某医院检验科临检室作业指导书.pdf

临检室作业指导书文件编号：ABCD-3-LJ-0150第A版编制：审核：批准：ABCD人 民医院检验科ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容n 录生效口期：20060808第2页共143页目 录序号主题内容代号页号1血红蛋白电泳检查（电泳法）AB C D-3-L J-0152精液常规检查AB C D-3-L J-0293粪便常规检查（直接涂片法）AB C D-3-L J-03124粪便潜血试验定性（纸片法）AB C D-3-L J-04145尿沉渣检查（UD-S仪器法）AB C D-3-L J-05166血疟原虫（MP）厚血片检查法AB C D-3-L J-06217血疟原虫（MP）薄血片检查法AB C D-3-L J-07238尿人绒毛膜促性腺激素定性AB C D-3-L J-08259阴道分泌物常规检查AB C D-3-L J-092710一小时尿沉渣计数AB C D-3-L J-102911Xt2000i红细胞计数AB C D-3-L J-113112Xt2000i白细胞检验AB C D-3-L J-123313Xt2000i白细胞分类计数AB C D-3-L J-133614Xt2000i血红蛋白检测AB C D-3-L J-143915全血血细胞沉降率测定AB C D-3-L J-154116Xt2000i红细胞比积的测定AB C D-3-L J-164317Xt2000i平均红细胞体积检测AB C D-3-L J-174618Xt2000i血小板（P L T）测定AB C D-3-L J-184819红细胞平均血红蛋白含量测定AB C D-3-L J-195120红细胞平均血红蛋白浓度测定AB C D-3-L J-205321尿液酸碱度测定（干法学法）AB C D-3-L J-215522尿葡萄糖定性实验（干化学法）AB C D-3-L J-225823尿蛋白定性测定（干法学法）AB C D-3-L J-236124尿血红蛋白测定（干化学法）AB C D-3-L J-2464ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容n 录生效口期：20060808第3页共143页25尿胆原定性测定（干法学法）AB C D-3-L J-256726脑脊液蛋白定性试验（潘氏法）AB C D-3-L J-267027脑脊液外观检查（目测法）AB C D-3-L J-277328脑脊液有形成分检查（显微镜法）AB C D-3-L J-287529尿亚硝酸盐定性测定（干法学法AB C D-3-L.T-297930凝血酶原时间（P T）测定AB C D-3-L J-308131活化部分凝血活酶时间测定AB C D-3-L J-318532凝血酶时间（TT）测定AB C D-3-L J-328933血浆纤维蛋白原（Fbg）测定AB C D-3-L J-339334骨髓巨核细胞计数AB C D-3-L J-349735过氧化物酶染色（W ashburn法）AB C D-3-L J-359936糖原染色（Schif f法）AB C D-3-L J-3610137中性粒细胞碱性磷酸酶染色AB C D-3-L J-3710338尿微量白蛋白定量AB C D-3-L J-3810539全血C-反应蛋白定量AB C D-3-L J-3911040尿乳糜定性检查AB C D-3-L J-4011441前列腺液常规检查（玻片法）AB C D-3-L J-4111642血浆硫酸鱼精蛋白副凝固时间AB C D-3-L J-4211743异常白细胞检查（显微镜法）AB C D-3-L J-4311944异常红细胞检查（显微镜法）AB C D-3-L J-4412345浆膜腔积液粘蛋白定性检查AB C D-3-L J-4512846浆膜腔积液化学检查AB C D-3-L J-4613147浆膜腔积液外观检查（目测法）AB C D-3-L J-4713448浆膜腔积液有形成分检查AB C D-3-L J-4813649血球分析仪操作维护规程AB C D-3-L J-4913950血球分析仪操作手册AB C D-3-L J-50143ABCD人民医院检验科临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-01 版本/修订号：A/0主题内容 血红蛋白电泳检查生效口期：20060808 第4页共143页修订页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021ABCD人民医院检验科临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-01版本/修订号：A/0主题内容血红蛋白电泳检查生效口期：20060808第5页共143页血红蛋白电泳检查（电泳法）1.