T∕XJAQ 0003-2024 大蒜及其制品中蒜氨酸的测定 高效液相色谱法.pdf
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1、 ICS 67.080.20 CCS B 31 新 疆 维 吾 尔 自 治 区 质 量 协 会 团 体 标 准 大蒜及其制品中蒜氨酸的测定 高效液相色谱法 Determination of alliin in garlic and its products High performance liquid chromatography 2024-01-25 发布 2024-02-01 实施 新疆维吾尔自治区质量协会 发 布 T/XJAQ 00032024 T/XJAQ 00032024 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 原理.1 5 试剂或材料.
2、1 6 仪器设备.2 7 样品及试样前处理.2 8 测定方法.3 9 试验数据处理.4 10 精密度.4 11 再现性.4 附录 A(规范性附录)大蒜及其制品中蒜氨酸的 HPLC 参考色谱图.5 参考文献.8 T/XJAQ 00032024 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由新疆胡蒜研究院(有限公司)提出。本文件由新疆维吾尔自治区质量协会归口。本文件起草单位:新疆胡蒜研究院(有限公司)、新疆医科大学、新疆大蒜药用研究重点实验室、新疆天然药
3、物活性组分与释药技术重点实验室、新疆维吾尔自治区药物研究所、中国科学院新疆理化技术研究所、新疆维吾尔自治区药品检验研究院、新疆维吾尔自治区标准化研究院。本文件主要起草人:史荣梅、刘睿婷、宋百灵、李新霞、马雪红、李兰兰、肖文浚、张春子、赵荣梅、胡小明、陈丽、郑瑞芳、刁娟娟、李莎莎、张露。T/XJAQ 00032024 1 大蒜及其制品中蒜氨酸的测定 高效液相色谱法 1 范围 本文件规定了大蒜及其制品(大蒜粉、大蒜片、大蒜片剂、大蒜软膏剂)中活性成分蒜氨酸含量测定的原理、试剂和材料、仪器设备、样品和试样前处理、测定方法、试验数据处理和精密度等。本文件适用于大蒜及其制品(大蒜粉、大蒜片、大蒜片剂、大
4、蒜软膏剂)中蒜氨酸的含量测定。本文件的检出限为 1.818 g/mL,定量限为 6.364 g/mL。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。蒜氨酸 alliin S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜(S-allyl-L-cysteine sulfoxide),分子式为 C6H11NO3S,CAS#:556-27-4,相对分子质量为 17
5、7.22。4 原理 大蒜及其制品中蒜氨酸在紫外光区214 nm波长处有最大吸收,经灭酶、水提取、液相色谱分离后,紫外检测器测定,外标法定量。5 试剂或材料 试剂 5.1.1 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682 规定的一级水。5.1.2 甲醇(CH3OH):分析纯(用于样品前处理)、色谱纯(用于 HPLC 分析)。5.1.3 三氟乙酸(CF3COOH):色谱纯。T/XJAQ 00032024 2 溶液配制 三氟乙酸溶液(0.06%,体积分数):准确吸取 0.60 mL 三氟乙酸(5.1.3)于预先加入一定量水的1000 mL 容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,经 0.22
6、m 滤膜过滤。标准样品 蒜氨酸标准样品(alliin,C6H11NO3S,CAS#:556-27-4):含量99.0%。标准溶液配制 蒜氨酸标准储备液(200 mg/L):称取蒜氨酸标准物质 0.020 g(精确至 0.01mg)置于 100 mL 容量瓶中,用水溶解,稀释定容至刻度,摇匀,4保存,有效期 1 个月。临用前,精密量取储备液 1 mL,置 10 mL 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,色谱分析前用 0.22 m微孔滤膜过滤。6 仪器设备 高效液相色谱仪:配备紫外检测器。分析天平:感量 0.1 mg、0.01 mg。匀浆仪,转速 20000 r/min。高速粉碎机。研钵。超声波清洗仪。
7、离心机:转速 8000 r/min。磁力搅拌恒温水浴锅:可控温控速。实验室可调温电炉电子万用炉。国家标准药检筛(150 m)。7 样品及试样前处理 大蒜 取大蒜样品,平行做三份试验。称取试样 50 g(精确至 0.1 mg),置于 500 mL 烧杯中,加水 200 mL,水煮灭酶 10 min,室温冷却,匀浆 1 min(20000 r/min),浆液定量转移置 500 mL 容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,离心(8000 r/min)15 min,精密移取上清液 1 mL,置 50 mL 容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。色谱分析前用 0.22 m 微孔滤膜过滤。大蒜粉(片)大蒜粉:通过 1
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