医科大学动物实验.pptx

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,温 州 医 科 大 学 试验动物中心,李安乐,13857708385(618385),茶山 11-B-201,0577-86689908,lalyxy,医科大学动物实验,第1页,第一章 绪论,第一节 试验动物学基本概念及内容,医科大学动物实验,第2页,一、试验动物,(Laboratory animal),1.1,、试验动物：经人工培育，对其携带微生物及寄生虫实施控制，遗传背景明确或起源清楚，用于科学研究、教学、生物制品或药品判定以及其它科学试验动物。,2,、试验用动物：用于试验动物统称，它包含试验动物、家畜、家禽和野生动物。试验动物起源于野生动物或家畜家禽，但又不一样于野生动物和家畜家禽。,医科大学动物实验,第3页,二、内容和范围,1、,试验动物学任务：试验动物学是研究试验动物培育和应用科学。它任务是研究怎样以优质试验动物和准确试验方法，使动物经试验处理后，能取得良好反应重复性。,2、,范围：包含试验动物和动物试验两大部分。,（1）试验动物遗传学,（2）试验动物生物学,（3）试验动物生态学,（4）试验动物医学,（5）试验动物比较医学,（6）试验动物方法学,3.,试验动物与医学研究,.,医科大学动物实验,第4页,第二节 试验动物地位、作用和发展趋势,一、地位作用：,试验动物学是医学生物学研究主要伎俩。直接影响各领域课题研究结果确实立和发展水平，它提升和发展推进医学生物学发展。在医学发展史上发挥了主要作用，是当代医学生物学研究主要条件。它发展为医学发展开辟了辽阔前景。试验动物在医学等各领域有广泛应用。,二、发展趋势,以标准化为中心，加强新技术应用。优化试验动物,有效研究使用试验动物。,医科大学动物实验,第5页,第三节 试验动物法令、法规,一、国际试验动物组织及法规,、试验动物科学委员会（,ICLAS,）。,2,、美国食品药品管理局（,FDA,）药品安全性评价工作质量管理标准（,GLP,）。,3、,美国试验动物科学学会（,AALAS,）,4、,Jackson Laboratory,医科大学动物实验,第6页,二、我国试验动物政策法规及管理条例,、,1988,年科委,2,号令试验动物管理条例,年修订。,、,1989,年卫生部,55,号令医学试验动物管理实施细则,、,1997,年,1,月,1,日实施北京市试验动物管理条例,医科大学动物实验,第7页,第二章 试验动物标准化,一、标准化意义,确保动物试验结果含有好敏感性、准确性和主要性。,二、标准化内容,.试验动物质量标准化：微生物、遗传学控制。,.生产和试验条件标准化：环境设施、营养控制。,三、标准化产实施,.建立试验动物标准化法规体系。,.推行合格证制度。,.形成全方位标准化试验动物生产、应用及管理系统。,医科大学动物实验,第8页,第三章 惯用试验动物及应用,大,小鼠,兔,豚鼠,犬,医科大学动物实验,第9页,第一节 小鼠,一、生物学特征,分类：哺乳纲，嚙齿目，鼠科，鼠属，小家鼠种。,齿式：,1003/1003=16,，门齿终生生长,医科大学动物实验,第10页,小鼠,无汗腺，尾有散热、平衡、自卫等功效。胃容量约,1,1.5,毫升。雄性脾脏大于雌性约,50%,。淋巴系统发达。雌性为双子宫，乳腺发达，繁殖力强，生长久短，成熟早，为整年多发情动物。性情温駲，对环境敏感，喜黑暗平静环境。染色体,20,对，寿命约,2,3年,，成年体长约,110,毫米，体重,18,40,克。体温,37,39,。呼吸,140,210,次,/,分，平均,163,次,/,分。心率,310,840,次,/,分。雌性发情期,4,5,天、孕期,19,21,天。,医科大学动物实验,第11页,二、主要品种品系,1.封闭群：,KM,、,ICR,、,NIH,近交系：,C57BL/6,、,C3H/HE,、,BALB/C,、,DBA/2,、,CBA,、,A,、,AKR,、,TAI,、,TA2,、,615,医科大学动物实验,第12页,ICR,医科大学动物实验,第13页,BALB/c白化,医科大学动物实验,第14页,DBA/2浅灰色、C57BL/6J黒色,医科大学动物实验,第15页,三、在医学中应用,药品评价，毒性试验，肿瘤研究，传染病研究，遗传学及遗传病研究，免疫学，老年病，计划生育研究等。,医科大学动物实验,第16页,第二节,大鼠,一、生物学特物性,分类：哺乳纲、啮齿目、鼠科、大鼠属。由褐家鼠变种而来。