特殊染色ppt课件.pptx
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1、第三讲第三讲常用特常用特殊殊染染色色什么是特殊染色什么是特殊染色特殊染色为常规染色(即苏木素、伊红)特殊染色为常规染色(即苏木素、伊红)的必要补充,又称选择性染色,只有相对的特异的必要补充,又称选择性染色,只有相对的特异性,如性,如PAS阴性反应它有糖元。阴性反应它有糖元。意义:意义:(1)特染能显示在常规染色切片中不明显的部分,)特染能显示在常规染色切片中不明显的部分,如革兰氏染色、细菌染色。如革兰氏染色、细菌染色。(2)区别)区别HE染色中不能鉴别的组织病变,如染色中不能鉴别的组织病变,如VG染色染色区别胶元纤维和平滑肌。区别胶元纤维和平滑肌。(3)显示某些常规染色中不能着色的物质,如网染
2、)显示某些常规染色中不能着色的物质,如网染才能显示网状纤维,常规才能显示网状纤维,常规HE染色是染不出来的。染色是染不出来的。因此,特殊染色也是制片染色中不可缺少的组成部分,因此,特殊染色也是制片染色中不可缺少的组成部分,它在病理诊断常着辅助作用,也为科研提供依据。它在病理诊断常着辅助作用,也为科研提供依据。二、学习特染技术应掌握的重点二、学习特染技术应掌握的重点(注意事项)(注意事项)(1)染色方法的成败,应该在温度、浓度、时间和)染色方法的成败,应该在温度、浓度、时间和PH值等方面找原因。值等方面找原因。(2)注意特染的应用范围,如某种病变应用什么方)注意特染的应用范围,如某种病变应用什么
3、方法染色才能达到目的,一般先在法染色才能达到目的,一般先在HE切片所见的要求去切片所见的要求去选择适当的特染方法,一种或多种选择适当的特染方法,一种或多种。(3)必须掌握各种特殊染色的结果,避免)必须掌握各种特殊染色的结果,避免导致错误的结论或严重的误诊,如在网染时导致错误的结论或严重的误诊,如在网染时把胶元纤维误以为网状纤维。把胶元纤维误以为网状纤维。(4)尽量要阳性切片作对照,便于选择特)尽量要阳性切片作对照,便于选择特染方法,并与染方法,并与HE切片作对照。切片作对照。(5)特染的组织,在其固定、脱水根据要)特染的组织,在其固定、脱水根据要求选择。所用的器皿都必须化学清洗。求选择。所用的
4、器皿都必须化学清洗。三、玻璃器皿的清洁三、玻璃器皿的清洁在病理实验室可用的玻璃器皿,在病理实验室可用的玻璃器皿,都必须经过清洗干净才能使用,清洗都必须经过清洗干净才能使用,清洗的方法依玻璃器皿的新旧而不同。的方法依玻璃器皿的新旧而不同。1、新购玻璃器皿的处理、新购玻璃器皿的处理对于新购买的玻璃器皿应先用洗衣对于新购买的玻璃器皿应先用洗衣粉浸泡洗刷,自来水冲洗后再用粉浸泡洗刷,自来水冲洗后再用12%盐酸水溶液浸泡数小时后,用自来水冲盐酸水溶液浸泡数小时后,用自来水冲洗干净,必要时可用少量蒸馏水洗洗干净,必要时可用少量蒸馏水洗2次次2、使用后玻璃器皿的处理、使用后玻璃器皿的处理每次使用后的玻璃器皿
5、都必须及时彻底每次使用后的玻璃器皿都必须及时彻底清洗干净,以供下次实验之用,如轻视这一清洗干净,以供下次实验之用,如轻视这一步骤,可用的玻璃器皿不够干净,则会影响步骤,可用的玻璃器皿不够干净,则会影响染色效果,甚至导致染色失败,特别在酶组染色效果,甚至导致染色失败,特别在酶组化和银离子反应操作过程中更有严格的要求,化和银离子反应操作过程中更有严格的要求,使用后的玻璃器皿在一般清洗后,还要求用使用后的玻璃器皿在一般清洗后,还要求用硫酸清洗液浸泡。硫酸清洗液浸泡。硫酸清洗液配制硫酸清洗液配制重铬酸钾重铬酸钾80g自来水自来水1000ml浓硫酸(工业用)浓硫酸(工业用)120m新配制的清洁液为红褐色
