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T∕CIFST 021.17-2024 食品及食品生产过程中食品致敏原的免疫分析检测方法 第17部分:芝麻.pdf
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1、团体标准T/CIFST 021.172024中国食品科学技术学会发 布2024-04-20 实施2024-04-20 发布食品及食品生产过程中食品致敏原的免疫分析检测方法第 17 部分:芝麻ICS67.050CCSX 04Detection of food allergens in foods and during the food production processusing immunoassay methodPart 17:SesameT/CIFST 021.172024I前言本文件按照 GB/T 1.12020标准化工作导则 第 1 部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件
2、是 T/CIFST 021食品及食品生产过程中食品致敏原的免疫分析检测方法的第 17 部分。T/CIFST 021 已经发布了以下部分:第 1 部分:麸质;第 2 部分:甲壳纲类动物;第 3 部分:蛋类;第 4 部分:花生;第 5 部分:大豆;第 6 部分:乳;第 7 部分:酪蛋白;第 8 部分:-乳球蛋白;第 9 部分:扁桃仁;第 10 部分:腰果;第 11 部分:榛子;第 12 部分:巴西坚果;第 13 部分:椰子;第 14 部分:夏威夷果;第 15 部分:开心果;第 16 部分:核桃。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国食品科学技术学会提
3、出并归口。本文件起草单位:广州海关技术中心、南昌大学、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、国家粮食和物资储备局科学研究院、北京工商大学、南京海关动植物与食品检测中心、内蒙古伊利实业集团股份有限公司、杭州娃哈哈集团有限公司、石家庄君乐宝乳业有限公司、拜发分析系统销售(北京)有限公司。本文件主要起草人:刘津、梁颖婕、高东微、陈红兵、武涌、蔡一村、谢刚、王佳雅、王彦波、王宇、龙云凤、刘丽君、蒋晶君、张奕敏、吴琴、王镓萍、张耀广、李兴佳、卢曼慧、贺丽丽、葛丽花。T/CIFST 021.172024I引言目前预包装食品标签中以推荐性标识的方式规定了“八大类”致敏原标识的种类和标示方式,分别为含有麸质的
4、谷物及其制品、甲壳纲类动物及其制品、鱼类及其制品、蛋类及其制品、花生及其制品、大豆及其制品、乳及乳制品、坚果及其果仁类制品。2020 年,FAO/WHO 食品过敏风险评估专家组建议用芝麻替代原“八大类”食品致敏原中的大豆。综合考虑,T/CIFST 021食品及食品生产过程中食品致敏原的免疫分析检测方法拟分为如下 17 个部分。第 1 部分:麸质。目的在于提供食品及食品生产过程中麸质的夹心酶联免疫吸附法和竞争酶联免疫吸附法及免疫层析检测方法;第 2 部分:甲壳纲类动物。目的在于提供食品及食品生产过程中甲壳纲类动物致敏原的酶联免疫吸附和免疫层析检测方法;第 3 部分:蛋类。目的在于提供食品及食品生
5、产过程中蛋类致敏原的酶联免疫吸附和免疫层析测定方法;第 4 部分:花生。目的在于提供食品及食品生产过程中花生致敏原的酶联免疫吸附和免疫层析测定方法;第 5 部分:大豆。目的在于提供食品及食品生产过程中大豆致敏原的酶联免疫吸附和免疫层析测定方法;第 6 部分:乳。目的在于提供食品及食品生产过程中乳致敏原(奶蛋白)的酶联免疫吸附和免疫层析测定方法;第 7 部分:酪蛋白。目的在于提供食品及食品生产过程中酪蛋白的酶联免疫吸附测定方法;第 8 部分:-乳球蛋白。目的在于提供食品及食品生产过程中-乳球蛋白致敏原的酶联免疫吸附测定方法;第 9 部分:扁桃仁。目的在于提供食品及食品生产过程中扁桃仁致敏原的酶联
6、免疫吸附和免疫层析测定方法;第 10 部分:腰果。目的在于提供食品及食品生产过程中腰果致敏原的酶联免疫吸附和免疫层析测定方法;第 11 部分:榛子。目的在于提供食品及食品生产过程中榛子致敏原的酶联免疫吸附和免疫层析测定方法;第 12 部分:巴西坚果。目的在于提供食品及食品生产过程中巴西坚果致敏原的免疫层析测定方法;第 13 部分:椰子。目的在于提供食品及食品生产过程中椰子致敏原的免疫层析测定方法;第 14 部分:夏威夷果。目的在于提供食品及食品生产过程中夏威夷果致敏原的免疫层析测定方法;第 15 部分:开心果。目的在于提供食品及食品生产过程中开心果致敏原的免疫层析测定方法;第 16 部分:核桃