齿式,1003/1003,。性情温顺，易于调教，嗅觉发达，味觉差，对营养缺乏敏感，喜平静，噪声和不适光照对繁殖影响大，对环境敏感。汗腺不发达；无胆囊。肝再生能力强，不能呕吐。染色体,12,对，寿命,2.5,3,年。妊娠期,19,23,天，性周期,4,5,天。体温,39,（,38.5,39.5,）,。心率475（370580）次/分。呼吸85.5（66114）次/分。,医科大学动物实验,第17页,二、惯用具种品系,.封闭群：,SD,、,Wistar,。,2.近交系：,F344,、,ACL,、,SHR,及,WKY,医科大学动物实验,第18页,SD,医科大学动物实验,第19页,三、医学应用,生理学、营养学、药理学、毒理学、肿瘤、遗传学、传染病学、心血管、内分泌、计划生育、外科学、老年病、行为学、放射医学、中医学、肝胆研究等。,医科大学动物实验,第20页,第三节 兔,分类：哺乳纲、兔形目、兔科、兔属。（由野生穴兔驯化而成）齿式：,2033/1023,。染色体,22,对。草食性动物，性温柔，听觉、嗅觉灵敏，有夜行性和嗜眠性。喜干怕热，有啮齿动物行为和食粪性。刺激排卵，孕期约,30,天。甲状旁腺分布较散，眼球巨大，耳大血管清楚。体温,38.5,39.5,，对致热物质反应敏感。有特殊血型和唾液型。,医科大学动物实验,第21页,二、惯用具种品系,二、主要品系,1.日本大耳白兔,2.新西兰白兔,3.青紫兰白兔,4.中国白兔。,医科大学动物实验,第22页,日本大耳白兔,日本大耳白,医科大学动物实验,第23页,三、应用,热源反应、免疫学、生殖医学、眼科、心血管病、微生物、皮肤反应、遗传病、避孕药研究等,医科大学动物实验,第24页,第四节 其它试验动物,一、豚鼠：,分类：啮齿目、豚鼠科、豚鼠属。又名荷兰猪、天竺鼠、海猪。齿式：,1013/1013,。染色体,32,对。,属草食动物，盲肠发达，胃壁薄，胆小温顺，对外界刺激敏感，喜群居，听觉发达，喜平静干燥清洁环境。孕期,65,70,天，胚胎发育完全，寿命,4,5,年,。,惯用于免疫学、传染病、药品学、营养学、耳科学等研究等,医科大学动物实验,第25页,二、犬,属于食肉目、犬科、犬属。齿式：乳齿：,3140/3120,成年齿：,3142/3142,。嗅觉、听觉灵敏易于驯养调教。环境适应能力强、视力差，对移动物体感觉灵敏，红绿色盲。喜食肉类，雄性好斗。汗腺不发达。性成熟,8,10,个月、孕期,58,63,天，春秋季发情，寿命,10,20,年，染色体,39,对。,国际上专用于试验品种主要为毕格犬（,Beagle,）。惯用于外科学、药理、毒理学试验、基础医学、传染病研究。,医科大学动物实验,第26页,犬惯用具种,犬品种繁多，世界上犬品种已近300种。按体重可分5种：,微型犬(3kg以下)，,小型犬(10kg以下)，,中型犬(25k8以下)，,大型犬(50kg以下)，,巨型犬(50kg以上)。,因体重、体型等不一样，其解剖与生理特点也不尽相同，有相差极大。但专用于试验品种不多，很多地方仍从市场上购置民养犬进行试验。,医科大学动物实验,第27页,奇 娃 娃,医科大学动物实验,第28页,第四章 试验动物环境控制,第一节 环境原因对动物影响,一、环境原因分类,1.气候原因、,2.理化原因、,3.居住原因、,4.营养原因、,5.生物原因。,医科大学动物实验,第29页,二、环境原因对动物质量和试验结果影响,动物种类、品系对环境要求各有特点，哺乳动物在一定环境范围内有本身调整功效。,各种环境原因有温度、湿度、洁净度、气流、光照、噪声及有害气体。,医科大学动物实验,第30页,第二节 环境设施及控制,一、设施分类,1,隔离系统：以隔离器为主及其它从属装置组成喂养系统，送入空气洁净度为,100,级。,2,屏障系统：设有恒温、恒湿、除菌换气系统相对封闭环境，空气洁净度达,1000,级，室内保持正压，有严格微生物控制。,3,开放系统：喂养室与外界相通，无空气净化装置。,医科大学动物实验,第31页,SPF设施监控,医科大学动物实验,第32页,二、环境控制,1.,人员管理,2.,物品控制,3.,环境设施监护,4.设施运行与管理,医科大学动物实验,第33页,第五章 试验动物遗传分类和应用,按基因分类,1.不一样基因类型:,(1)远交种,封闭群:品种,(2)突变种,医科大学动物实验,第34页,2.同基因类型,(1)普通近交系,(2)重组近交系,近交系 (3)同源突变近交系 品系,(4)同源导入近交系,(5)同源分离近交系,(6)杂交F,1,代动物,医科大学动物实验,第35页,品种和品系,1.