6、,反复使用一新配制的清洁液为红褐色,反复使用一段时间后,慢慢变成绿色,说明清洁液段时间后,慢慢变成绿色,说明清洁液已失败,不能继续使用应重新配制。已失败,不能继续使用应重新配制。3、玻璃器皿的清洗方法、玻璃器皿的清洗方法任何玻璃器皿都必须用自来水冲洗,然后把任何玻璃器皿都必须用自来水冲洗,然后把残余药液或残余药液或染染液洗去。液洗去。用毛刷沾洗衣粉擦干净。用毛刷沾洗衣粉擦干净。自来水冲洗,蒸馏水洗自来水冲洗,蒸馏水洗2次。次。把晾干的器皿轻轻置入清洁液浸泡数日。把晾干的器皿轻轻置入清洁液浸泡数日。取出器皿,用自来水把器皿内外彻底冲洗干取出器皿,用自来水把器皿内外彻底冲洗干净,最后用蒸馏水洗净,
7、最后用蒸馏水洗2次。次。把玻璃器皿倒置于有孔架上自然晾干或温箱把玻璃器皿倒置于有孔架上自然晾干或温箱中烤干,最后存放橱内备用。中烤干,最后存放橱内备用。常用的特染常用的特染第一节第一节结缔组织染色结缔组织染色一、胶元纤维染色(一、胶元纤维染色(VG染色)染色)胶元纤维的分部组成成分胶元纤维的分部组成成分胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之一,分布最为广泛,含量最多。主要分布一,分布最为广泛,含量最多。主要分布于真皮、腱、韧带、骨、透明软骨、动脉、于真皮、腱、韧带、骨、透明软骨、动脉、肠壁肠壁、子宫和基底膜等。胶原纤维具有韧、子宫和基底膜等。胶原纤维具有韧性大,抗拉力
8、强的特点。胶原纤维单位主性大,抗拉力强的特点。胶原纤维单位主要由纤维母细胞合成。要由纤维母细胞合成。苦味酸苦味酸酸性品红法酸性品红法1VG染液试剂配制染液试剂配制1%酸性品红酸性品红10ml苦味酸饱和液苦味酸饱和液90ml此液常分别配制临用时加以混合,不此液常分别配制临用时加以混合,不能久用。能久用。【染色步骤染色步骤】(1)组织固定于)组织固定于10%早醛液中,常规脱水包埋早醛液中,常规脱水包埋(2)组织切片脱腊至水。)组织切片脱腊至水。(3)V-G染液染液2-5(酸性品红(酸性品红1:苦味酸饱和液:苦味酸饱和液9)(4)倾去染液,无水酒精急速脱水,用滤纸吸干)倾去染液,无水酒精急速脱水,用
9、滤纸吸干(5)二甲苯透明,中性树胶封片。)二甲苯透明,中性树胶封片。【结果结果】胶元纤维呈红色,肌纤维、胞质及胶元纤维呈红色,肌纤维、胞质及红细胞黄色。红细胞黄色。胶元纤维染色应用胶元纤维染色应用胶原纤维染色在病理诊断上主要用于鉴定梭胶原纤维染色在病理诊断上主要用于鉴定梭形、纤维形细胞肿瘤的组织来源;形、纤维形细胞肿瘤的组织来源;常常要在纤维、平滑肌和神经三者之中作出常常要在纤维、平滑肌和神经三者之中作出选择。选择。观察动脉硬化的心脏,在观察动脉硬化的心脏,在H切片中,心肌切片中,心肌内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红色,而作胶内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红色,而作胶原纤维染色可将胶原组织和肌
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