结核性脑膜炎实验室诊断及治疗进展.ppt
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1、结核性脑膜炎实验室诊断方结核性脑膜炎实验室诊断方法及治疗进展法及治疗进展昆明医科大学第二附属医院神经内科2017-8-9是结核杆菌引起的脑膜和脊膜的非化脓性炎症性疾病。最严重,死亡率、致残率均较高;实验室早期诊断方法是有效治疗、改善预后的关键所在。结核性脑膜炎(TBM)实验室诊断方法实验室诊断方法细菌学方法免疫学检查生化指标分子生物学方法总结细菌学方法 CSF涂片抗酸染色镜检、细菌培养是最经典的实验室方法。(阳性率10%)改良抗酸染色法 检出率提高至88.57%,多次腰椎穿刺行改良抗酸染色法,可提高至94.29%,并且能检出胞内抗酸杆菌。运用改良方法的患者在接受抗结核治疗后27d左右,最长的在
2、患者接受治疗6.5个月后仍能检出,明显延长了抗酸杆菌的检出时间。免疫学检查免疫学检查(一一)结核分枝杆菌结核分枝杆菌(MTB)(MTB)抗体指标抗体指标(1 1)脂肪阿拉伯酸甘露聚糖)脂肪阿拉伯酸甘露聚糖(LAM)(LAM)抗体抗体(LAM-(LAM-IgG)IgG)郑智远等采用ELISA方法定性检测血清和CSF中的LAM-IgG,结果显示单独检测血清和CSF的LAM-IgG,敏感性分别为45.45%、48.05%,特异性分别为96.67%、100%,二者之间差异无统计学意义,均可单独用于诊断TBM;同时检测血清和CSF中的LAM-IgG,敏感性和特异性分别为55.84%、96.67%。同时检
3、测血清和CSF可以提高TBM的诊断率。郑智远,陈琼,贺铁生,等 中国现代医学杂志,2001,11:26(2)MTB(2)MTB 特异性蛋白特异性蛋白(TBSA)(TBSA)抗体抗体 TBSA是一种特异性较高的MTB分泌性酸性磷酸酯酶。王晓艳等检测了血清和胸水中的TBSA抗体水平,结果显示诊断肺结核的敏感性及特异性分别为70.5%、73.5%,但诊断TBM的敏感性仅为41.9%。王晓艳,朱俊,刘慧,等 中国实用医药,2013,18:52 TBSA抗体的检测对于活动性肺结核是一种快速简便有较高敏感性和特异性的辅助诊断方法,对TBM的诊断价值不高,但在排除TBM的诊断中具有一定的价值。(二二)MTB
4、)MTB抗原指标抗原指标(1 1)早期分泌的特异性靶抗原早期分泌的特异性靶抗原6(ESAT-6)6(ESAT-6)仅存在于致病性分枝杆菌中MTB特异性抗原成分排除卡介苗接种的干扰避免了无胞壁的L型菌不易被检出的不足观察病程中ESAT-6 的动态变化对于未能及时就医或是经过治疗干预的患者,ESAT-6仍有一定的补充诊断意义(2 2)培养滤液蛋白)培养滤液蛋白10(CFP-10)10(CFP-10)早中期分泌,释放于菌体外的低分子量蛋白仅存在于致病性分枝杆菌在卡介苗及其他分枝杆菌中缺失具有诊断性抗原优势张昆南等采用CSF 抗原负压浓缩及酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测CFP-10,敏感性为93
5、.1%,特异性为92.5%,该法显著提高了TBM 的检出率。张昆南,许志强,吴晓牧,等 中华神经科杂志,2011,44:86CFP-10+ESAT-6综合了单一抗原的优势增强活化能力增加敏感性、特异性 马春静等采用时间分辨荧光免疫法定量测定CSF 中ESAT6-CFP10抗原的含量,结果显示该法灵敏度非常高,且特异性较好,为92.6%,而且该法对检测条件的要求不高,因此该法可作为一项新的检查手段用于临床MTB感染的早期诊断。马春静,邹薇,王丽 中外医疗,2015,21:74(三三)细胞因子指标细胞因子指标 机体感染MTB后以细胞免疫为主,细胞因子在TBM的免疫反应中起到了重要的作用。CSF中的
6、大量细胞因子直接反映了TBM的病理变化,是直接的诊断指标。(1 1)INF-INF-水平水平MTB INF-体外释放试验(TB-IGRA)钱福初等用MTB特有抗原(ESAT-6、CEP-10)在体外作用于外周血,然后用ELISA检测INF-水平,对TBM的诊断的敏感性达87.5%,准确率89.7%。钱福初,何建方,戴利成,等 中国卫生检验杂志,2012,22:直接检测CSF中INF-水平。黄锡坤等用ELISA法分别检测各组的CSF及血清中的INF-水平,CSF中INF-水平诊断TBM的灵敏度、特异度分别达92.0%、95.3%,且CSF与血清INF-水平无相关性。综上,外周血和CSF中INF-
7、水平均可作为诊断TBM的辅助方法,且CSF更具优势。黄锡坤,欧结艳 中国感染与化疗杂志,2014,14:429 返回(2 2)IL-8 IL-8 IL-8是单核细胞在MTB刺激下产生的一种细胞炎性因子,促进炎症细胞的趋化及诱导细胞增值,参与细胞免疫及迟发型超敏型炎症的发生,致局部的炎症反应,能杀灭MTB,也能造成血-脑屏障的破坏和脑组织局部免疫损伤。王丽豪等研究结果表明,TBM组IL-8较病毒性脑膜炎组、非感染组显著升高,IL-8与TBM密切相关。马江涛等研究结果表明TBM急性期IL-8水平显著高于其恢复期和对照组水平(均P0.01),病情控制好转后其表达显著下降,与对照组差异无统计学意义。王
8、丽豪,刘忠华,陈桂生,等 中华神经科杂志,2014,47:168 马江涛,吴文苑,张立军,等 中国卫生检验杂志,2014,24:2027 所以,IL-8水平的测定对TBM具有一定的诊断价值,且其表达水平动态变化有助于疗效观察和判断预后。生化指标生化指标(1 1)腺苷脱氨酶)腺苷脱氨酶(ADA)(ADA)ADA是一种核酸代谢酶,与机体细胞免疫活性密切相关,ADA表达上升是T淋巴细胞分化、增值的病理改变。机体感染MTB后以细胞免疫为主,故检测ADA 水平可在一定程度上反映MTB感染情况。ADAADA定量诊断定量诊断TBMTBM的最佳界值是的最佳界值是9.5 U/L9.5 U/L,且,且ADAADA
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