T∕CNHFA 435-2024 益生菌剂胃液耐受性检验方法.pdf
《T∕CNHFA 435-2024 益生菌剂胃液耐受性检验方法.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《T∕CNHFA 435-2024 益生菌剂胃液耐受性检验方法.pdf(12页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、ICS 67.040 CCS X 60 中 国 营 养 保 健 食 品 协 会 团 体 标 准 T/CNHFA 4352024 益生菌剂胃液耐受性检验方法 Inspection methods for resistance to gastric juice of probiotics cultures preparations 2024-01-22 发布 2024-03-01 实施 中国营养保健食品协会 发 布 T/CNHFA 4352024 I 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文
2、件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由中国营养保健食品协会保健食品研发专业委员会提出。本文件由中国营养保健食品协会归口。本文件起草单位:中国营养保健食品协会保健食品研发专业委员会、汤臣倍健股份有限公司、中国食品发酵工业研究院、内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司、中国检验检疫科学研究院综合检测中心、南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室、丹尼斯克(中国)有限公司、科汉森(北京)贸易有限公司、恒天然商贸(上海)有限公司、河北一然生物科技股份有限公司、通标标准技术服务有限公司、Life-Space Group Pty Ltd。本文件主要起草人:迮晓雷、李斌、赵溪、张旭光、刘明、郭海峰、金苏
3、、杜凌、朱萧燕、王慧颖、杨潞芳、杨玲、陈军、古哈尔尼沙 格热提、毛跃建、陈玉新、李良、尚可、郭晶、张晓娜、赵静波、高晓旭、丘燕、陆歆瑶、滕堃如、路江浩、王园园、罗诗慧。本文件是首次发布。T/CNHFA 4352024 1 益生菌剂胃液耐受性检验方法 1 范围 本文件规定了益生菌剂在模拟胃液中的耐受性检验方法。本文件适用于粉末状和颗粒状益生菌剂的胃液耐受性检验,其他菌剂的胃液耐受性检验参照使用。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成文本必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。G
4、B/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备 GB/T 602 化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备 GB/T 603 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T 6682 分析实验室用 水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 益生菌 probiotics 当摄入足够数量时,可以对人体起到有益健康作用的活的微生物。3.2 益生菌剂 probiotics cultures preparations 一种或多种活性益生菌,经发酵、富集、乳化或不乳化、干燥或不干燥、添加或不添加辅料、混合或不混合、包装等工序制成的制剂。3.3 胃液耐受性 resistance to
5、 gastric juice 益生菌剂在胃部环境中耐受胃液的程度,以益生菌经胃液处理后的活菌总数与初始活菌总数的比值表示。4 设备和材料 除微生物实验室常规设备外,其他设备和材料如下:4.1 天平:感量 0.01 g。4.2 pH 计:精确度 0.01,每次使用前需按照仪器说明书进行校准。T/CNHFA 4352024 2 4.3 涡旋混合器。4.4 恒温水浴锅:50 2。4.5 拍击式均质器及无菌均质袋。4.6 恒温培养箱:37 2。4.7 容量瓶:10 mL、100 mL。4.8 无菌试管:18 mm180 mm 或 15 mm150 mm。4.9 微量移液器及无菌吸头:1 mL、5 mL
6、。4.10 无菌注射器。4.11 针头过滤器:0.22 M。4.12 离心管:50 mL。4.13 无菌培养皿:直径 90 mm。4.14 厌氧装置。5 培养基和试剂 本方法中所用的水,在未注明其他要求时,应符合GB/T 6682中三级水的规格,所用试剂,在未注明其他规格时,均指分析纯。分析中所用标准滴定溶液,杂质测定用标准溶液、制剂及制品,在没有注明其他要求时,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备。5.1 氢氧化钠:CAS 号 1310-73-2。5.2 浓盐酸(12 mol/L):CAS 号 7647-01-0。5.3 氯化钾:CAS 号 7447-40-7。
