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DB63∕T1703-2018 枸杞组织培养育苗技术规程(青海省).pdf
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1、ICS 65.020.20 B 61 DB63 青海省地方标准 DB 63/T 17032018 枸杞组织培养育苗技术规程 2018 - 09 - 25 发布 2018 - 12 - 01 实施青海省质量技术监督局 发 布 DB63/T 17032018 I 前 言 本规程按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本规程由青海省农林科学院提出。 本规程由青海省林业标准化技术委员会归口。 本规程起草单位:青海省农林科学院。 本规程主要起草人:王占林、樊光辉、张得芳、徐生旺、陈进福、张文莲、时保国、李延德、尚安邦、马梦茹、李晨、虞杭、童翠芸、刘晓雯、崔英、张晓程、晁元珍。 DB63/T 17
2、032018 1 枸杞组织培养育苗技术规程 1 范围 本规程规定了枸杞(Lycium barbarum L.)组织培养育苗过程中的培养条件、外植体处理、愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽诱导、生根培养以及组培苗移植技术。 本规程适用于枸杞组织培养育苗。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 DB63/T 236 主要造林树种苗木质量分级 DB63/T 1448 枸杞扦插育苗技术规程 3 组织培养条件 组培
3、室建设、组培流程、管理按照LY/T 1882执行。 培养温度24 28 ,空气湿度50%80%,光照强度1000 lx 1600 lx,光照时间16 h/d。 4 外植体材料 选择树势强健、无病虫害的枸杞植株幼嫩叶片或茎尖为组织培养外植体材料。 5 基本培养基的配制 5.1 药品母液的配制 5.1.1 制备细胞分裂素(6-BA,KT) 母液 配制细胞分裂素6-BA或KT 1g/L浓度母液。准确称取6-BA或KT药粉100 mg,加少量蒸馏水,逐渐而缓慢滴入0.1 mol/L HCl溶液的同时,反复摇晃,直至药物全部溶解,最后加蒸馏水定容至l00 ml,盖塞后摇匀。 5.1.2 制备生长素类(I
4、BA,NAA) 母液 配制生长素类IBA或NAA 1g/L浓度母液。准确称取IBA或NAA药粉100 mg,加1.0 ml 蒸馏水,然后逐渐滴入0.1 mol/L NaOH溶液的同时,反复摇晃,直至药物全部溶解,最后加蒸馏水定容至l00 ml,盖塞后摇匀。 5.2 基本培养基 DB63/T 17032018 2 5.2.1 基本培养基为 MS 培养基,培养基成分含量见附录 A。 5.2.2 外植体处理、 愈伤组织诱导和愈伤组织分化采用 1/2MS 培养基, 添加蔗糖 30 g/L、 琼脂 6.0 g/L,调节 pH 为 5.8。 5.2.3 不定芽诱导和生根培养采用 1/2MS 培养基(大量元
5、素和 Ca2+含量减半,其他元素含量不变),添加蔗糖 30 g/L、琼脂 6.0 g/L,调节 pH 为 6.1。 5.2.4 将培养基溶液在培养瓶中进行分装,培养液在组培瓶中的高度控制在 1.0cm1.2cm,在高压灭菌锅(121)灭菌 25 min。 6 外植体处理 采集长势良好、 半木质化枸杞枝条上叶片, 用毛刷蘸洗衣粉溶液轻轻的刷洗后, 浸泡25 min30 min,再用流水冲洗2h。在超净工作台上用75%酒精消毒30 s,无菌水冲洗2遍,再用0.1mg/LHgCl2消毒10 min,最后用无菌水冲洗5次以上,即可以进行接种工作。 7 叶片愈伤组织诱导 7.1 愈伤组织诱导培养基采用
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