DB52∕T1405-2019 白水生姜脱毒试管苗及原原种生产技术规程(贵州省).pdf
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1、 ICS 65.020.20 B 36 DB52 贵州省地方标准 DB52/T 14052019 白水生姜脱毒试管苗及原原种生产 技术规程 Technique Regulations for In vitro Virus-free Plantlet and Stock Plant Production ofBaishui Ginger 2019 - 04 - 30 发布 2019 - 11 - 01 实施贵州省市场监督管理局 发 布 DB52/T 14052019 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 脱毒苗培育 . 1 5 脱毒
2、原原种培育 . 3 6 质量要求 . 3 7 收获与贮藏 . 4 DB52/T 14052019 II 前 言 本标准按照GB/T 1.12009标准化工作导则 第一部分:标准的结构和编写给出的规则起草。 本标准由安顺市农业科学院提出。 本标准由贵州省农业委员会归口。 本标准起草单位:安顺市农业科学院。 本标准主要起草人:吴家丽、牛力立、李用奇、冷云星、赵佐敏、宋生懿、陈红艳、敖艳飞、钟思玲、严云刚、张领、宋贞富、安星、郭海燕、金超、樊祖立、肖祎。 DB52/T 14052019 1 白水生姜脱毒试管苗及原原种生产技术规程 1 范围 本标准规定了白水生姜脱毒试管苗培育、脱毒原原种培育、收获与贮
3、藏。 本标准适用于白水生姜脱毒试管苗及原原种生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB 15618 土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准(试行) NY/T 404 脱毒生姜种姜苗病毒检测技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 脱毒苗 In vitro virus-free plantlet 应用茎尖组织培养技术获得、经检测确认不带烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)的试管苗
4、。 3.2 原原种(G1) Stock cultivar 用脱毒苗在防虫网室等隔离条件下生产出的符合质量标准的种姜。 4 脱毒苗培育 4.1 茎尖分生组织热处理 精选块大肉厚、皮色黄亮光滑、芽眼饱满、无病虫危害和机械损伤的健壮姜块,在自来水下洗净泥土,用0.1的高锰酸钾处理15 min,再用0.5%浓度的多菌灵(80%可湿性粉剂)浸泡2 h后捞出晾干,置于高温灭菌后的湿润珍珠岩中28 催芽,空气相对湿度在80%85%。姜芽萌动3 mm左右后,置于40 45 (8 h/d)温度下热处理30 d。 DB52/T 14052019 2 4.2 脱毒苗离体诱导 4.2.1 外植体采集与灭菌 于培养箱中
5、切取热处理后约2 cm长的幼芽,在自来水下冲洗干净后晾干,在超净工作台上用75%酒精灭菌30 s,再用10%次氯酸钠(NaClO)对幼芽处理15 min,无菌水冲洗5次,无菌滤纸吸干水分备用。 4.2.2 外植体接种及植株再生 将灭菌后的幼芽于体视显微镜下剥取0.1 mm0.3 mm茎尖分生组织,接种于MS+2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA培养基上,诱导再生植株。 4.2.3 再生植株病毒检测 对获得的再生植株, 经有资质的病毒检测单位进行烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒检测, 确认无毒后再继代扩繁及生根培养。 4.3 脱毒苗继代扩繁 将检测无病毒、长势好的壮苗接种于MS+2.
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