如何正确采集病原微生物标本专家讲座.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,临床微生物标本采集与运输,潘韶霞,如何正确采集病原微生物标本,第1页,1.,给临床感染诊疗提供试验室依据,2.,给临床抗感染治疗提供参考,3.,临床流行病学调查,微生物检验一个主要功效就是进行细菌耐药监测，以指导临床合理使用抗生素，并制订合理经验用药方案。,临床微生物检验主要功效,如何正确采集病原微生物标本,第2页,但就当前现实状况，要实现上述功效存在很大问题,1.分离病原菌耐药谱不能真正代表病原菌耐药谱，很多敏感病原菌没有做培养或没有取到感染部位标本；,2.当前分离病原菌耐药率是远远高于真正耐药率，当前统计病原菌耐药率利用价值很低，所以在制订经验用药方案时缺乏合理依据。,如何正确采集病原微生物标本,第3页,处理方案,1.提升病原微生物送检率，强调在使用抗生素之前采集标本；,2.提升送检标本质量；,3.提升试验室检测能力。,期待明年耐药数据能真正反应我院病原菌分布和耐药情况，能够用作经验选药依据。,如何正确采集病原微生物标本,第4页,试验结果影响原因,检验前原因,检验中原因,检验后原因,如何正确采集病原微生物标本,第5页,常见微生物标本正确采集,血液和骨髓采集,;,痰标本采集,;,咽拭子标本采集,;,尿液标本采集,;,脓、创伤感染标本采集,;,穿刺液标本采集,;,粪便标本采集,;,如何正确采集病原微生物标本,第6页,血液和骨髓采集,采血时机？,采血方法？,正确采血量应该是多少,?,血培养阴/阳性有什么临床意义？,如何正确采集病原微生物标本,第7页,什么情况需要做血培养,有不明原因发烧、体温过低等症状；,怀疑有菌血症或脓毒症如休克、寒颤等;,严重局部感染；,呼吸频率加紧等。,如何正确采集病原微生物标本,第8页,采集血培养标本最正确时间？,1.,有发烧等症状时；,2.,在使用抗生素情况下；,3.,怀疑有亚急性心内膜炎时。,如何正确采集病原微生物标本,第9页,病例,:,女性患者，怀疑为亚急性心内膜炎入院，入院后当日连续送三次血培养均为阴性，但临床上有显著脓毒血症症状。微生物室注意到三次血培养抽血时间为,4pm,6pm,和,9pm,，与主管医生沟通后，提议两小时内连续送三次血培养。结果第二批血培养中有二次为阳性，均培养出草绿色链球菌。,亚急性心内膜炎,如何正确采集病原微生物标本,第10页,怀疑有亚急性心内膜炎或导管相关性菌血症时：,12小时内采集三份血标本,如何正确采集病原微生物标本,第11页,正确采血方法,采血时皮肤消毒推荐采取三步消毒法：,1.,首先用,70%,酒精擦拭静脉穿刺部位待,30,秒钟以上。,2.,然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤（,1%,2%,碘酊,30,秒或,10%,碘伏消毒,60,秒），从穿刺点向外以,1.5cm,2cm,直径画圈进行消毒。,3.,最终用,70%,酒精脱碘。,注意对碘过敏患者，只能用,70%,酒精消毒，消毒,60,秒钟，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。,如何正确采集病原微生物标本,第12页,血养瓶消毒程序：,1,用,70%,酒精或碘溶液,(,不要使用碘,),消毒血培养瓶橡皮塞子。,2,酒精作用约,60,秒。,3,在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布去除橡皮塞子表面剩下酒精,然后注入血液。,如何正确采集病原微生物标本,第13页,正确采血量应该是多少,?,如何正确采集病原微生物标本,第14页,血培养应采集多少次,1.推荐24,h,内连续采集三次血培养标本；,一次血培养约能够检出72血流感染，二次约可检出约93，三次约可检出约97；,2.假如培养48,h,以后为阴性，若临床怀疑为菌血症应在24,h,内再连续采集三次血培养标本；,3.不主张天天采集血培养标本。