相同外貌特征:毛色,2.独特生物学特征:品种,品系存在基础,3.稳定遗传性能:一定育种价值,4.含有共同遗传起源和一定遗传结构:,共同祖先,独特遗传结构,医科大学动物实验,第36页,一.近交系基本特点,(一)概念,1近交:群体中有意识地选取遗传学上血缘关系较近雌雄个体,即有共同祖先个体(兄妹,父女,母子)之间进行交配.,作用:种群靠近纯和.,培养近交系必须伎俩,以兄妹交配为多,医科大学动物实验,第37页,2.近交类型,纯交:相同基因型个体,AAAA aa aa,回交:纯合子和杂合子,AA AaAA,Aa,互交:相同杂合子,Aa Aa1/2Aa,1/4AA,1/4aa,医科大学动物实验,第38页,3.近交引发改变,近交衰退:生长,成活,生育,抗病,适应性减退,原因:隐性有害基因暴露,破坏多基因平衡,育成近交系,为保持遗传特点,必须继续近交,并不得有遗传漂变,突变和遗传污染发生.,医科大学动物实验,第39页,4.近交程度,群体内个体之间关系,(1)近交系数:依据近亲交配世代数,将基因纯化度用百分比来表示.,即群体中某个体经过遗传携带两个同源,等位基因概率,n,1,+n,2,+1,Fx=,(1/2)(1+Fa),A:父系和母系共同祖先,Fa:A近交系数,n,1:父系中A至X世代数,n2:母系中A至X世代数,医科大学动物实验,第40页,(2)血缘系数(R,xy,):群体中个体之间基因相同程度.,同卵双生R,xy,:100%,亲子R,xy,:50%,近交系R,xy,几达100%(实际20代为 99.6%),医科大学动物实验,第41页,(二)近交系动物,1.近交系:,最少经过,20,代以上连续全同胞或亲子交配，品系内全部个体都可追溯到起源于第,20,代或以后代数一对共同祖先动物群。近交系数达,98.6%,以上。,不一样近交系:近交而固定基因不一样,遗传差异很大.,医科大学动物实验,第42页,2亚系和支系,(1)亚系,(Substrain),形成：近交系因为残余杂合性和突变而造成部分遗传组成改变,指一个近交系内各个分支动物之间,已发觉或十分可能存在遗传差异.,医科大学动物实验,第43页,分化原因,1.F20-F40之间:残留杂合子,2.一个分支与其它分支分开繁殖超出100代:突变为分化原因,3.已发觉一个分支与其它分支存在遗传差异:残留杂合子,突变,污染,医科大学动物实验,第44页,(2),支系,(Subline),形成,近交系或亚系内部，因为非常可能存在环境,母方或细胞差异。,原因:,1.引种到另一试验室,2.技术处理:受精卵或胚胎移植(e),人工喂养(h),卵巢移植(o),冷冻保留(p),人工代乳(fh),代乳(f),医科大学动物实验,第45页,3.近交系特征,(1)基因位点纯合性、（2）遗传组成同源性、（3）表型一致性、（4）长久遗传稳定性、（5）遗传特征可分辨性、（）遗传组成独特征（个体性）、（）敏感性、（）近交衰退,（）分布广泛性、（）背景资料和数据完整性,.,医科大学动物实验,第46页,(二),.近交系,分类及应用,1.普通近交系,(Inbred strain animals),(1)个体极为一致,试验反应一致:,动物用量少,(2)组织相容性抗原一致:移植试验,(3)显著生物学特点:隐性基因暴露,(4)遗传分析:多个近交系对比使用,医科大学动物实验,第47页,2、重组近交系(Recombinant inbred strain,RI),由两个无血缘关系近交系杂交后，得到F2代，分组分别经20代以上兄妹交配而育成近交系系列动物。,祖系:提供亲代两个近交系,医科大学动物实验,第48页,(1)与杂交F1代遗传组成不一样,(1)遗传成份限于祖系,但不均等,(2)高度纯合性,(3)基因重组,医科大学动物实验,第49页,(2)应用,1.分离分析:性状遗传性和遗传规律,2连锁分析:基因定位,3功效分析:分析单基因多效性或决定基因型和表型关系.,医科大学动物实验,第50页,3.同源突变近交系,(Coisogenic inbred strain),指两个近交系，除了一个指明位点等位基因不一样外，其它遗传基因全部相同品系。,更重视突变基因研究,医科大学动物实验,第51页,4、同源导入近交系,(Congenic inbred strain),经过杂交互交或回交等方式将一个基因导入到近交系中，由此形成一个新近交系与原来近交系只是在一个很小染色体片段上基因不一样，简称同源导入系或同类系。