胰腺癌细胞系的表型及基因型介绍.ppt
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1、PPTPPT制作:制作:杨杨金收金收胰腺癌胰腺癌细胞系胞系的表型及基因的表型及基因型介型介绍1 1.n n胰腺癌细胞系能够用来进行胰腺癌相关实验的原因(1)胰腺癌中常见的四种基因(K-ras、p16、p53、Smad4)突变的比例和胰腺癌细胞系中其突变的比例接近;(2)胰腺癌细胞系不同的表型和基因型代表胰腺癌不同的亚类;利用胰腺癌细胞系进行机制推理和因果实验,比如不同特定蛋白的表达和肿瘤生长、侵犯、转移之间的关系,以及化疗耐药实验。2 2.几种常几种常几种常几种常见见胰腺癌胰腺癌胰腺癌胰腺癌细细胞系的来源胞系的来源胞系的来源胞系的来源AsPC-1AsPC-1AsPC-1AsPC-1细细胞:胞:
2、胞:胞:源自胰源自胰头头癌原癌原发肿发肿瘤瘤有有转转移,移,转转移至腹部器官、腹水移至腹部器官、腹水分泌:黏蛋白、分泌:黏蛋白、CEACEABxPC-3BxPC-3BxPC-3BxPC-3细细胞:胞:胞:胞:源自胰体癌原源自胰体癌原源自胰体癌原源自胰体癌原发肿发肿瘤瘤瘤瘤无无无无转转移移移移分泌:分泌:分泌:分泌:CEACEACEACEA、CA199CA199CA199CA199、黏蛋白等、黏蛋白等、黏蛋白等、黏蛋白等裸鼠移植生裸鼠移植生裸鼠移植生裸鼠移植生长类长类似患者原位似患者原位似患者原位似患者原位肿肿瘤瘤瘤瘤Capan-1Capan-1Capan-1Capan-1细细胞:胞:胞:胞:源
3、自胰源自胰源自胰源自胰头头癌肝癌肝癌肝癌肝脏转脏转移灶移灶移灶移灶有有有有转转移移移移,转转移移移移至至至至区区区区域域域域淋淋淋淋巴巴巴巴结结、肝肝肝肝脏脏等等等等分泌:黏蛋白分泌:黏蛋白分泌:黏蛋白分泌:黏蛋白Capan-2Capan-2Capan-2Capan-2细细胞:胞:胞:胞:源自胰源自胰头头癌癌有侵犯,浸有侵犯,浸润润十二指十二指肠肠壁壁远远端端CFPAC-1CFPAC-1CFPAC-1CFPAC-1细细胞:胞:胞:胞:源源自自胰胰头头癌癌肝肝脏脏转转移移灶灶(并并发发囊囊性性纤维纤维化)化)有有转转移,广泛移,广泛转转移至肝移至肝脏脏CFTRCFTR突突变变:引引起起先先天天性
4、性胰胰腺腺炎炎新新发发胰腺癌危胰腺癌危险险因素(存在争因素(存在争议议)HPACHPACHPACHPAC细细胞:胞:胞:胞:源自胰源自胰头头癌癌分化分化稳稳定、良好定、良好HPAF-IIHPAF-IIHPAF-IIHPAF-II细细胞:胞:胞:胞:源源自自胰胰腺腺癌癌腹腹水水癌癌细细胞胞(转转移移至至肝肝脏脏、隔及淋巴隔及淋巴结结)3 3.几种常几种常几种常几种常见见胰腺癌胰腺癌胰腺癌胰腺癌细细胞系的来源胞系的来源胞系的来源胞系的来源Hs 766THs 766THs 766THs 766T细细胞:胞:胞:胞:源源自自胰胰腺腺癌癌淋淋巴巴结结转转移移灶灶MIA Paca-2MIA Paca-2M
5、IA Paca-2MIA Paca-2细细胞:胞:胞:胞:源源自自胰胰体体尾尾癌癌原原位位肿肿瘤瘤有有侵侵犯犯,浸浸润润至至主主动动脉周脉周围围无无 表表 达达 大大 量量 CEACEA且且ALPALP阴性阴性PANC-1PANC-1PANC-1PANC-1细细胞:胞:胞:胞:源源源源自自自自胰胰胰胰头头癌癌癌癌原原原原位位位位肿肿瘤瘤瘤瘤有有有有转转移移移移,转转移移移移至至至至胰胰胰胰周淋巴周淋巴周淋巴周淋巴结结未未检测检测到到CEACEASU.86.86SU.86.86SU.86.86SU.86.86细细胞:胞:胞:胞:源源自自胰胰头头癌癌肝肝脏脏转转移灶移灶有有转转移移,广广泛泛肝肝脏
