DB3310∕T 61—2019 荸荠组培种苗生产技术规程(台州市).pdf
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1、ICS 65.020.20 B 05 DB3310 浙江省台州市地方标准 DB 3310/T 612019 荸荠组培种苗生产技术规程 Technical specification for tissue culture seedling production of water chestnut (Eleocharis dulcis) 2019 - 12 - 12 发布 2020 - 01 - 01 实施 台州市市场监督管理局 发 布 DB3310/T 612019 I 前 言 本标准按 GB/T 1.12009 给出的规则起草。 本标准由台州市农业农村局提出并归口。 本标准起草单位:台州市农业
2、科学研究院、台州市农业技术推广总站。 本标准主要起草人:赖小芳、唐兴国、潘晓飚、陈银龙、曾孝元、陈伟强、洪霞、王伯诚。 DB3310/T 612019 1 荸荠组培种苗生产技术规程 1 范围 本规程规定了荸荠组培相关的术语和定义、组培种苗生产、组培苗炼苗、出苗、组培苗二段育秧技术等内容。 本标准适用于荸荠种苗组培快繁生产、管理与田间应用的全过程。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 NY/T 1276 农药
3、安全使用规范 总则 NY/T 2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 荸荠组培种苗 利用荸荠球茎顶芽或侧芽作为外植体,通过植物组织培养方式培育获得的完整植株。 3.2 外植体 从自然生长的活体上获取的用于进行植物组织培养的起始材料。 3.3 试管苗 在培养容器中生长且已达到移栽标准的根、茎、叶俱全的完整植株。 3.4 琼脂苗(组培瓶苗) 生长在固体培养基(凝固剂一般为琼脂)中的组培生根苗。 3.5 无琼脂苗 从培养容器中取出并洗去表面培养基的组培生根苗。 3.6 继代培养 植物组织培养过程中,培养物经过一段时间培养后,基于补充培养基养
4、分、清除有害代谢产物、防止培养物老化等目的,定期将其接种到新配制的培养基上继续进行培养的过程。 DB3310/T 612019 2 4 组培种苗生产 4.1 无菌材料的获得 4.1.1 外植体选择 选择具有原品种典型性状、芽头健壮、大小均匀、无病完整的荸荠球茎,切取顶芽或饱满腋芽。 4.1.2 外植体处理、消毒及接种 4.1.2.1 外植体处理 将球茎用 1.5 % 洗衣粉溶液浸泡(1015) min,洗净表面泥土,自来水冲洗 1 h,剥除球茎顶芽的叶鞘,挖取带一点球茎果肉的顶芽或侧芽,剔除果肉,切取(35) mm 的芽尖。 4.1.2.2 外植体消毒 无菌条件下,将切出的芽尖用 0.1 升汞
5、溶液(内加 23 滴“Tween-80”表面活性剂,以便提高灭菌剂活力)浸泡搅拌(810)min,无菌水冲洗 5 次8 次,吸干表面水分,通过解剖镜对芽尖进行二次切割,切取(0.51) mm 的茎尖,将茎尖接入预先准备的培养基上。 4.1.2.3 外植体接种 外植体接种按 NY/T 2306-2013“9.3 外植体接种”实施。 4.1.2.4 培养基配方 相关培养基配方参见附录 A。 1.1.1 外植体培养 4.1.2.5 材料摆放 将接种完成材料置于专用培养筐,整齐排放于培养架上进行培养。 4.1.2.6 培养环境 培养温度(25 3) ,光照强度(10001500) lx,光照时间(10
6、12) h/d。 4.1.2.7 材料管理 每周观察记录,及时清理污染。 4.2 不定芽诱导 4.2.1 无菌条件下,取本标准“4.1”获得的高(1.52.0) cm 的无菌、成活芽萌发材料,从芽基部切取结构完整的芽, 接入不定芽诱导培养基, 培养环境同本标准“4.1.3”。 接种过程按照 NY/T 2306-2013 “10 接种操作”实施。 4.2.2 相关培养基配方参见附录 A。 4.3 扩大繁殖 4.3.1 增殖培养 DB3310/T 612019 3 4.3.2 无菌条件下,将本标准“4.2”获得的簇生、增殖良好荸荠培养材料从簇生芽基部切割分离,保持丛芽高度(1.53.0) cm,以
7、 2 个3 个不定芽为接种单位,接入增殖培养基,培养环境同本标准“4.1.3”。每 35 d40 d 继代 1 次。 4.3.3 相关培养基配方参见附录 A。 4.3.4 培养材料保存 将待保存材料移至温度(18 2)、光照强度(8001000)lx、光照时间(810) h/d环境中培养。每隔 90 d 继代 1 次。 4.3.5 培养材料保存周期 在上述环境中培养保存的组培材料,继代保存代数应控制在 15 代以内。 4.4 生根培养 4.4.1 材料选择 选择株高5 cm 的增殖苗进行生根诱导。 4.4.2 接种方法 无菌条件下,将簇生增殖苗从基部切割分离,以单个不定芽为单位接入生根诱导培养
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