,配系,供系,乘客基因,医科大学动物实验,第52页,5、同源分离近交系,(Segregating inbred strain),在培育近交系同时，采取一定交配方法，迫使个别基因位点上基因处于杂合状态。,与突变系区分:仅培育方法不一样,医科大学动物实验,第53页,同源近交系应用,1.同一遗传背景:比较某基因位点上不一样等为基因遗传反应,2.不一样遗传背景:同一基因与遗传背景及其它基因关系,3.取得更穏定动物模型:裸鼠,4.多基因性状分析,医科大学动物实验,第54页,二,近交系命名,国际上统一要求，由国际试验动物协会（,ICLA,）负责,医科大学动物实验,第55页,(一)普通近交系,1.用14个大写英文字母表示:A,DBA,2.大写字母为首,结合数字:C,3,H,C,57,BL,3.非正规命名:广泛认同 129,615,4.近交代数:F表示 A(F,78,)AKR(F,?,+,12,),5.优先权,符号书写要全,医科大学动物实验,第56页,(二),重组近交系,祖系中间加大写X:AKRXC,57,BL/6,简写:AKRXB-2 AKRXB-3,不明确,易混同,医科大学动物实验,第57页,(三),同源突变近交系,名称加连字号和基因符号(斜体书写),C,57,BL/6J-bg,杂合状态:用“+”代表野生型基因,C,57,BL/6J-bg/+,纯合状态:C,57,BL/6J-bg/bg,M表示突变代数:C,57,BL/6J-bg(F,58,+M+F,20,),医科大学动物实验,第58页,(四),同源导入近交系,品系名称(或缩写)后加“.”和供系品系再加连字号和目标基因符号B6.129-H-2b,如供体不是近交系可省略,BALB/c-nu/nu BALB/c-nu/+,医科大学动物实验,第59页,(五),同源分离近交系,品系后加连字号和杂合基因符号,DW-dw/+表示 dw位点上是杂合,代数:括号内加FH和数字 DW-dw/+(FH,27,),医科大学动物实验,第60页,(六)亚系命名,1.名称加研究人员或机构名称,A/He He:Heston博士,C,57,BL/6J J(Jax):Jakson试验室,2.亚系符号:数字或小写字母,A/HeCrgl/1 A/HeCrgl/2,C,57,BR/a C,57,BR/cd,医科大学动物实验,第61页,(七)支系命名,1技术处理:名称加小写字母,奶母代乳f,人工喂养h,卵巢移植o,受精卵或胚胎移植e,人工代乳fh,冷冻保留p,C3HfC,57,BL C,57,BL/6peCBA/N,2.去除或植入病毒:植入+,去除-,C3H/He-MTV+,C3H/He-MTV-,3.引种到另一单位:加斜线或双斜线,C,57,BL/6J/Lac C,57,BL/6J/Lac,实际中直接写缩写符号:C,57,BL/6JLac,医科大学动物实验,第62页,封闭群,一、概念,二,.,特点及应用,三,.,命名,医科大学动物实验,第63页,一、概念,1.群体:生物一个种,亚种,变种,品系或其它类群全部组员之和.,其遗传差异:取决于基因频率,物种只有以群体方式生存,才能存在与发展.,2.封闭群（,Closed colony,）:是以非近亲交配方式进行繁殖生产一个种群，在不从外部引入新血缘条件下，最少连续繁殖,4,代以上。每代近交系数,F,增加量少于,1%,，即,:FB6D2F,1,B6D2F,1,与D2B6F,1,区分:,1.Y染色体,2.母性原因:细胞质成份,子宫环境,母乳,医科大学动物实验,第71页,遗传监测,一、生化标志基因检测法,步骤：抽样、标志基因选择、结果判断,二、皮肤移植法,三、毛色基因测试法,四、下颌骨测定法,五,细胞学方法:,染色体显带技术,医科大学动物实验,第72页,下颌骨测量法,医科大学动物实验,第73页,第六章 微生物控制及等级分类,据微生物净化程度,我国分为四类,喂养环境各不相同,医科大学动物实验,第74页,一.试验动物等级分类,普通动物,(Conventional animals,CV),清洁级动物,(Clean animals,CL),无特殊病原体动物,无菌动物,(Germfree animals,GF),无特殊病原体动物（,医科大学动物实验,第75页,1.普通动物,普通动物,(Conventional animals,CV),：,是在微生物学控制上要求最低动物，要求不携带人兽共患病和动物烈性传染病病原。喂养于开放系统。,医科大学动物实验,第76页,2.