原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子 的卜啾。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称 之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括a、6、6和丫。血红蛋白的结构、分子 特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。本实验在碱性（P H=8.60）条件下，以琼 脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基 黑染色。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别 有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血红 蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白中 的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。2.标本采集2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。2.2标本种类：抗凝血2.3标本要求：抗凝剂选用E DTA,柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。常规静脉采血 1.8ml,加入含有109mmol/L枸椽酸钠溶液0.2ml的干燥。清洁试管中，充分混匀。4.标本储存：储存于2-8冰箱中，5天。5.标本运输：储存于2-8状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。6.标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。7.试剂7.1试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂7.2试剂生产厂家：法国Se bia公司7.3包装规格：150te sts7.4试剂盒组成琼脂糖凝胶 10块缓冲液条带 10包X2条氨基黑（浓缩液）1瓶XlOOml7.5试剂储存条件及有效期：贮存于室温 冻。有效期两年。溶血素 1瓶薄滤纸 1X10张点样模具滤纸 10条XI盒（1530）或冰箱（28）,不能冷ABCD人民医院检验科临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-01版本/修订号：A/0主题内容血红蛋白电泳检查生效口期：20060808第6页共143页8.仪器设备8.1仪器名称：SE B IA电泳仪8.2仪器厂家：法国Se bia公司8.3仪器型号：HYDRASYS9.操作步骤9.1血红蛋白液制作：抗凝血离心，5000rpm,5分钟，去掉血浆，用10倍体积的 生理盐水洗涤红细胞3次，若红细胞体积小于10ul,需特别小心。取10ul红细胞 加入130ul溶血液造成溶血。震荡混匀10秒钟，室温下培育5分钟待测。9.2启动电泳仪9.3将加样器放在一平板上，有数字的一端向上。各加样孔加入10ul溶血的样品，2分钟内加样完毕。将加样器放入保湿盒内，齿端向上（转运时用塑料齿保护架）。等待5分钟，使样品扩散至齿端。打开电泳仪盖，抬起电极和加样器支架。9.4使用HYDRAGE L 15 HE MOGL OB IN C E时选择仪器的“HB TOTAL”程序（位于链盘左 侧）。9.5从包装袋内取出缓冲条，拿出末端的塑料片，将缓冲条两端塑料片固定在电极 支架背侧的钉上，塑料片应紧贴支架。9.6取出凝胶板。将薄的滤纸轻轻吸去凝胶板表面的多余液体，然后立即丢弃滤纸。在电泳仪温度控制板表面的边线内加200ul蒸储水或去离子水。凝胶面朝上，放置 凝胶板，边缘对齐边线。略略将凝胶弯曲，然后放平，使水均匀分布在凝胶板下面 而不含气泡。9.7降低支架，使缓冲条不接触到凝胶板。9.8从保温盒里取出加样器。取时拿保护框。折断加样器齿端保护框。将加样器放 在4号位置。9.9关上电泳仪盖子，按下键盘左侧的绿色箭头START”键，电泳开始。9.10凝胶染色扫描9.10.1打开盖子9.10.2取出并丢弃加样器9.10.3升高两个支架，握住塑料端取出并丢弃缓冲条。9.10.4打开凝胶托架，平放，将干燥的凝胶片放入两层间，然后关上托架。9.10.5将凝胶支架放入染色池9.10.6取出凝胶支架，打开盖子，取出干燥的凝胶片。9.10.7在光密度仪的570nm处或以黄色滤光片扫描测定。使用HYDRYS,DVSE或ABCD人民医院检验科临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-01版本/修订号：A/0主题内容血红蛋白电泳检查生效口期：20060808第7页共143页P RE FE RE N C E光密度仪时，使A2片段的标记置于扫描板5mm的标志处。