6、脏转转移移4 4.细细胞的粘附性胞的粘附性胞的粘附性胞的粘附性细细胞的粘附性是通胞的粘附性是通胞的粘附性是通胞的粘附性是通过细过细胞外基胞外基胞外基胞外基质质和和和和细细胞表面分子接触介胞表面分子接触介胞表面分子接触介胞表面分子接触介导导的:的:的:的:纤连纤连蛋白,一种蛋白,一种发现发现于基底膜和于基底膜和结缔组织结缔组织的糖蛋白的糖蛋白I I型和型和IVIV型胶原蛋白,型胶原蛋白,发现发现于于组织间质组织间质和基底膜和基底膜层层粘粘连连蛋白,基底膜中主要的非胶原蛋白蛋白,基底膜中主要的非胶原蛋白相关研究:相关研究:相关研究:相关研究:Capan-1Capan-1比比Mia-paca-2Mi
7、a-paca-2更易更易连连接到接到I I型胶原蛋白型胶原蛋白Capan-1Capan-1和和Mia-paca-2Mia-paca-2对层对层粘粘连连蛋白的粘附性无明蛋白的粘附性无明显显差异,有研究也表明差异,有研究也表明Capan-1Capan-1稍稍逊逊Bxpc-3Bxpc-3和和panc-1panc-1对对I I型胶原蛋白粘型胶原蛋白粘连连性近似性近似Bxpc-3Bxpc-3和和panc-1panc-1对层对层粘粘连连蛋白粘附性近似,有研究也表明,蛋白粘附性近似,有研究也表明,Bxpc-3Bxpc-3更更强强5 5.细细胞的粘附性胞的粘附性胞的粘附性胞的粘附性影响研究差异的影响研究差异的
8、影响研究差异的影响研究差异的变变量:量:量:量:细细胞定量技胞定量技术术的不同,如分光光度法和光学的不同,如分光光度法和光学显显微微镜镜的差异的差异细细胞培养条件胞培养条件对细对细胞外基胞外基质质的的处处理方法理方法对对研究者建研究者建研究者建研究者建议议:注意引用既有的研究,注意引用既有的研究,认认真真阐阐明不同明不同细细胞系的黏附特性胞系的黏附特性6 6.细细胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯相关相关相关相关实验实验方法:方法:方法:方法:细细胞增殖胞增殖实验实验MTTMTTCCK8CCK8细细胞迁移胞迁移实验实验transwell using Boyden cham
9、berstranswell using Boyden chamberswound-healing cell migation assaywound-healing cell migation assay(细细胞划痕胞划痕实验实验)细细胞侵犯胞侵犯实验实验 transwelltranswell(特定基(特定基质质)*特定基特定基质质:人工基:人工基质质胶(包括胶(包括层层粘粘连连蛋白、蛋白、IVIV型胶原蛋白、巢蛋白、硫酸肝素)型胶原蛋白、巢蛋白、硫酸肝素)7 7.细细胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯细细胞迁移性在癌胞迁移性在癌细细胞胞转转移中移中发挥发挥重要作用。重要作
10、用。细细胞迁移相关研究:胞迁移相关研究:胞迁移相关研究:胞迁移相关研究:Panc-1Panc-1Panc-1Panc-1(多是(多是(多是(多是单细单细胞迁移)比胞迁移)比胞迁移)比胞迁移)比bxpc-3bxpc-3bxpc-3bxpc-3(多是整个(多是整个(多是整个(多是整个细细胞胞胞胞团团的迁移)有的迁移)有的迁移)有的迁移)有5 5 5 5倍的倍的倍的倍的能能能能动动性性性性Panc-1Panc-1细细胞在胞在I I型胶原蛋白型胶原蛋白transwelltranswell中比中比bxpc-3bxpc-3能能动动性更好性更好HPAF-IIHPAF-II比比bxpc-3bxpc-3能能动动