,如何正确采集病原微生物标本,第15页,血培养阳,/,阴性临床意义,1.,培养出革兰阴性菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌等时，多数能够确认为病原菌；,2.,培养出凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、芽胞杆菌等时，感染？污染？,如何正确采集病原微生物标本,第16页,处理方案,需屡次多部位,/,天 采血。,24,小时内连续采集三次血培养标本。,如何正确采集病原微生物标本,第17页,采集血培养标本方面存在问题,1.采血量不太准确，很多培养采血量远远超量；,2.采血时机不够准确，采血时机与体温改变关系不太熟悉；,3.采集标本次数和频率不太准确，很多医生喜欢天天采集一次或仅采集一次；,如何正确采集病原微生物标本,第18页,什么情况需要采集骨髓标本,1.,疑为细菌性或真菌性骨髓炎患者；,2.,疑为伤寒感染患者；,如何正确采集病原微生物标本,第19页,痰标本采集,要求采集肺深部痰液，不要唾液。,普通采取自然咳痰法，但以气管镜采集法标本质量最好。,自然咳痰法；,气管镜采集法；,小儿取痰法；,导管尖送检；,如何正确采集病原微生物标本,第20页,下呼吸道标本,全部病人下呼吸道标本应在采集后马上送至微生物室，并于,1,小时内接种,室温下放置,1h,会降低肺炎链球菌、流感嗜血杆菌分离率而定植于上呼吸道非致病菌则会过分生长,下呼吸道标本勿放冰箱或运输时勿置于冰块中,如何正确采集病原微生物标本,第21页,痰涂片检验是否标本合格,痰肉眼观察,:,统计标本外观 唾液、带血、粘液样、水样、脓性、粘液脓性、脓性粘液样,显微镜检验：取脓性部分涂在玻片上,作革兰染色,.,低倍视野下看涂片，统计,5,个视野,下,平均细胞数。,如何正确采集病原微生物标本,第22页,痰涂片判定,分类,WBC,鳞状上皮细胞,6 25 25 25 10-25,3 25 25,2 10-25 25,1 25,分类中,1,3,类不做培养，要求重新留取标本；,4,、,5,类为合格标本；,6,类为气管穿刺液时，如未见白细胞，,而鳞状上皮细胞,10/,低倍，亦应重新留取标本。,如何正确采集病原微生物标本,第23页,痰标本采集存在问题,1.痰标本合格程度偏低，普通痰标本合格率不到40%；,2.,标本转运时间过长，很多标本送到试验室已经超出2小时。,如何正确采集病原微生物标本,第24页,咽拭子标本采集,标本采集应在用药前，最好在清晨，嘱患者用清水漱口，由检验者将舌向外拉，使悬雍垂向外牵引，将咽拭子超出舌根抵达咽后壁或悬雍垂后侧，在咽部肉眼见显著发红或有假膜处局部重复涂抹棉拭,(,注意不要碰着口腔粘膜,),，放入无菌试管内马上送检。,如何正确采集病原微生物标本,第25页,如何正确采集病原微生物标本,第26页,尿液标本采集,中段尿采集法,导尿法,膀胱穿刺取尿法,留尿法,如何正确采集病原微生物标本,第27页,如何正确采集病原微生物标本,第28页,尿液标本采集存在问题,1.随机尿代替中段尿送检，尤其是门诊病人；,2.部份标本存在污染情况；,3.部份插管患者采集了尿袋中尿液；,4.标本中转运时间过长。,如何正确采集病原微生物标本,第29页,脓、创伤感染标本采集,首先用无菌生理盐水拭净病灶表面污染杂菌。对已破溃脓肿用无菌棉拭子取深部脓液和分泌物；未破溃脓肿消毒皮肤后，用无菌注射器抽取脓液及分泌物马上送检。如深部脓肿在送需氧培养同时应考虑送厌氧培养，厌氧培养标本应隔绝空气马上送检。当创伤出血时，敷用药品,2h,以内及烧伤在,12h,内不应采集标本，此时取得阳性结果机会极少。,如何正确采集病原微生物标本,第30页,穿刺液标本采集,应在患者用药之前或停药,1-2d,后进行穿刺，标本应马上送检或保留于,4,冰箱。脑脊液标本应保温（,25-37,），抽,2ml,直接注入小儿瓶中,同时再另抽,1-2ml,于无菌容器同时送检并马上送检。,如何正确采集病原微生物标本,第31页,粪便标本采集,自然排便采集法,直肠拭子采集法,有腹泻病人，在送培养标本同时能够送细菌涂片检验。抗生素相关性腹泻性腹泻，培养是阴性，但涂片检验却能够看到细菌百分比失调，涂片临床意义大于培养。