10.结果判断与参考范围扫描得到的只是每种血红蛋白条带的相对浓度值。取出胶片后，首先清洁胶片的 背面。判断溶血液的浓度是否合适，主要看基质带的浓度，如基质带浓度过淡，说 明溶血液的浓度太淡。正常时A2浓度大约为基质带浓度的1-2倍。半岁-成人：HbA 叁 94.5%,HbF 2.0%,HbA2 3.5%1 个月：HbA 12-40%,HbF 60-93%,HbA2 0.1-1.0%6 个月：HbA 86-98%,HbF 0.84-10.7%,HbA2 0.87-2.9%脐带血：HbA 4-40%,HbF 30-96%,HbA2 15%,应怀疑有血红蛋白C或E的异常。12.3.3血红蛋白E：与血红蛋白C不同的是，E在酸性凝胶电泳中不与总分离。12.3.4血红蛋白D：在碱性缓冲条件下，血红蛋白D和S的条带重叠在一起，但D 在酸性凝胶电泳中不与A2分离。13.操作性能：灵敏度高、特异性强、操作简便，重复性好。14.注意事项：ABCD人民医院检验科临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-01版本/修订号：A/0主题内容血红蛋白电泳检查生效口期：20060808第8页共143页14.1试剂贮存于室温（1530）或冰箱（28）内，不能冷冻。14.2不要应用溶血标本14.3若检测到异常血红蛋白，而又与常见的异常血红蛋白S,C,D或E不同，可使 用其他方法（如球蛋白链电泳）检测，或求助于有关专门实验室。14.4 HbF小于全部血红蛋白的2%-3%时，扫描检测HbF（或其它一些较少见的血 红蛋白）只是半定量的，结果不十分准确。14.5对于中度或重度贫血的病例，点样量应增大为15ul或20ul,其结果不受影响。14.6电泳过程中不能打开盖子。在染色脱色以及干燥过程中，仪器的一些程序处 于锁定状态。14.7最后染色后立即扫描测定。若欲保存，可用一保护物覆盖后置于干燥、暗处，避免受热，可保存约3个月。ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-02版本/修订号：A/0主题内容精液常规检查生效口期：20060808第9页共143页精液常规检查1.实验原理纪录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。显微镜检查包括精子计数、活动力、活动率、形态。2.标本采集2.1标本采集前病人准备：必须禁欲（包括遗精和手淫）37天。这是因为少于 48小时采取的精液，因相距时间太短，精液中精子的数量可能偏少，容易造成少 精症的假象。如果超过7天，精子活率、活力都有所下降，也可造成弱精子症的 假象。精液检查应间隔一周或两周，要进行23次检查。因为一个人精子的产生 在一年中，可因季节、气候等，诸多因素的影响而有一些变化。2.2标本种类：精液2.3标本要求：用清洁干燥小瓶收集，不应采用避孕套内精液。3.标本储存：立即送检。4.标本运输：室温运输，冬季需保温运输。5.标本拒收标准：久置标本，污染标本，避孕套内标本。6.操作步骤7.1纪录精液量、颜色、透明度、粘稠度和液化时间。7.2精子活动率：取新鲜标本混匀后，在温玻片上用高倍镜观察100个精子，计 数活动精子与不活动精子的比例，计算精子活动的百分率。精子活动率=活动精子数/（活动精子数+不活动精子数）X100%7.3取上述新鲜湿片标本，观察精子的活动力，可按下列五级报告：。级：精子完全不活动，加温后仍不活动；I级：精子运动不良，运动迟缓，原地打转或抖动，向前运动能力差；H级：精子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定，呈直线或非直线运动，带有回旋；III级：为中速运动；IV级：精子活动好，快速直线运动，很快超越一个视野，活泼有力。7.4精子计数：7.4.1于试管内加精子稀释液0.38ml,吸液化精液20膜，加入稀释液内摇匀。7.4.2充分摇匀后，滴入血细胞计数池内，静置l-2min,待精子下沉后，以精子ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-02版本/修订号：A/0主题内容精液常规检查生效口期：20060808第10页共143页头部作为基准进行计数。7.4.3如精子数少，可计数两个大方格内精子数，总数乘以10万即为每毫升精液 内精子数，再换算成XIO/L报告。7.4.4如精子数多，可计数5个中方格内精子数，总数乘以100万即为每毫升精液 内精子数，再换算成X109/L报告。7.5精子形态观察：革兰氏或瑞氏染色后用油镜观察。异常精子可有：头部过大、过小、尖细、外缘不齐、双头等；中部消失、分枝或肿胀；尾部呈双尾，卷曲度 短或消失（缺尾）。7.6细胞：红、白细胞5/高倍视野。7.7 pH：7.2-8.0,平均 7.8。