生物必修一--实验：检测生物组织中的糖类-脂肪和蛋白质.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,生物必修一 实验：检测生物组织中的糖类_脂肪和蛋白质,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,实验,第二章 组成细胞的分子,应用某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生,特定的颜色反应。,实验原理,还原糖（,葡萄糖、果糖、麦芽糖,）+,斐,林试剂,砖红色沉淀,Cu,2,O,脂肪+,苏丹,橘黄色,苏丹IV,红色,蛋白质+双缩脲试剂,紫色络合物,实质：,在碱性条件下，蛋白质与Cu,2+,反应生成紫色或紫红色络合物。,基本步骤,选材,样液制备,加入试剂,颜色反应,观察,结果,结论,选材的原则,实验现象明显,（富含检测之物，避免干扰）,；,便于处理，易获得；,经济节约；,实验一：还原性糖的鉴定,1、选材：,含糖较高、颜色为白色或近于白色的,植物组织，苹果、梨最好,。,2、制样：,苹果切块,研磨,过滤,滤液,4、检测：,3、试剂：,甲液：0.1g/mL NaOH,乙液：0.05g/mL CuSO,4,组织样液,（2ml）,斐林试剂,（1ml）,振荡混匀,50,65水浴加热2min；,观察试管中溶液颜色的变化,实验一：还原性糖的鉴定,注意事项,1.斐林试剂不稳定，需混匀后使用！,2.本实验,对试管中的溶液进行加热时，试管底,部不要接触烧杯底部；,3.,另外，试管口不要朝向实验者，以免沸腾的,溶液冲出试管，造成烫伤。,实验一：还原性糖的鉴定,还原糖的检测结果,检测方法,实验二：脂肪的鉴定,方法一：用,苏丹染液检,测,组织样液,方法二,：制作子叶,临时切片,，显微,观察子叶细胞的着色情况。,特别提醒,：,实验用的花生种子需提前浸泡3-4h,浸泡时间太短，不易切片;,浸泡时间太长，则组织太软，切下的薄片不易成形,。,取材：,花生种子(浸泡,34h,），将子叶削成薄片,制片,取最理想的薄片,在薄片上滴苏丹染液（23min）,去浮色（如何去浮色）,制成临时装片,实验二：脂肪的鉴定,1-2滴体积分数为,50%的酒精溶液,观察,低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，,然后用高倍镜观察,结果及结论：,圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。,脂肪的检测结果,1、选材：,2、制样：,4、检测：,3、试剂：,实验三：蛋白质的鉴定,浸泡1-2天的黄豆种子（或用豆浆）,或用鸡蛋蛋白,黄豆浸泡切片,研磨,过滤,滤液,A液：0.1g/mL NaOH,B液：0.01g/mL CuSO,4,组织样液,（2ml）,双缩脲试剂,A,（1ml）,双缩脲试剂,B,（4滴）,观察溶液颜色,的变化,实验三：蛋白质的鉴定,以造成碱性环境,思考：,为什么要先加入A液再入B液？,注意事项：,1、如果用,鸡蛋清，,应,加以,稀释，若稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗干净。,2、鉴定之前,可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比,这样可以增强说服力。,作对照,蛋白质的检测结果,成分,待侧样品,实验记录,1、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加34滴而不能过量？,过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。,2、,为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？,时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部,而无法参与反应。,深化,比较斐林试剂与双缩脲试剂不同点,0.1g/ml,NaOH,蛋白质,等量混合，,现,配,现,用,先加A液1ml,创造碱性环境，再加B液4滴,50-65C水浴加热,不加热处理,砖红色沉淀,紫色反应,0.05g/ml,CuSO,4,0.1g/ml,NaOH,0.01g/ml,CuSO,4,还原性糖,