DB12_T 1190-2023牛乳中A2型β-酪蛋白(A2奶)鉴别技术规程.docx
《DB12_T 1190-2023牛乳中A2型β-酪蛋白(A2奶)鉴别技术规程.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《DB12_T 1190-2023牛乳中A2型β-酪蛋白(A2奶)鉴别技术规程.docx(9页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、ICS 65.020.3012CCS B 45天津市地方标准DB12/T 11902023牛乳中A2 型-酪蛋白(A2 奶)鉴别技术规程Code of practice for identification of A2 type of -casein(A2 milk ) in cows milk2023 - 04 - 07 发布2023 - 05 - 07 实施天津市市场监督管理委员会发 布DB12/T 11902023前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由天津市农业农村委员会提出并归口。 本文件起草单位:天津市农业科学院
2、。本文件主要起草人:马毅、谭冬飞、陈丽丽、赵康、张漫、芦娜、王丽学。IDB12/T 11902023牛乳中A2 型-酪蛋白(A2 奶)鉴别技术规程1 范围本文件规定了的牛奶中A2型-酪蛋白(A2奶)的检测原理、主要试剂配制、主要仪器设备、质谱检 测及数据处理参数、检测方法、结果判定、废弃物的处理和检测过程中防止交叉污染的措施。本文件适用于牛奶和奶粉中A2型-酪蛋白(A2奶)的检测。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6
3、682 分析实验室用水规格和实验方法GB/T 19495.2 转基因产品检测实验室技术要求3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1A2 型-酪蛋白 A2 -casein;A2 CSN2-酪蛋白由209个氨基酸组成,其一级序列中的第67位氨基酸的种类为脯氨酸(Proline, P)时,称为A2型-酪蛋白。3.2A2 奶 A2 milk所含-酪蛋白为A2型的牛奶。3.3质荷比 mass-to-charge ratio离子的质量m与其所带的电荷数z之比,以m/z表示。4 检测原理-酪蛋白变体型对应的氨基酸突变位点为第67位组氨酸(Histidine, H)突变为脯氨酸(Proline, P)
4、,不同氨基酸之间存在分子量差异。利用质谱分析技术,根据差异肽段的分子量及质荷比差异将样品蛋白质中存在氨基酸突变的肽段鉴定出来,从而确定氨基酸突变位点,实现对不同突变体型-酪蛋白 检测的目的。5 试剂配制实验所用水为符合GB/T 6682规定的一级水;高压灭菌条件为121,1.034*105Pa压力,蒸汽灭菌 20min。试剂配制如下:7样品裂解液:将 480.4 g 尿素,7.1 g HEPES 溶于 800 mL 蒸馏水中,充分溶解后,定容至 1 L;10% SDS(十二烷基硫酸钠):将 10 g SDS 粉末溶于 80 mL 蒸馏水中,加热至 68助溶,用HCl 调 pH 至 7.2,定容
5、至 1000 mL,0.2 m 的滤膜过滤,高压灭菌;30%丙烯酰胺:将 29 g 丙烯酰胺和 1 g N,N-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为 60 mL 的蒸馏水中, 充分溶解后,定容至 100 mL;1.5mol/L Tris-HCl(pH=8.8):将 181.65 g Tris 溶于 800 mL 水中,加浓盐酸调 pH 至 8.8, 容至 1000 mL;1mol/L Tris-HCl(pH=6.8):将 121.1 g Tris 溶于 800 mL 水中,加浓盐酸调 pH 至 6.8,容至 1000 mL;10%过硫酸铵:将 10 g 过硫酸铵粉末溶于 80 mL 蒸馏水中,充分溶解后
6、,定容至 100 mL;考马斯亮蓝染色液:量取甲醇 45 mL,蒸馏水 45 mL,冰乙酸 10 mL,加入 0.25 g 考马斯亮蓝R-250;考染脱色液:50 mL 碳酸氢铵/乙腈=1:1;1g/L 胰蛋白酶:将 100 g 胰蛋白酶溶解到 100 L 50 mmol/L 乙酸中,-70储存;25mmol/L 碳酸氢铵:将 2.0 碳酸氢铵溶于 800 mL 蒸馏水中,充分溶解后,定容至 1 L。6 仪器设备6.1 单道可调移液器0.252.5l、110l、220l、550l、10100l、20200l、1001000l。6.2 10K 超滤管超滤管截留蛋白分子量:3090 KDa。6.3
7、 离心机最高转速12 000 r/min,最大容量241.5 mL。6.4 电子天平万分之一精度。6.5 凝胶成像分析系统有胶像素12801024,检测灵敏度DNA0.05 ng。6.6 稳压稳流电泳仪输出电压0600 V,输出电流0100 mA。6.7 垂直电泳槽外形尺寸15 cm12 cm13 cm,凝胶板面积10 cm10 cm。6.8 高压灭菌锅使用温度范围45135,最高使用压力0.255 Mpa。6.9 自动双重纯水蒸馏器功率3 000 W,出水量2 500 mL/h。6.10 微波炉功率700 W,容积2 0L。6.11 冰箱4 ,-20 。6.12 电热恒温水浴锅RT+570
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- DB12_T 1190-2023牛乳中A2型-酪蛋白A2奶鉴别技术规程 1190 2023 牛乳 A2 蛋白 鉴别 技术规程
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【Fis****915】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【Fis****915】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。