清洁级动物,清洁级动物,(Clean animals,CL),：除普通动物应排除病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大病原。,喂养于屏障系统,或IVC系统中,医科大学动物实验,第77页,3.无特殊病原体动物,无特殊病原体动物（,Specific pathogen free animals,SPF,动物）：指动物体内无特定微生物和寄生虫存在，但带有非特定微生物和寄生虫动物。除了普通动物和清洁级动物应排除病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科研试验干扰大病原。起源于无菌动物.，喂养在屏障系统或IVC系统中.,医科大学动物实验,第78页,4.,无菌动物,无菌动物,(Germfree animals,GF),：用现有检测技术在动物体内外任何部位均检不出任何活微生物和寄生虫动物。无菌动物必须是生来就是无菌。喂养于隔离系统。,医科大学动物实验,第79页,5.,悉生动物,悉生动物（,Gnotobiotic animals,GN,）,:,指在无菌动物体内植入已知微生物动物。又称已知菌动物或已知菌丛动物。喂养于隔离系统。分为单菌（,Monoxenie,），双菌,(Dixenie),，三菌,(Trixenie),，多菌,(Polyxenie),动物。,医科大学动物实验,第80页,医科大学动物实验,第81页,医科大学动物实验,第82页,二.微生物控制,.常见病毒、细菌、寄生虫感染危害性及防治。,2.微生物感染对试验研究干扰作用。,医科大学动物实验,第83页,1.病毒感染,鼠痘病毒、仙台病毒、鼠肝炎病毒、细小病毒,兔出血症病毒,犬肝炎病毒,狂犬病病毒,犬瘟热病毒，流行性出血热病毒，,医科大学动物实验,第84页,(1)鼠痘病毒（MPV）,生物学特征:呈砖形,300450X170260nm 颗粒外有脂蛋白囊膜.,中央:哑铃状蛋白质或病毒DNA关键,外包一层关键膜.关键两侧各有一个侧体.,关键和侧体:又有一包膜包裹,膜上嵌有排列不规则管形结构.,医科大学动物实验,第85页,鼠痘病毒,病毒在胞浆内复制-区分于其它DNA病毒特点之一.,在组织培养细胞中增殖良好.病变细胞有多个包涵体.,多数毒株能在鸡胚绒毛尿囊膜上增殖,形成痘斑.,对干燥和冷抵抗力强,对热抵抗力弱.干燥和室温下可存活几个月.,溶液中60度,10分钟可灭活.,紫外线,a射线,X射线等可杀死病毒.,0.5%福尔马林,3%石炭酸,2%烧碱均能在数分钟内杀灭.,医科大学动物实验,第86页,鼠痘病毒诊疗,血清学方法:血凝抑制试验HIA,补体结合试验CF,免疫荧光IFA,免疫酶IEA试验,酶联免疫吸附试验ELISA等.,医科大学动物实验,第87页,鼠痘病毒危害性,脱脚病（Ectromelia):四肢,尾和头部肿胀,溃烂,坏死,甚至脚趾脱落.,小鼠烈性传染病.致病性强,全身感染,暴发流行,传输快,病死率高.,急性:突然死亡,使试验中止,慢性:全身症状,试验结果混乱.污染环境,广泛传输.,隐性:无临床症状,但试验原因:试验性结核,X射线,化学毒素,组织移植,肿瘤,运输等可激活病毒而流行,大剂量内毒素或脾切除,可改变吞噬细胞反应,降低吞噬细胞功效,增加易感性.,医科大学动物实验,第88页,(2)仙台病毒(Sendai virus),特征及感染,副粘病毒科,副粘病毒属,微球形RNA病毒.直径100200nm,有相对坚固核衣壳,外面包有充满长815nm 宽24 nm纤突含脂囊膜.,在鸡胚中繁殖较快.以羊膜腔路径接种最敏感,尿囊腔传代接种生长良好,较易感小鼠：NIH,DBA/2,C3H/Bi,129/J,抵抗力较强小鼠：C,57,BL/6,AKR/J,BALA/cJ,医科大学动物实验,第89页,危害性,免疫干扰:严重影响体液和细胞介导免疫应答.,致瘤作用干扰:感染后遗留组织学改变酷似浸润性肺癌,易误诊.抑制氨基甲酸乙酯诱发肺腺瘤.,感染DBA/2小鼠,白血病病毒不能在脾内复制,不发生白血病.,生殖影响:对着床前受精卵及早期胚胎含有亲噬性,使胚胎死亡.,妊辰:45天:胚胎吸收.1112天:妊期延长,产后24小时内乳鼠死亡率升高.,医科大学动物实验,第90页,全身症状:类似感冒,打“呼噜”,被毛粗乱,弓背，发育迟缓,体重下降,易继发支原体感染.主要引发呼吸道疾病,肺炎,还可引发全身感染.传输快,流行广,呈急性肺炎改变.,仔鼠,幼鼠发病.成年鼠呈隐性感染.,医科大学动物实验,第91页,(3),鼠肝炎病毒(Mouse hepatitis virus),1.