猪链球菌的检测和鉴定技术.ppt
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1、猪链球菌的检测及鉴定技术链球菌链球菌的分类的分类根据各自的种名,如猪链球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌等1986,38种;2002,60种,从链球菌属成员中划分出去新成立了6个属Abiotrophia,Granulicatella,Dolosicoccus,Facklamia,Globicatella,and Ignavigranum 鉴定不易:常见的、溶血链球菌相对容易,新发现、不常见、非溶血链球菌非常困难VITEK COMPACT 2,35种,包含了新成立的4个属,领先水平链球菌链球菌的分类的分类溶血性分类:1903 Shottmuller 溶血 不透明的草绿色溶血环。红细胞不完全溶解,过氧化
2、氢使血红素氧化成为草绿色的正铁血红素。这类细菌致病力不强,多为条件性致病菌。甲型溶血 完全透明的溶血环,红细胞完全溶解。这类菌致病力强,常引起人及动物各种疾病。乙型溶血 菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。丙型溶血性分类在鉴定链球菌的致病性方面有一定的意义,但初步分类,意义有限;区分溶血和溶血意义也很有限,现可分为溶血和非溶血溶血性受多种因素的影响,特别是猪链球菌猪链球菌的特性猪链球菌的特性兼性厌氧兼性厌氧血平板上菌落较小(受基础培养基影响)血平板上菌落较小(受基础培养基影响)血平板上溶血性较弱血平板上溶血性较弱 羊血平板均为溶血 马血平板为溶血或溶血革兰氏阳性球菌,成对或成链过氧化氢酶试验阴
3、性过氧化氢酶试验阴性 过氧化氢酶试验是链球菌与葡萄球菌区别的重要反应过氧化氢酶试验是链球菌与葡萄球菌区别的重要反应 猪链球菌的血清型血清学的方法对其进行分型。根据荚膜多糖抗原的差异,用凝集试验等方法可进一步将猪链球菌分为35个血清型,用阿拉伯数字表示,即134和1/2 型。SS2型是临床上分离率最高的一种,其次为SS1型。SS2型:人畜共患 猪链球菌2型分离鉴定操作规程GB/T 19915.22005 范围本规程规定了猪链球菌2型分离鉴定的操作方法。本标准适用于猪及其产品中猪链球菌2型的分离鉴定,也可用于送检菌株的鉴定。2024/5/11 周六根据国标,以猪链球菌为例(参照GB/T19915.
4、2-2005)猪链球菌2型分离鉴定操作规程:a.样品采集 b.分离培养 c.初步鉴定(菌落形态,革兰氏染色,过氧化氢酶试验)d.生化鉴定 (经初步鉴定后,做海藻糖,七叶苷,甘露醇等糖发酵试验或应用法国生物梅里埃公司API20strep生化鉴定系统进行生化鉴定)e.玻片凝集试验 f.实验结果分析判定 2024/5/11 周六API系统API微生物鉴定系统以微生物生化理论为基础,借助微生物信息编码技术,为微生物检验提供了简易、方便、快捷、科学的鉴定程序。API鉴定原理:根据微生物对各种生理条件(温度、pH、氧气、渗透压)、生化指标(唯一碳氮源、抗生素、酶、盐碱性)代谢反应进行分析,并将结果转化成软
5、件可以识别的数据,进行聚类分析,与已知的参比菌株数据库进行比较,最终对未知菌进行鉴定的一种技术。2024/5/11 周六API试条组成API 20E/RapiD 20E革兰氏阴性杆菌鉴定 API 20NE非发酵菌鉴定API STAPH葡萄球菌及微球菌 API STREP链球菌鉴定API 20C AUX酵母菌API 20A厌氧菌API LISTERIA李斯特菌API CAMPY弯曲菌属API CORYNE棒状杆菌API CH芽胞杆菌/乳酸杆菌2024/5/11 周六全全WindowsWindows操作界面,多种语言。操作界面,多种语言。2024/5/11 周六1。API结果两个重要概念:鉴定百分
6、率(id%):根据分类单位在数据库中近似程度进行分类,最接近100%。典型T值:表示实际生化反应与最典型反应的近似程度,最接近反应结果X典型反应A B C根据id%与T值的组合,作出结果的正确评价:极好的(Excellent)鉴定:id%99.9,T0.75 非常好的(Very good)鉴定:id%99.0,T0.50 好的(Good)鉴定:id%90.9,T0.25 可接受的(Acceptable)鉴定:id%80.0,T029API STREP-20生化鉴定 猪链球菌的API鉴定结果API STREP-20检测结果 猪链球菌的API鉴定结果TRE(海藻糖)、RAF(棉子糖)等几个的试验与
7、API菌种库有些不符,但 都属于SS2型或1型,数值分类相对于双歧分类的优点猪链球菌的API鉴定结果微生物鉴定全面解决方案15系统名称自动化程度菌悬液配制试条/试卡接种培养条件判读分析手工手工比浊管手工加样自主孵育肉眼判读软件数据库分析自动电子比浊仪DENSIMAT电子连续加样枪自主孵育数读仪判读软件数据库分析全自动电子比浊仪DensiCHEKPlus仪器整合的充填仓仪器整合的培养箱仪器整合阅读软件数据库高级报告工具微生物鉴定全面解决方案16手工革兰氏染液系统组成19ATB New是一套半自动的系统,用于鉴定细菌和酵母菌,并检测微生物对抗生素的敏感性。读数仪比浊仪电子加样枪计算机打印机试条组成
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