7.8其它成分：精液中可有结晶体、卵磷脂小体、淀粉样体、脂滴、脱落上皮细 胞等。8.结果判断与分析8.1 一般性状检查8.1.1量：正常人一次排精25ml。8.1.2颜色和透明度：正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色，液化后呈半透明乳 白色，久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和肿瘤，黄色脓样精液，见于精囊炎或前列腺炎。8.1.3粘稠度和液化：正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状，在精液中纤溶 酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样，可能是精子数量减少，见于生殖系统炎症，精液不凝固见于精囊阻塞或损伤；如果精液1小时后不液化，可能是由于炎症破坏纤溶酶所致，如前列腺炎，精子不液化可以抑制精子活动力 而影响受孕。8.1.4酸碱度：pH值。正常精液呈弱碱性pH 7.2-8.0,以利于中和酸性的阴道分 泌物，pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢，不利于受孕。8.2显微镜检查。8.2.1精子存活率：排精后3060分钟，正常精子存活率应为80%90%,精 子存活率降低是导致不育的重要原因。8.2.2精子活动力：正常精子活动力应在IH级以上，若40%的精子活动不良，常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低，主要见于精索静脉曲张、泌尿生 殖系统非特异性感染，应用某些药物如抗疟药、雄激素等所致。8.2.3精子计数：正常人精子计数为10 130 X 109/L,相当于一次排出的精子总ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-02版本/修订号：A/0主题内容精液常规检查生效口期：20060808第11页共143页数为400 X 106-600 X 106o当精子计数值20X 或一次排精总数 100 X 1（）6为精子减少，超过致孕极限而导致不育。精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精 子为无精症。见于先天性睾丸发育不全、畸形或后天睾丸损伤和萎缩（如睾丸结核、炎症、淋病、垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等）、输精管阻塞或是先天性 输精管及精囊缺陷，是导致少精或无精的重要原因，也是导致不育的重要原因。检杳有无精子也是检杳输精管结扎术的效果观察。结扎六周后，连续检杳无精子，说明手术成功，如果结扎两个月后，精液中仍有精子，说明手术不成功。8.2.4精子形态：正常精液中，异常形态精子应少于10%15%,如果精液中异 常形态精子数20%,将会导致不育，可能是由于精索静脉曲张、血液中有毒代谢 产物、铅污染等或应用大剂量放射线及使用细胞毒性药物导致的精子形态异常。如果精液中发现1%的病理性未成熟细胞，包括精原细胞、精母细胞和发育不完 全的精细胞，提示睾丸的曲细精管的生精功能受到药物或其他因素影响或损伤。如果精子凝集10%,提示生殖道感染或免疫功能异常。9.注意事项9.1出现一次异常结果，应隔一周后复查，反复查2-3次才能得出比较正确的结 果。9.2如低倍镜、高倍镜检查均无精子，应将精液离心沉淀后再涂片检查，如两次 均无精子，报告“无精子”。10.操作性能：快速简便11.方法局限性：易受人为主观经验不足影响结果判断。12.参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二 版）.1997,149-150ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-03版本/修订号：A/0主题内容粪便常规检查生效口期：20060808第12页共143页粪便常规检查（直接涂片法）1.实验原理：本实验是利用肉眼观察粪便的颜色和性状，以及利用粪便生理盐水 涂片在显微镜下观察涂片中是否有虫卵、幼虫、各种细胞、包囊、结晶等。2.标本采集2.1标本采集前病人准备：无须特殊准备。2.2标本种类：粪便2.3标本要求：标本应取自粪便的不同部位特别是病理性改变比较明显的部位。3.标本储存：粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。粪便的 容器必须有盖且有明显的标记。4.标本运输：室温运输。5.标本拒收标准：尿液、植物、泥土、污水等污染标本；干结粪便6.操作步骤6.1肉眼观察粪的颜色、性状。6.2再用竹片搜集少量不同部位的粪便标本，涂抹于滴有一滴生理盐水的洁净玻片 上06.3盖上盖玻片，涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。