病原体:冠状病毒.近似球形囊膜RNA病毒.直径60160nm长约12nm.,核酸为不分段单股RNA,可在小鼠原代巨噬细胞上生长.,对理化因子抵抗力弱,对脂溶剂,紫外线均敏感,2.诊疗:血清学，酶联免疫和免疫荧光法较灵敏,医科大学动物实验,第92页,鼠肝炎病毒,1.大多呈亚临床或隐性感染:应激,混合感染,可发生急性致死性病变.普通症状为抑郁倦怠，营养不良，体重减轻，尿色变深。,急性型:乳鼠:,34W:,89W:,（）嗜肝型：肝坏死，黄疸，腹水,(2）嗜神经型:中枢神经系统坏死，造成后肢松弛麻痹，也可见惊厥和旋转，结膜炎。,（）嗜肠型：肠内壁损伤，内容物水样黄色黏液，有时肠内出血，粘连，坏死。,2.主要影响免疫应答参数,3.酶系统改变,4.裸鼠感染：可作“哨兵”,医科大学动物实验,第93页,(4),细小病毒,1.病原:体积最小,直径1826nm,呈20面对称,单链线壮DNA.,抵抗力强:室温下保留多年,65度30min不失感染性.耐酸和甲醛.,对氯化剂和紫外线敏感,2.危害:有严格宿主专一性.,医科大学动物实验,第94页,(4),细小病毒,1.兔出血症病毒(兔瘟),急性发病,暴发流行，死亡率高,侵袭青壮年兔群:60日龄以上,症状：（超急性，急性，慢性）多饮多尿，精神萎顿，食欲减退废绝，呼吸急促，体温41,o,C以上，濒死有神经症状，天然孔流淡红色液体。,脏器广泛出血，瘀血，血液凝固不良。,气管：多量血色泡沫液体，鼻腔喉头气管黏膜淤血出血。,肺：高度淤血，水肿，散在出血点或弥漫性出血斑。,肝脏：淤血肿大，质脆，土黄色，有淡黄色或灰白色条纹与坏死灶，小叶间质增宽。,脾：淤血肿大，边缘钝圆，蓝紫色，个别有灰黄色坏死区。,肾脏：淤血肿大，暗红色，散在出血点或灰白，灰黄色坏死区。,胃，大小肠：黏膜脱落。散在出血点和淤血块。,医科大学动物实验,第95页,（）细小病毒,2.大小鼠:有高度抗癌特异性.对肿瘤研究造成干扰,3.犬:急性出血性肠炎,医科大学动物实验,第96页,(5),犬肝炎病毒,传染性犬肝炎(Infectious Canine Hepatitis，ICH)是由犬腺病毒l型(CAV一1)引发一个急性败血性传染病。主要发生于犬，也可见于其它犬科动物。在犬主要表现肝炎和眼睛疾患。犬不分年纪、性别、品种均可发病，但l岁以内幼犬多发。幼犬死亡率高，可达2540，成年犬极少出现临床症状。,主要,早期影响,（1）犬肝炎型：型犬腺病毒，临床表现与免疫状态相关,（2）犬呼吸道型：型犬腺病毒，只对呼吸道上皮有亲和力，不引发犬肝炎,医科大学动物实验,第97页,(6)狂犬病病毒,(1)前驱期(沉郁期),(2)兴奋期(狂暴期),(3)麻痹期,医科大学动物实验,第98页,（）流行性出血热（epidemic hemorrhagic fever,EHF),主要发生于大鼠烈性传染病，也是一个,人畜共患,自然疫源性传染病。自然宿主主要是小型,啮齿动物,，如姬鼠属、家鼠属、仓鼠属和小鼠属动物。,传输：气溶胶吸入。接触宿主动物及排泄物。,症状：,人：发烧，发烧，头痛，肌肉痛，结膜水肿充血（点状），出血性肾损伤（肾综合症出血热），最终肾衰竭，出现尿毒症，严重可造成死亡。,大小鼠：多为隐性感染，长久排毒。大鼠普通无临床症状，也不死亡。普通不影响试验进程。,医科大学动物实验,第99页,(8)猴B病毒病,由猴B病毒(Simian Bvirus Infections)（又称疱疹病毒）引发,人和猴共患一个传染病,。猴是B病毒自然宿主，感染率可达1060。多数情况下仅在口腔黏膜出现疱疹和溃疡，之后病毒可长久潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近神经节，也可长久潜伏在组织器官内，产生B病毒抗体。大多数猴呈隐性感染。,人类感染主要表现脑炎或脑脊髓炎症状，多数病人发生死亡。,种族差异显著，白种人死亡率高，黄种人不高,。,医科大学动物实验,第100页,()其它病毒,1.淋巴细胞性脉络丛脑膜炎.,人：流感样症状和脑膜炎,小鼠：大脑型，内脏型，迟发型。,医科大学动物实验,第101页,2.细菌感染,沙门氏菌,泰泽氏菌等,医科大学动物实验,第102页,(1),沙门氏菌,1.暴发型:45天内大批死亡,2.亚急性型:行为呆滞,腹泻,710天死亡,3.慢性型:下痢为主要症状,哺乳期小鼠发病率高达70%,BALB/c敏感 CDF1不敏感,医科大学动物实验,第103页,(2),泰泽氏菌,隐性感染为主,病原:革兰氏阴性,多形性,能形成偏端芽胞,周身鞭毛,易被碱性苯胺染料着色,PAS反应阳性,对温度敏感,1.