7、5.4 磷酸二氢钾:CAS 号 7778-77-0。5.5 碳酸氢钠:CAS 号 144-55-8。5.6 氯化钠:CAS 7647-14-5。5.7 六水合氯化镁:CAS 号 7791-18-6。5.8 碳酸铵:CAS 号 506-87-6。5.9 二水合氯化钙:CAS 号 10035-04-8。5.10 胰蛋白胨:CAS 号 73049-73-7。5.11 L-半胱氨酸盐酸盐一水物:CAS 号 7048-04-6。5.12 十二水合磷酸氢二钠:CAS 号 10039-32-4。5.13 矿物油:CAS 号 8042-47-5。6 试剂溶液 6.1 1 mol/L 氢氧化钠溶液 称取4.0
8、g氢氧化钠于烧杯中,加水并搅拌溶解,待溶液冷却到室温后用水定容至100 mL。6.2 1 mol/L 盐酸溶液 移取8.3 mL浓盐酸溶于80 mL水中,再加水定容至100 mL。6.3 电解质溶液 A T/CNHFA 4352024 3 称取氯化钾0.064 g、磷酸二氢钾0.015 g、碳酸氢钠0.263 g、氯化钠0.345 g、六水合氯化镁0.003 g、碳酸铵0.006 g、1.5 g胰蛋白胨、0.05 g L-半胱氨酸盐酸盐一水物,加入95 mL蒸馏水充分溶解,用浓盐酸(5.2)或1 mol/L氢氧化钠溶液(6.1)调节pH至3.0,定容至100 mL,121 高压灭菌15 min
9、。6.4 电解质溶液 B 称取二水合氯化钙0.022 g,加水溶解并定容至100 mL,121 高压灭菌15 min。6.5 溶解液 称取氯化钠8.5 g,L-半胱氨酸盐酸盐一水物0.5 g,加入1 000 mL蒸馏水充分溶解,分装后121 高压灭菌15 min。7 检验步骤 益生菌剂胃液耐受性按图1所示步骤进行检验。图1 益生菌剂胃液耐受性检验步骤 8 操作步骤 8.1 胃蛋白酶活力测定 按附录A方法测定胃蛋白酶活力。8.2 胃液耐受性检验 8.2.1 模拟胃液条件选择 T/CNHFA 4352024 4 根据益生菌剂样品特点和试验目的,可选择不同模拟胃液条件开展益生菌剂胃液耐受性检验,方法
10、主要参数如表1所示。表1 胃液耐受性检验方法主要参数 模拟胃液条件 pH 值 模拟胃液处理时间(h)标准模拟胃液 3.0 2.0 空腹模拟胃液 2.0 0.5 饱腹模拟胃液 4.0 3.0 8.2.2 检验步骤 8.2.2.1 取 8.0 mL 电解质溶液 A(6.3)和 1.0 mL 电解质溶液 B(6.4)于烧杯中,添加相当于 4 000 U 的胃蛋白酶,根据表 1 选择一种模拟胃液条件,利用 1 mol/L 盐酸溶液(6.2)或 1 mol/L 氢氧化钠溶液(6.1)调节 pH 值,定容至 10 mL,混匀后经 0.22 m 无菌滤膜过滤制备模拟胃液,现配现用。8.2.2.2 以无菌操作
11、称取 1.0 g 样品,置于装有 99 mL 溶解液(6.5)的无菌均质袋中,充分混匀后,以 10 次/秒通过均质器拍打 2 min,直至样品分散均匀,制备成样品菌液,现配现用。8.2.2.3 按附录 B 测定样品菌液(8.2.2.2)活菌总数,记为 N1。8.2.2.4 取 5.0 mL 模拟胃液(8.2.2.1)和 5.0 mL 样品菌液(8.2.2.2)于 50 mL 离心管中,涡旋混匀,用胶头滴管在溶液上方缓慢加入约 5 mL 矿物油,使溶液上方形成油封层。8.2.2.5 根据 8.2.2.1 步骤选择的模拟胃液条件,将离心管置于 37 恒温水浴锅培养规定的处理时间,利用胶头滴管移除矿
12、物油,按附录 B 测定活菌总数,记为 N1。8.2.2.6 重复步骤 8.2.2.1-8.2.2.5 完成两次胃液耐受性检验,其中 8.2.2.3 步骤中活菌总数测定结果记为 N2和 N3,8.2.2.5 步骤中活菌总数测定结果记为 N2和 N3。8.2.2.7 计算 8.2.2.3 步骤(N1、N2和 N3)和 8.2.2.5 步骤(N1、N2和 N3)活菌总数测定结果的相对平均偏差,两组数据的相对平均偏差均应不大于 15%,否则应重新完成胃液耐受性检验。8.2.3 胃液耐受性计算 胃液耐受性按式(1)计算:%10031222332211)(NNNNNNA(1)式中:A 胃酸耐受性,用百分率
13、(%)表示;N1 第一次胃液耐受性检验初始活菌总数,单位为CFU/mL;N2 第二次胃液耐受性检验初始活菌总数,单位为CFU/mL;N3 第三次胃液耐受性检验初始活菌总数,单位为CFU/mL;N1 第一次胃液耐受性检验处理后活菌总数,单位为CFU/mL;N2 第二次胃液耐受性检验处理后活菌总数,单位为CFU/mL;N3 第三次胃液耐受性检验处理后活菌总数,单位为CFU/mL;2 稀释倍数换算系数;1/3 三次平行数据取平均值;计算结果表示至整数。9 报告 T/CNHFA 4352024 5 9.1 应根据模拟胃液实验条件,报告益生菌胃液耐受性,结果以保留整数形式表示,报告单位为%。9.2 若胃
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- TCNHFA 435-2024 益生菌剂胃液耐受性检验方法 CNHFA 435 2024 益生菌剂 胃液 耐受 检验 方法
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【曲****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【曲****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。