6.4先在低倍镜下观察有无包囊、虫卵、幼虫等，再在高倍镜下观察有无红细胞、白细胞、各种结晶，并观察粪便中的菌群分布。7.结果判断与分析7.1粪便颜色根据观察所见报告，如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。正常粪便因粪胆素而呈棕黄色，但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色：灰白色见于领餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏；绿色见于食用含叶 绿素的蔬菜后及含胆绿素时一；红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等；柏油 样便见于上消化道出血等。酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等；米 泪水样见于霍乱。7.2性状可报告为软、硬、糊状、泡沫状、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘 液脓样、有不消化食物等。正常时为有形软便。7.2.1球形硬便：便秘时可见。7.2.2粘液稀便：见于肠壁受刺激或发炎时，如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-03 版本/修订号：A/0主题内容 粪便常规检查生效口期：20060808 第13页共143页7.2.3粘液脓性血便：多见于细菌性痢疾。7.2.4酱色粘液（可带脓）便：多见于阿米巴痢疾。7.2.5稀汁样便：可见于急性肠胃炎，大量时见于伪膜性肠炎及了隐抱子虫感染。7.2.6 米泪样便并有大量肠粘膜脱落，见于霍乱等。7.2.7 扁平带状便：可能因直肠或肛门狭窄所致。7.3蛔虫、蜕虫、绦虫节片等较大虫体，肉眼即可分辩。钩虫虫体常需将粪便冲洗 过筛后方可看到。服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。驱绦虫后应仔细寻找有无虫 头。8.临床意义：为各类消化道疾病提供协助性诊断；查找并鉴别寄生虫。9.操作性能：快速简便10.方法局限性：有时会受主观因素的影响11.参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二 版）.1997,139-14112.注意事项12.1虫卵的报告方式：未找到者注明“未找到虫卵”，找到一种报告一种，找到几 种报告几种，并在该虫卵后面注明数量若干，以低倍视野计算。12.2应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别，并注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。若大量出现，则提示消化不良或 胰腺外分泌功能不全。12.2细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞（直接涂片干后用瑞氏染色）、上皮细胞、巨噬细胞等。12.3夏科-雷登结晶：为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶，大小 不一。常见于肠道溃疡，尤以阿米巴感染粪便中最易检出。过敏性腹泻及钩虫病患 者粪便亦常可见到。12.4细菌：占粪便净重的1/3（4000亿/g干粪），正常菌群主要是大肠杆菌和肠球 菌，占80%；而过路菌（产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等）不超过10%；芽孑包菌（如 梭状菌）和酵母菌为常住菌，但总量不超过10%。正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致，除涂片染色找细菌外，应 采用不同培养基培养鉴定。ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-04版本/修订号：A/0主题内容粪便潜血试验（ST-0BT）定性生效口期：20060808第14页共143页粪便潜血试验（ST-OB T）定性（纸片法）1.实验原理：ASK粪便潜血纸片法是一种用于检测粪便中是否含有潜血的试剂。反应原理如下：血红素（Hb）+双氧水（H202）-水（H20）+氧（02）氧（02）+氨基比林一蓝紫色2.标本采集2.1标本采集前病人准备：收集标本前三天禁食动物性食物、肝脏及含叶绿素食 物、铁剂、中药以免引起假阳性反应。2.2标本种类：粪便2.3标本要求：标本应取自粪便的不同部位；收集标本后迅速检查，以免因长时 间放置使潜血反应的敏感度降低。3.标本储存：粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。粪便的 容器必须有盖且有明显的标记。