分为为干干系系和和湿湿系系两两种种,其其中中央央均均为为黑黑漆漆所所遮遮蔽蔽,仅仅在在圆圆周周边边留留有有光光线线斜斜角角处处,光光线线只只可可从从其其圆圆周周边边缘缘斜斜角角射射到到载载玻玻片片上上。梅梅毒毒螺螺旋旋体体检检查查一一般般采采用用湿湿系
12、系聚聚光光器器。倘倘若若斜斜射射光光线线遇遇到到载载玻玻片片上上的的物物体体,如如螺螺旋旋体体等等,物物体体会会发发光光显显现现。本本法法检检查查梅梅毒毒螺螺旋旋体体对对于于梅梅毒毒有有病病原原学学诊诊断断的价值。的价值。25 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 材料材料 暗暗视视野野显显微微镜镜、钝钝刀刀(刮刮勺勺)、载载玻玻片片、注注射射器器、注射针头、无菌等渗盐水。注射针头、无菌等渗盐水。26 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 取材取材 皮皮肤肤粘粘膜膜损损害害取取材材:首首先先在在载载玻玻片片(厚厚度度为为1.01.01.21.2mmmm)上上滴滴加加5050100100
13、LL盐盐水水备备用用。然然后后用用棉棉拭拭子子取取无无菌菌盐盐水水轻轻轻轻擦擦去去皮皮损损上上的的污污物物。如如皮皮损损上上有有痂痂皮皮,可可用用钝钝刀刀小小心心除除去去。再再用用钝钝刀刀轻轻轻轻地地刮刮数数次次(避避免免出出血血),取取组组织织渗渗液液与与载载玻玻片片上上的的盐盐水水混混匀匀,加盖玻片置暗视野显微镜下检查。加盖玻片置暗视野显微镜下检查。27 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 取材取材 淋淋巴巴结结取取材材:消消毒毒淋淋巴巴结结表表面面皮皮肤肤,用用无无菌菌干干棉棉球球擦擦干干。用用1 1mLmL无无菌菌注注射射器器配配1212号号针针头头,吸吸取取无无菌菌等等渗渗盐盐
14、水水0.250.250.50.5mLmL,以以无无菌菌操操作作穿穿刺刺淋淋巴巴结结并并注注入入盐盐水水,再再吸吸入入注注射射器器内内,反反复复2 23 3次次后后,取取少少量量淋淋巴巴液于载玻片上,加盖玻片,置暗视野显微镜下检查液于载玻片上,加盖玻片,置暗视野显微镜下检查28 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 方法方法 在在暗暗视视野野聚聚光光器器(此此法法用用湿湿系系暗暗视视野野聚聚光光器器)上上加加一一滴滴甘甘油油缓缓冲冲液液(甘甘油油和和0.10.1mol/L mol/L PBSPBS,pH pH 7.07.0按按7:37:3配制)。配制)。载载玻玻片片置置载载物物台台上上,上上
15、升升聚聚光光器器使使甘甘油油缓缓冲冲液液接接触触载载玻玻片片,先先用用1010倍倍物物镜镜,使使物物像像清清晰晰,再再用用4040倍倍物物镜观察,寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体镜观察,寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体29 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 结果及解释结果及解释 暗暗视视野野显显微微镜镜下下,典典型型的的梅梅毒毒螺螺旋旋体体呈呈白白色色发发光光,其其螺螺旋旋较较密密而而均均匀匀。运运动动规规律律,运运动动性性较较强强,其其运运动动方方式式包包括括旋旋转转式式,围围绕绕其其长长轴轴旋旋转转;蛇蛇行行式式,全全身身弯弯曲曲如如蛇蛇行行;伸伸缩缩其其螺螺旋旋间间距距离
16、离而而移移动动。观观察其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。察其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。30 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 结果及解释结果及解释 未未检检出出螺螺旋旋体体不不能能排排除除梅梅毒毒的的诊诊断断,阴阴性性结结果果可可能能说说明明:螺螺旋旋体体数数量量不不足足(单单次次暗暗视视野野显显微微镜镜检检查查阳阳性性率率小小于于50%)。患患者者已已接接受受抗抗生生素素或或杀杀灭灭梅梅毒毒螺螺旋旋体体的的药药物物治治疗疗。损损害害接接近近自自然然消消退退。损损害害不不是梅毒。是梅毒。31梅毒实验室检测的特点梅毒实验室检测的特点 临床表现临床表现 取材部位取材部位 检查方法
17、检查方法一期梅毒一期梅毒 溃疡溃疡 淋巴结淋巴结 病原学检查病原学检查 血液血液 血清学检查血清学检查二期梅毒二期梅毒 皮损皮损 淋巴结淋巴结 病原学检查病原学检查 血液血液 血清学检查血清学检查潜伏梅毒潜伏梅毒 血液血液 血清学检查血清学检查三期梅毒三期梅毒 血液血液血清学检查血清学检查 神经梅毒神经梅毒 血液血液血清学检查血清学检查 脑脊液脑脊液细胞、蛋白量检查细胞、蛋白量检查VDRL等等32梅毒血清学检测原理梅毒血清学检测原理 当人体感染梅毒螺旋体后当人体感染梅毒螺旋体后4周周-10周左右,血周左右,血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性抗体(
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