肠型:出血性坏死性肠炎,精神萎顿，食欲减退，废绝，腹泻。,2.肝型:弥漫性肝灶性坏死,均突然发病,严重腹泻,死亡.,医科大学动物实验,第104页,(3)细菌感染对试验干扰,1.,人兽共患病,2.条件致病菌,3.正常菌群,医科大学动物实验,第105页,3.真菌感染,大多为人兽共,患病,分为:,浅部感染:,侵染毛发,皮肤等浅表部位,深部感染:累及内脏器官,条件致病真菌:在机体免疫功效损伤,内环境出现紊乱情况下才含有致病性.,医科大学动物实验,第106页,(1)浅部真菌,侵染毛发,皮肤等浅表部位,1.石膏样小孢子菌:,丝状真菌,引发狗,猫皮肤黄廯,2.石膏样毛廯菌(须发廯菌):,丝状真菌,人和动物毛发和皮肤廯病致病菌.,3.羊毛状小孢子菌:,丝状真菌,主要引发狗皮肤廯病,又叫狗小孢子菌.,医科大学动物实验,第107页,(2)深部真菌,1.荚膜组织胞浆菌:,形态独特,呈二相性.烈性真菌病,主要侵犯猫,狗,啮齿类肺脏及网状内皮系统.,2.新生隐球菌:,是一个酵母菌.引发狗,猫等动物脑膜炎.脑炎和肺炎.,3.粗球孢子菌:,含有二相性,可感染狗,羊,牛等动物.主要侵犯肺脏烈性真菌.,医科大学动物实验,第108页,(3),条件致病真菌,1.白色念珠菌:酵母样真菌,呈圆形或卵圆形.寄生于人和动物体表,肠道,阴道等处,普通不致病,免疫力下降或正常菌群紊乱,可引发全身或局部感染.,2.曲霉菌:属丝状真菌,以菊花样孢子囊为形态特征.主要病原为烟曲霉和杂色曲霉,多侵犯呼吸道.部分产生毒素,引发中毒和诱发肿瘤.,3.毛霉菌:属丝状真菌,以巨大菌丝为形态特征.含有条件致病性,可感染人和各种动物,累及脑,肺,消化道.,医科大学动物实验,第109页,4.,寄生虫感染,螨、虱、弓形体、球虫,(1).,弓形体:人兽共患病,小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、犬和猴为中间宿主，猫为终末宿主。,常无显著症状。,人：多数为无症状隐性感染,试验动物：少数被毛疏松不整，淋巴结肿大，出现流产或死胎现象。,a.先天性:流产,死胎,婴儿弓形虫病症状,b.取得性:最常见,(2)球虫:主要感染兔,鸡,医科大学动物实验,第110页,(3)寄生虫对试验干扰,1.掠夺宿主营养,2.对动物骚扰,3.对机体产生机械性损伤,4.产生毒性,5.影响生理,生化和免疫系统,医科大学动物实验,第111页,寄生虫潜在感染,如观察肝功效在试验前后改变时，必须要排除试验用家兔是否患有球虫病，不然家兔肝脏上已经有很多球虫囊，肝功效必定发生改变，所测结果波动很大。,如膜壳绦虫分泌毒素，可造成肠粘膜发生局灶充血和出血，甚至造成溃疡坏死。溶组织阿米巴浸入肠粘膜和肝脏时分泌蛋白溶解酶，可使所在组织细胞大量破坏。肝片吸虫虫体进入胆管后，因为虫体及有毒代谢产物作用，会致使胆管发炎，胆管上皮增生和胆管纤维变性，逐步引发胆管堵塞，肝脏萎缩硬化。棘球蚴囊液破裂后可产生强烈过敏反应，使之产生呼吸困难，体温升高，腹泻等症状。,医科大学动物实验,第112页,第七章 试验动物营养控制,一、试验动物营养需要,二.饲料消毒贮存及质量控制,医科大学动物实验,第113页,一.饲料消毒,高温高压灭菌法：最惯用最可靠方法，要求121,，1.0Kg/cm,15分钟以上。会造成营养损失。,干热灭菌法：置烤箱内70-80,，6小时。这种方法营养损失极大，消毒后饲料会变得干硬，从而适口性下降，同时花费时间，最少用,医科大学动物实验,第114页,射线照射灭菌法：采取Co60-射线照射,灭菌总剂量为35Mrad。这种方法营养损失最少，也最方便，有条件话应该首选。但太昂贵，不便推广。,药品熏蒸灭菌法：用化学药品如氧化乙烯消毒剂气雾对饲料饲料进行熏蒸消毒。不过操作麻烦，又因饲料中会残留有害物，也不太好,医科大学动物实验,第115页,二、营养原因对动物试验结果影响,1,、非营养研究时影响,采食量，生长发育，生理生化指标，免疫功效，疾病发生、发展和转归，麻醉，饲料中其它原因等,2,、营养研究时影响,早期营养情况，各营养素相互作用,3.早期试验动物营养研究主要是营养原因对试验动物本身影响，现在人们越来越认识到动物营养情况对其它动物试验结果也产生很大影响。,医科大学动物实验,第116页,(一)、进行非营养研究时影响,1、,对动物采食量影响,饲料中能量百分比直接制约着动物采食量，能量过高，采食量下降，从而影响蛋白质摄入或者影响掺入饲料中试验药品摄入，造成试验结果可靠性。