4.标本运输：室温运输。5.标本拒收标准：久置硬结粪便6.试剂6.1试剂名称：ASK粪便潜血检测试纸6.2试剂生产厂家：东耀生物科技有限公司6.3包装规格：25人份/筒6.4试剂盒组成：6.4.1潜血试纸（OB P ape r）：试纸上涂有氨基比林。6.4.2呈色液（De ve lope r）:溶液中含有3-5%双氧水。6.4.3 竹片（Sticks）潜血试纸 5pcs*60呈色液 4*15ml竹片 300支6.5试剂储存条件及有效期：室温保存，有效期内皆可使用。7.操作步骤7.1打开潜血试纸正面封盖，用竹片搜集少量粪便检体，涂抹于A窗。ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-04版本/修订号：A/0主题内容粪便潜血试验（ST-0BT）定性生效口期：20060808第15页共143页7.2再用竹片搜集少量不同部位之粪便检体，涂抹于B窗7.3盖上封盖。7.4打开背面呈色窗，各滴两滴呈色液于A窗及B窗之背面。7.5 3 0秒内判读完毕。8.结果判断与分析8.1滴完呈色液，立刻产生蓝紫色，报告为“+”8.2滴完呈色液，5秒内产生蓝紫色，报告为“+”8.3滴完呈色液，5秒后产生蓝紫色，报告为“+”8.4滴完呈色液，无蓝紫色产生，报告为“阴性”9.临床意义9.1适合于检测粪便之潜血。9.2消化道出血时（如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等）本试验可 阳性。9.3消化道恶性肿瘤时一，粪便潜血可持续阳性。10.操作性能：快速简便、安全性高、灵敏度适中11.方法局限性：呈色反应与判读的时间控制会受主观因素影响12.参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二 版）.1997,142-14313.注意事项13.1本品为一次性使用体外诊断试剂。13.2超过有效期，不能使用。ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-05版本/修订号：A/0主题内容尿沉渣检查生效口期：20060808第16页共143页尿沉渣检查（UD-S仪器法）i.实验原理通过仪器自动实现取样、染色、清洗、混匀、稀释等动作，显微镜下的图象信 息显示在计算机显示器上，可直接进行尿液有形成分的识别工作，并且计算机将尿 分析定量板中已统计各有形成分数量自动换算成标准状态下数据，最后把干化学分 析和尿沉渣分析的完整系统用真彩色图文报告。2.标本采集及运送2.1标本采集：实验室工作人员、医生、护士必须对病人留尿进行指导，务必使尿 道口保持清洁。随机尿液标本的留取无特殊时间规定，但病人必须有足够的尿量（10ml以上）；晨尿指病人起床后第一次尿；收集“时段尿”时，应告病人时间段 的起点和终点，起始时间先排空膀胱；三杯试验留尿时间要分段明确，做好标记。送检单上应注明留尿时间、送检时间。2.2标本的运送：按上述要求留取尿液应在2小时内完成检验，如果标本收集后2 小时内无法完成分析，可置2-8冷藏，6小时内完成检验；如仅作尿沉渣检查，可 在尿标本中加适量防腐剂（大多使用400g/L的甲醛溶液，每升尿液加入5ml。应注 意甲醛过量时可与尿素产生沉淀物，干扰显微镜检查）。2.3标本的标记：标本容器必须有标记，包括：病人姓名、特定编码（或住院病人 的病区、床号）、标本收集时间。标签应贴在容器上，不可贴在盖上。2.4标本的接收：实验室应建立严格的标本接收制度，工作人员在接收标本时，必 须检查标本容器是否符合要求；标记内容与医生所填写化验单是否一致；从留尿到 接收标本的时间是否过长；标本是否被污染。尿标本量不少于10ml,在特殊病例不 可能达到此要求时（如小儿、烧伤、肾衰无尿期等），应在检验报告单上注明收到的 尿量及检查方法（离心或未离心）。3.试剂3.1染色液名称：阿一中染色液（生产厂家：北京国联在线医疗技术有限公司。包 装规格：250ml）3.2清洁液（GL I）：尿沉渣仪清洁液（直接使用）；生产厂家：北京国联在线医疗 技术有限公司；规格：1L3.3GL III清洗液：用法：当计数池很脏或堵塞用GL II清洗无效时，用该清洗液，可ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-05版本/修订号：A/0主题内容尿沉渣检查生效口期：20060808第17页共143页疏通并漂白管路。该清洗液用于外置强制清洗装置中，使用时按1（原液）：2（水）比例稀释，打开外置强制清洗装置电源开关即可进行持续强制清洗。清洗完毕后，一定要用蒸镭水清洗管路以免管路粘连老化。生产厂家：北京国联在线医疗技术有 限公司；规格：250ml3.4试剂储存条件：室温贮存。4.仪器设备UD-S自动染色尿沉渣仪系统（北京国联在线医疗技术有限公司产），C H30奥林 巴士显微镜，泰利特-500尿化学分析仪，上海-8D-2B离心机。5.操作步骤5.1取混合后的尿液10ml置于专用的尿沉渣塑料管中。