DB15∕T 2542-2022 鸡腿菇菌种制作技术规程.pdf
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1、 ICS 65.020.01 CCS B05 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 25422022 鸡腿菇菌种制作技术规程 Regulation of strain manufacture for coprinus comatus 2022-04-25 发布 2022-05-25 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 25422022 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会(SAM/TC 25)归口。 本文件起草单位:内蒙古自治区农牧业科学院。 本文件主要起草
2、人:李亚娇、孙国琴、王海燕、庞杰、慕宗杰、王永、薛国萍、康立茹、于传宗、付崇毅、田文龙、郭志英。 DB15/T 25422022 1 鸡腿菇菌种制作技术规程 1 范围 本文件规定了鸡腿菇各级菌种生产技术要求。 本文件适用于鸡腿菇母种、原种和栽培种菌种生产技术。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 4806.7 食品安全国家标准 食品接触用塑料材料及制品 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 3 术语和定义 下列术
3、语和定义适用于本文件。 鸡腿菇 coprinus comatus 隶属真菌门担子菌亚门、伞菌纲、伞菌目、伞菌科,菌盖初期呈圆柱状,逐渐脱离菌柄,呈钟状,颜色洁白,表面有反卷鱗片。菌肉白色,菌褶早期为白色,与菌柄离生逐渐变为褐色,老熟后呈黑色并潮解成墨汁状。菌柄圆柱状,白色,菌环白色,生于菌柄中上部,易脱落。因外形酷似鸡腿,肉质似鸡丝而得名。 菌种 spawn 通过生产试验验证具有特异性、均一性和稳定性,丰产性好、抗性强的菌株或品种,生长在适宜基质上具结实性的菌丝培养物,包括母种、原种和栽培种。 母种 stock culture 经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物。也称
4、为一级种、试管种。 原种 pre-culture spawn 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物,也称为二级种。 DB15/T 25422022 2 栽培种 spawn 由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。栽培种只能用于扩大到栽培出菇袋或直接出菇,不可以再次扩大繁殖菌种,也称为三级种。 固体菌种 solid spawn 以富含木质素、 纤维素和半纤维的谷物籽粒等天然有机物为主要原料, 添加适量的有机氮源和无机盐类,具一定水分含量的培养基培养的纯菌丝体。 液体菌种 liquid spawn 在液体培养基中,通过摇瓶震荡培养或深层发酵技术快速获得的大量的纯双核菌丝体。 4 菌种生产要求
5、 人员 生产所需要的技术人员和检验人员经过专业培训、掌握基础知识及菌种生产技术规程要求的相应专业技术人员。 环境 选择地势高,通风良好,空气清新,水源近,排水通畅,交通便利的场所。300 m之内无酿造厂、集贸市场、规模养殖的畜禽舍、垃圾和粪便堆积场,无污水、废气、废渣、烟尘和粉尘等污染源,环境条件符合NY/T 528规定。 设施 菌种生产需要粉碎机、电子秤、搅拌机、装袋机、高压灭菌锅或常压灭菌锅、离子净化器、超净工作台或接种箱、恒温培养箱、培养架、恒温摇床、液体菌种灌(30 L600 L)、显微镜等设备。 厂房 厂房要求有各自隔离的摊晒场、 原材料库、 配料分装库。 配套有配料室、 搅拌室、
6、装袋室、 灭菌室、冷却室、接种室、培养室(通风好,有纱窗)、菌种检测室及菌种冷藏库等各环节的设施。 容器 4.5.1 母种生产容器 试管规格18 mm180 mm 或者20 mm200 mm;培养皿直径7 cm9 cm培养皿;三角瓶规格300 ml500 ml。 4.5.2 原种、栽培种生产容器 原种采用850 ml以下、瓶口直径小于等于4 cm、耐126 高温的透明瓶子,或采用(1217)cmDB15/T 25422022 3 (2228)cm的聚丙烯塑料袋。聚丙烯塑料袋符合GB 4806.7要求。 栽培袋采用(1722)cm(3555)cm的聚乙烯塑料袋。 5 母种生产 培养基 新鲜无病去
7、皮切片马铃薯 200 g,加水 1200 ml 煮沸 20 min,滤液定容至 1000 ml,加硫酸镁 0.5 g、磷酸氢二钾 1 g、蛋白胨 1 g、酵母粉 1 g、蔗糖 10 g、葡萄糖 10 g、琼脂粉 8 g10 g,pH 自然; 新鲜无病去皮切片马铃薯200 g,加水1200 ml 煮沸20 min,滤液定容至1000 ml,加入蔗糖20 g、琼脂粉8 g10 g,pH自然。 分装和灭菌 5.2.1 斜面培平板培养基分装和灭菌 分装培养基至试管1/4处,用棉塞或硅胶塞封闭试管口,每5支试管为1把,牛皮纸包棉塞,橡皮筋扎紧,棉塞向上放置。棉塞应采用梳棉,不能使用脱脂棉。121 122
8、 (0.11 MPa0.12 MPa)恒温灭菌25 min。 降温至(655)时取出试管,在空气清洁的室内摆斜面,斜面长度不超过试管长度的2/3,自然降温凝固后成斜面。 5.2.2 平板培养基分装和灭菌 培养基装入300 ml500 ml 三角瓶至刻度的2/3处,用带滤膜的封口膜封口后放入灭菌锅;玻璃培养皿用报纸包好,放入灭菌锅。在温度升至102 105 排净冷空气后升压,升至121 122 (0.11 MPa0.12 MPa)恒温灭菌25 min。 降温至(655)时,在超净工作台内将三角瓶中的培养基分装至无菌培养皿中,培养基占培养皿高度的1/31/2。 检测 抽取3 %5 %的试管和培养皿
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