7、。目的在于提供食品及食品生产过程中核桃致敏原的免疫层析测定方法;第 17 部分:芝麻。目的在于提供食品及食品生产过程中芝麻致敏原的酶联免疫吸附和免疫层析测定方法。T/CIFST 021.1720241食品及食品生产过程中食品致敏原的免疫分析检测方法第 17 部分:芝麻1范围本文件描述了食品及食品生产过程中芝麻致敏原的酶联免疫吸附和免疫层析测定方法。本文件中酶联免疫吸附法适用于食品及食品生产过程中的芝麻致敏原定量检测;免疫层析法适用于食品、环境采样和 CIP 生产线原位清洗水中芝麻致敏原的定性检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用
8、文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1芝麻sesame胡麻的籽种。被子植物门,胡麻科,胡麻属。注:又称脂麻、胡麻。第一法酶联免疫吸附法4原理标准溶液及试样中游离的芝麻致敏原被微孔中预先包被的芝麻特异性抗体捕获。加入过氧化物酶标记抗体后,形成酶标记抗体-抗原-抗体夹心复合物。洗板后,加入底物/发色剂后呈显色反应,反应结束后加入终止液终止反应。通过测定 450 nm 波长下吸光度值,芝麻致敏原含量与吸光度值成正比,可得出试样中芝麻致敏原含量。
9、5试剂和材料T/CIFST 021.17-202425.1RIDASCREENFAST Sesame1)芝麻致敏原酶联免疫吸附检测试剂盒应符合附录 A 的要求。5.2食品中芝麻致敏原提取试剂除特别说明外,所有试剂均为分析纯或生化试剂。水为 GB/T 6682 中规定的三级水。5.2.1食品级脱脂奶粉(不含芝麻致敏原)。6仪器和设备6.1酶标仪:配 450 nm 波长滤光片。6.2分析天平:感量 0.01 g。6.3涡旋混匀仪。6.4冷冻离心机:转速不低于 4000 r/min,可实现温度不高于 4。6.5水浴锅:37,60。6.6单道移液器:20 L200 L,100 L1000 L。6.7八
10、道移液器:30 L300 L。7分析步骤7.1试剂配制7.1.11洗涤缓冲液:按照 1 10 比例稀释 10洗涤缓冲液浓缩液,稀释后的 1洗涤缓冲液可贮于2 C8 C 下保存 4 周。如移取 10 mL 10稀释缓冲液浓缩液,加 90 mL 水稀释混匀。1 条微孔需约 15 mL1洗涤缓冲液洗涤。7.1.21致敏原提取缓冲液:按照 110 比例用水稀释 10致敏原提取缓冲液浓缩液,稀释后的 1致敏原提取缓冲液可贮于 2 C8 C 下保存 12 周。稀释前,若 10致敏原提取缓冲液浓缩液中有结晶,则先将其置于 37C 水浴中温育并摇动混匀,直至结晶完全消失。7.1.3含脱脂奶粉的致敏原提取缓冲液
11、:称量 5.00 g 脱脂奶粉(见 5.2.1),加入到 100 mL 1致敏原提取缓冲液(7.1.2)中。按照试样数量配制含脱脂奶粉的致敏原提取缓冲液,且使用时应一次加热到60,且在 24 h 内使用。7.2 试样前处理和提取7.2.1 样品制备对不少于 50 g 或 50 mL 试样进行充分均质。固态类试样粉碎、研磨、过筛(筛板孔径 0.3 mm0.5mm);半固态食品试样匀浆混匀;液态试样振摇混合均匀。7.2.2 样品提取7.2.2.1固态或半固态试样:称取 1.00 g 均质试样至 50 mL 离心管,再加入 20 mL 预热至 60 C 的含脱脂奶粉致敏原提取缓冲液(7.1.3),按
12、照 7.2.2.3 进一步处理试样。1)RIDASCREENFAST Hazelnut 是由 R-Biopharm 拜发公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本文件使用者,并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果,那么可使用这些等效产品。T/CIFST 021.1720243(1)7.2.2.2液态试样:移取 1 mL 试样至 50 mL 离心管,再加入 19 mL 预热至 60 C 的含脱脂奶粉致敏原提取缓冲液(7.1.3),按照 7.2.2.3 进一步处理试样。7.2.2.3试样的进一步处理:将按照 7.2.2.1 和 7.2.2.2 处理后的试样,盖紧管盖后涡旋混匀
13、,然后置于60 C 水浴中孵育 10 min。用冰水快速冷却,再置冷冻离心机中在 4条件下以转速 4000 r/min 离心 10min,必要情况下可使用滤纸过滤,取上清液或者滤液进行检测。此时试样的稀释倍数为 20 倍。7.3加样和测定7.3.1 准备将预包被芝麻蛋白的特异性抗体的微孔插入微孔板架并做好标记,标准溶液和试样均设置双平行。建议一次检测不要超过 3 条微孔板条(24 个板孔),以避免过大的孔间时间差造成对定量结果的不良影响。7.3.2 加样在微孔中平行加入 100 L 标准溶液 15 和试样至微孔,室温(20 C25 C)孵育 10 min。孵育结束后,弃去微孔中液体,每个微孔每
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