5.2 1 500转/分钟离心沉淀5分钟。5.3弃去上清液留取0.2ml沉渣上机检测，按仪器操作说明进行操作检测有形成分。（另附UD-S尿沉渣仪操作步骤）6.结果判断与分析6.1计数细胞或管型，按xx/ul报告。6.2尿结晶、盐类的报告方法：尿结晶：盐类：-：0无1+：1-4个/每高倍视野1+:少量2+：5-9个/每高倍视野2+：中等量3+：10个/每高倍视野3+：多量6.3原虫、寄生虫卵的报告方法：-：01+：1个/每视野-4个/每高倍视野2+：5-9个/每高倍视野3+：10个-每高倍视野6.4细菌、真菌的报告方法：-：0+：数个视野散在可见1+：各个视野均可见2+：数量多或呈团状集聚3+：无数ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-05版本/修订号：A/0主题内容尿沉渣检查生效口期：20060808第18页共143页7.仪器评估方法7.1精密度检查：用同一尿液标本对红细胞，白细胞重复检测计数12次，去除一 个最高值和一个最低值得10次来计算C V值。7.2 准确性检查：将红细胞和白细胞悬液用生理盐水进行比稀释成4个数量级（每 个数量级计数3次取平均值），根据稀释倍数的递增观察红细胞和白细胞数量递减的 情况,，以及测得值与理论值的接近情况，计算精准度。7.3 应用UD-S仪器与干化学同步平行检测500份尿标本中的红细胞、白细胞，对 两种方法进行比较，计算其符合率。7.4 用传统显微镜检查法与仪器平行检测5例尿液沉渣标本中的红细胞、白细胞，对两种方法的结果进行比较，计算其符合率。8.计算：直接按个/微升键即可自动换算出结果。9.参考值范围：白细胞：O-7/ul；红细胞：O-5/ul10.临床意义10.1尿内白细胞增加，表示泌尿系统有化脓性炎症。红细胞增加，常见于肾小球 肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤。10.2透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中；当有轻度或暂时性肾或循环功能改 变时，尿内可有少量透明管型；在肾实质性病变如肾小球肾炎时，可见较多的颗粒 管型。10.3红细胞管型的出现常见于急性肾小球肾炎等。颗粒管型的出现，提示肾单位 有淤滞的现象。脂肪管型的出现，见于慢性肾炎肾病型及类脂性肾病。10.4在慢性肾功能不全时，尿内出现肾衰竭管型，提示预后不良。10.5蜡样管型的出现提示肾脏有长期而严重的病变，见于慢性肾小球肾炎的晚期 和肾淀粉样变时。11.参考文献11.1 2 001-2002年度深圳市检验医学论文汇编（第七期）11.2中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二 版）.1997,85-86附：UD-S自动染色尿沉渣仪操作说明一、报告输入1.干化学可以先作，然后输入报告单，也可以先输入报告单，再作干化学。如果先作干化学，则系统会把结果自动传到数据库中保存，然后可以点击“下一例”ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-05版本/修订号：A/0主题内容尿沉渣检查生效口期：20060808第19页共143页按钮往下滚动，也可以通过查询窗口打开指定的干化学结果，然后再输报告单。如 果先输入报告单，再作干化学，则必须确保报告单中的检验号或者标本号必须是干 化学仪将要产生的，在接收干化学仪传送的数据时一，如果发现当天已经存在同一标 本号的报告，则覆盖相应的干化学结果。2.检验号、住院号、病历号等报告项目名称可以在系统设置中进行修改。3.病历号、科别、病室、床号、分类号、标本种类、采取日期、送检目的、备注、审核医师等项目，如果不适合某用户，可以跳过不输入，方法是：在项目名称上点 击即可使其后的输入框变成方框，不可输入。再次点击即可还原。系统会记住设置，下次进入不需再次设置。4.在输入某项时敲回车，则输入光点自动跳到下一项。当输入到审核医师后回车，则跳到保存按钮进行自动保存，保存后系统会自动打开下一个报告进行编辑，如果 下一个报告已经存在的话。这种方式适用于先作干化学后输入报告单的情况。5.在编辑当天报告时，输入检验号后敲回车，如果数据库中已经有当天的相 同检验号的结果，则结果会被从数据库中调出。6.如果干化学仪器设置的检验号长度是6位，如果输入的数字不足6位，则系统 会在前面补。到6位，因此可以只输入左起不为0的位。比如检验号000204可以只 输入204即可。对于其他检验号长度，也是如此。7.在输入住院号时，因为医院病人的住院号是唯一的，因此，输入住院号后敲回 车，如果数据库中已经有这个患者的检查结果，则系统会把该患者最近一次的姓名 性别年龄等基本信息调出来自动填上，从而省去了重复输入。8.科别、送检医师、检验医师、审核医师等可以从列表中选择的项目，可以通过 输入数字编码来实现。