,有些试验是把所研究药品掺入饲料中，但这些药品却有气味或苦涩，改变了饲料适口性，影响了试验结果。,药品意外地抑制食欲或刺激食欲，那么以任何路径施用时都能改变饲料摄入量。,医科大学动物实验,第117页,2、对动物生长发育影响,饲料中营养不全价，不平衡，有毒有害物质多少，适口性怎样，引发营养不良，影响生长发育，表现皮毛粗乱，增重迟缓等。这么试验动物用来做试验研究，其结果准确性和重复性必定不好。,医科大学动物实验,第118页,3、,对动物生理生化指标影响,当饲料中营养素含量发生改变时，必定造成动物血液、一些脏器及组织中该种营养素含量改变，并对与之相关生理生化指标造成影响。,医科大学动物实验,第119页,4、,对动物免疫功效影响,饲料中一些营养素如维生素A、E，微量元素Zn、Mn、Se等含量，动物免疫系统和机能有着显著影响。,饲料中任何须需氨基酸长久缺乏或不平衡，几乎都可引发免疫抑制和对肿瘤免疫抵抗显著降低。,饲料中脂肪含量过高，就引发动物血脂过高，也可使其免疫功效失常。,饮用酸化水造成小鼠网状内皮去除率及脾重均显著降低，同时对免疫机能也有一定影响。,医科大学动物实验,第120页,5、对动物疾病发生、发展和转归影响,一些营养原因对癌、心血管病等非传染性疾病研究有着直接影响。,医科大学动物实验,第121页,6、对动物麻醉反应影响,教学试验或硕士试验中，在麻醉过程中，注射相同麻醉剂量有些同学兔子一会就没气儿了。为何会出现这么情况呢？可能这只兔子营养不良，身体虚弱，麻醉后抑制太过了。,医科大学动物实验,第122页,7、饲料中其它原因影响,饲料中抗营养因子、毒素或农药残留、重金属污染等均可造成对研究结果产生直接影响。,医科大学动物实验,第123页,(二)、,进行营养研究时影响,在进行营养学研究时，饲料中营养原因及动物营养情况对研究结果产生更大影响。,医科大学动物实验,第124页,1、动物早期营养情况对营养研究影响,动物妊娠和哺乳阶段营养水平不但影响仔代断奶前生长发育，而且对其断奶后生长发育尤其是营养消化吸收有影响，当这种影响较为严重时，即使以后给予充分营养也无济于事。所以在试验前选择动物时也要注意动物日龄与体重是否其符合生长规律。,医科大学动物实验,第125页,2、动物试验过程中营养对所研究营养问题影响,在研究时，不但要控制除研究原因以外原因，使之保持一致，而且尤其要重视其中营养素与所研究原因相互关系。,医科大学动物实验,第126页,3、动物日粮类型对营养研究影响,现在与营养相关研究中，营养与免疫、营养与衰老、营养与癌症已成为研究热点，这些研究都要牵涉到日粮配制。,日粮按其原料不一样可分为天然养分日粮和纯养分日粮。,医科大学动物实验,第127页,三.影响营养需求原因,(一)、遗传原因,不一样品种、不一样品系动物其营养需求不一样。,因遗传基因表示程度不一样而影响营养需求。,近交系动物对蛋白质需求要比封闭群动物要高。,如ODS大鼠因基因突变造成L谷氨酸氧化酶缺乏，而无法合成VC，饲料中必需添加VC。,医科大学动物实验,第128页,(二)、生理情况,动物在不一样生理情况过程中对营养需求会有所不一样。,如产后发情配种小鼠，如带仔多，营养供给不上，其受精卵会停留在输卵管而不能在子宫着床，结果是怀孕期大大地延长。,医科大学动物实验,第129页,(三)、环境原因,就恒温动物来说，若长久在低温下，动物必须产生较多热能以维持体温恒定，饲料中就要增加能量原料。,如长久在高温环境下，则动物采食量就会下降，为了确保动物正常生长，就把饲料营养素浓度提升。,医科大学动物实验,第130页,(四)、微生物状态,微生物在肠道中栖生，产生如水溶性VB、K及氨基酸等营养物质。通常這些物质极少被机体再吸收利用，除非有食粪便行为再摄取。,食粪行为与动物种类、饲料成份、喂养条件不一样而发生。,所以设计试验时就应考虑是否允许食粪行为发生。,医科大学动物实验,第131页,(五)、研究条件,试验操作如外科手术或于饲料中添加测试药品时，会造成动物担心或改变饲料适口性，进而影响饲料采食。,在限制性采食试验中应调整饲料配方，增加部分养分浓度，以补充因摄食降低而造成不足部分。,医科大学动物实验,第132页,(六)、营养成份相互作用,一些营养素摄取量增加时往往影响另外营养素吸收和利用。如能量和蛋白。,不一样矿物质会竞争同一吸收门户或同一运输系统，从而影响到彼此被吸收效率。如钙、磷、镁及VD间关系.,医科大学动物实验,第133页,第八章 人类疾病