11、性好性好高侵犯癌症的患者高侵犯癌症的患者发现时发现时,多是晚期,多是晚期转转移性疾病,移性疾病,严严重影响患者的重影响患者的预预后。后。细细胞侵犯相关研究:胞侵犯相关研究:胞侵犯相关研究:胞侵犯相关研究:Capan-1Capan-1和和mia-paca-2mia-paca-2在人工基在人工基质质胶中有相似的侵犯特性胶中有相似的侵犯特性Bxpc-3Bxpc-3比比mia-paca-2mia-paca-2有更有更强强的侵犯能力,有研究也表明二者近似的侵犯能力,有研究也表明二者近似Panc-1Panc-1比比mia-paca-2mia-paca-2有更有更强强的侵犯能力,有研究也表明的侵犯能力,有研
12、究也表明miamia更更强强8 8.细细胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯胞的迁移和侵犯影响研究差异的影响研究差异的影响研究差异的影响研究差异的变变量量量量检测检测侵犯性能的侵犯性能的试剂试剂细细胞培养条件胞培养条件细细胞培养胞培养时间时间细细胞定量技胞定量技术术对对研究者建研究者建研究者建研究者建议议在得出在得出实验实验中侵犯能力的的中侵犯能力的的结论时结论时,首先,首先阐阐明本明本实验细实验细胞系的侵犯特点。胞系的侵犯特点。9 9.血管生成能力血管生成能力血管生成能力血管生成能力肿肿瘤微血管密度(瘤微血管密度(TMVDTMVD)是至关重要的)是至关重要的肿肿瘤瘤发发展和患者生存的展
13、和患者生存的预测预测指指标标,在大部分在大部分肿肿瘤中(如乳腺癌、前列腺癌)介瘤中(如乳腺癌、前列腺癌)介导导心血管的生成。心血管的生成。肿肿瘤的增殖和瘤的增殖和心血管的生成密切相关,其促血管生成因子多于抗血管生成因子,其中的促心血管的生成密切相关,其促血管生成因子多于抗血管生成因子,其中的促因子如血管内皮生因子如血管内皮生长长因子和胰腺癌的因子和胰腺癌的TMADTMAD密切相关。促血管生成因子的高密切相关。促血管生成因子的高表达不表达不仅仅促促进进中中肿肿瘤血管生成,而且能瘤血管生成,而且能够够促促进肿进肿瘤瘤细细胞有胞有丝丝分裂的分裂的进进行。行。促血管生成因子:促血管生成因子:促血管生成
14、因子:促血管生成因子:细细胞因子,如胞因子,如IL-1IL-1、IL-8IL-8趋趋化因子,化因子,酶类酶类其他其他肿肿瘤瘤产产物物COX-2COX-2COX-2COX-2在促在促在促在促进肿进肿瘤血管生成中的作用:瘤血管生成中的作用:瘤血管生成中的作用:瘤血管生成中的作用:促促进进AAAA转转化化为为PGE2PGE2,PGE2PGE2为为一种血管生成因子一种血管生成因子PGEPGE可激活可激活NF-kBNF-kBNF-kBNF-kB可以促可以促进进COX-2COX-2的的转录转录和翻和翻译译IL-8IL-8IL-8IL-8可以介可以介可以介可以介导细导细胞增殖和血管内皮胞增殖和血管内皮胞增殖
15、和血管内皮胞增殖和血管内皮细细胞胞胞胞趋趋化运化运化运化运动动,从而促,从而促,从而促,从而促进肿进肿瘤的生瘤的生瘤的生瘤的生长长1010.血管生成能力血管生成能力血管生成能力血管生成能力相关研究:相关研究:相关研究:相关研究:BxPC-3,Capan-1,Capan-2 and HPAF-IIBxPC-3,Capan-1,Capan-2 and HPAF-II可表达可表达COX-2COX-2,而而AsPC-1,MIA AsPC-1,MIA PaCa-2PaCa-2、PANC-1PANC-1无表达,其中尤其是无表达,其中尤其是Capan-2Capan-2表达大量的表达大量的 COX-2 COX
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