方法是：在系统设置的可选项目中为这些可选项进行设置，每项采用格式999:C C C C C C,999代表等长的数字字串，如3位001,002,232,345 或者4位如0001,0026,0234等，C C C C C C代表该项的实际值。例如：01:张三、02:李四，等等。注意冒号不能是中文的冒号。9.标本种类、送检目的、理学性状在新建一个报告时可以自动填入默认值。标本 种类和送检目的的默认值是列表中的第一项，理学性状的默认值是颜色和透明度的 第一项。因此改变这些可选项的第一项，即可改变这些项的默认值。10.理学性状最多可以有5项内容，包括气味、尿量、颜色、透明度、尿类型。分 别都有可选项。要输入气味，则在气味上点鼠标，则出现可选列表。其它项也一样。要改某一项，可以先将该项的已有内容选上，然后再选择新的值，新值就可以覆盖 旧值。ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-05版本/修订号：A/0主题内容尿沉渣检查生效口期：20060808第20页共143页11.干化学结果可以直接修改。可以点击“星号开关按钮”给某项加上星号，表示 该项不正常。如果某标本干化学正常，而不用作沉渣镜检，可以点击“干化学正常”选择框，则打开阴性图选择窗口，任意选择两幅阴性图存入报告中。如果某个镜检 图象是比较典型的阴性图象，则可以点击“存为阴性图”按钮，打开阴性图保存窗 口，点击任何一个方框，即可将阴性图存在这个位置上。12.输入镜检结果时，可以输入定量和定性结果，定性结果可以选择，还可以输入 定量单位，单位也可以选择。在数细胞或者管型等目标时一，用鼠标左键点击某个细 胞或者管型结晶的名称数量即可加1,鼠标右键点击名称即可减lo注意计数时，视 野应该是随机选择的区域，而不要只注意有目标的区域。数完后填写考察过的视野 的数量，点击“个/微升”按钮，即可将填写了整数的项目换算为带小数的个/微 升。同时填写单位为第一个可选单位。如果第一个可选单位为E/uL,则为E/uL,如 果要填写单位为个/微升，则将单位的第一个可选项改为个/微升。如果要将所有空 白项目都填上未见，则点击“未见”按钮，这是个开关。即再点一次未见变成空白。打印时空白项目不会打印。如果填上未见，则未见的项目也可打印出来。13.描述是对镜检结果的综合性描述，常用词可以点击“选择常用描述”来选择。14.数据库信息窗口中显示了当前数据库的文件名称，存放位置，估算可以存放的 病例个数。作为数据备份的参照。15.若要存入质控结果，可以将分类号填写为QC或者质控,查询时按分类号和 时间查询，即可提取出不同时间的质控数据。二、图象采集1.图象的显示可以有两种方式：Dire ctDraw和DIB。视野网格是一个视野所占的 区域，当选择DIB方式时，激活动态图象时，才可以显示出视野网格。视野网格根 据当前物镜的倍数变化而变化。视野网格的大小可以在系统设置中设置。2.X,Y为图象的左上角的偏移量，适当调节X,Y,可以避免图象黑边现象。三、快捷键1.F1显示系统帮助窗口。2.F2激活图像或抓取图像。3.F3打开下一个报告进行编辑或计数。4.F4显示或隐藏沉渣仪控制窗口。5.F5显示或隐藏报告编辑窗口。6.F6迅速改变编辑窗口的位置：到屏幕右边进行沉渣项计数，到屏幕中间编辑报 告的其它项。ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书文件编号：AB C D-3-L J-06版本/修订号：A/0主题内容血疟原虫（MP）厚血片检查法生效口期：20060808第21页共143页血疟原虫（MP）厚血片检查法（手工法）i.实验原理应用瑞氏染色法对制备好的厚血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫。2.标木采集2.1标本采集前病人准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采 血；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。2.2标本种类：全血或末梢血2.3标本要求：厚血片的溶血要及时。3.标本储存：厚血片的放置期限在夏季不超过48h,冬季不超过62h。4.标本运输：室温运输。5.标本拒收标准：细菌污染。6.操作步骤6.1在洁净玻片上，滴患者血液2滴。6.2用推片角将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜，在室温中自 然干燥。6.3在干燥的血膜上滴加蒸储水数滴，完全覆盖血膜，溶血数分钟。脱去血红蛋 白的血膜呈浅灰色，倾去溶血液。6.4不必待干，进行瑞氏染色。6.5干后镜检。7.结果判断与分析：在油镜下观察20个视野或以上才能报告“未检出疟原虫”；发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。8.临床意义：本实验有利于提高疟原虫的阳性检出率。9.操作性能