,如何正确采集病原微生物标本,第32页,生殖道标本采集,（一）送检指征,1.,男性泌尿系统表现,尿急、尿频、尿痛,尿道分泌物增多,会阴部疼痛及阴囊疼痛,性功效障碍,泌尿生殖器畸形和缺损,如何正确采集病原微生物标本,第33页,女性泌尿系统表现,分泌物增多及性状异常,尿道口搔痒及脓性分泌物流畅,下腹疼痛,月经失调,阴道出血,外阴搔痒,外阴或阴道疼痛,性功效障碍,如何正确采集病原微生物标本,第34页,（二）标本采集,生殖器官标本包含子宫颈、阴道、前列腺；男性及女性外生殖器分泌物及经血等。应依据感染部位和可能病原体决定用于病原学诊疗标本种类、采集部位和采集方法等。阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集，搜集于无菌试管内送检。,如何正确采集病原微生物标本,第35页,尿道分泌物,1.,女性尿道：患者排尿,1,小时后采集，首先拭去尿道口渗出物；再用拭子经过阴道，靠着耻骨联合，按摩尿道，采集分泌物；如未取得分泌物，清洗外尿道，用灭菌纱布或棉球擦拭，用泌尿生殖道拭子插入尿道,2,4cm,，旋转拭子,2,秒。,2.,男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔,2,4cm,，旋转拭子，最少停留,20,秒，而使之轻易吸收。,如何正确采集病原微生物标本,第36页,阴道分泌物,擦除过多分泌物和排出液，用无菌棉拭子采取阴道口内,4,厘米内侧壁或后穹窿处罚泌物，假如需要涂片，需再用一个拭子。,男性前列腺,用前列腺按摩法采集前列腺液。清洗尿道口，冲洗尿道膀胱，从肛门用手指按摩前列腺，使前列腺液溢出，用无菌容器搜集。无肉眼可见脓液时，可用灭菌拭子轻轻伸入前尿道内，旋转拭子采集标本。,如何正确采集病原微生物标本,第37页,注意事项,1.,生殖器是开放性器官，标本采集过程中应严格遵,循无菌操作规程以降低杂菌污染。,2.,因为阴道正常菌群存在而使细菌分离判定,受到干扰，所以在采集女性生殖道标本时应注意尽,量降低或防止正常菌群污染。,3.,疑有宫腔感染，如遇产妇需行剖宫产，待胎儿,娩出后取宫腔分泌物，并同时取婴儿耳拭子一同送,检。,4.,沙眼衣原体和病毒均在宿主细胞内繁殖，取材,时拭子应在病变部位（移行上皮处稍内）停留十几,秒钟，并采集尽可能多上皮细胞。,如何正确采集病原微生物标本,第38页,5.,生殖道感染厌氧菌也较多见，疑有厌氧菌感染时，标本采集和运输应防止与氧气接触，最正确方法是床边采样，直接接种至厌氧装置内。,6.,淋病奈瑟菌检验时，取材深度一定要够，因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层鳞状上皮细胞。不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈,3cm,深转动并停留,10-30s,取样送检。,7.,淋病奈瑟菌抵抗力低，对外环境改变颇为敏感，对严寒和干燥抵抗力很弱。所以，为了确保培养有足够成功率，取材后要尽快送检，马上接种，标本离体时间越短越好。,如何正确采集病原微生物标本,第39页,微生物培养还应注意问题,1.培养阳性分离菌不一定是真病原菌，尤其从有菌部位来，如痰标本；,2.无菌部位培养出来病原菌应该连续监测，若病原菌发生改变或治疗效果不佳时应考虑更换抗生素；,3.细菌耐药性在治疗过程中能够会发生改变，要注意观察是否有耐药性变迁。,如何正确采集病原微生物标本,第40页,医院感染防治,医院感染,(nosocomial infections),：也称为医院内感染，是指在患者在住院期间取得感染。,医院感染基本条件：感染源、传输路径和易感人群。,如何正确采集病原微生物标本,第41页,降低医院感染发生常见办法：,1.,勤洗手；,2.,注意隔离感染患者；,3.,物品和环境消毒；,假如一个病房内连续出现多起患者感染相同或相同病原微生物时，应高度注意是否有物品或环境污染,。,如何正确采集病原微生物标本,第42页,谢谢！,如何正确采集病原微生物标本,第43页,