市场常见DNA测序仪.pptx
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1、DNA 测序仪市场常见测序仪器介绍测序技术概况测序仪器的原理和特性常见测序仪器的比较如何选择合适的测序仪Sanger双双脱氧脱氧链终止止法法MaxamGilbert DNA化学降解化学降解法法循循环芯片技芯片技术实现了高通量、了高通量、高效率、高准高效率、高准确度确度的的测序大序大大降低了大降低了测序序的的成本成本单分单分子子测序序试剂用量少,用量少,成本更低成本更低第一代测序技术第二代测序技术第三代测序技术代表仪器测序原理ABI3730XLsanger法:毛细管电泳分离电脑荧光检测数据分析可得到DNA碱基序列第一代第一代ABI3730XLu毛细管规格:96道毛细管u毛细管长度:50cmu凝胶
2、的规格:POP-7液体分离胶u配套的试剂:基因测序(BigDye3.1v和5Sequencebuffer)基因分型(Liz120,Liz500,ROX500)u基因测序及分型的运行时间时间:96样本2h通量:(94-96)/384*12u读长:700-900bp优势:u方法可靠、准确度高,且已形成规模化,特别是在PCR产物测序、质粒和细菌人工染色体的末端测序、以及STR基因分型方面,发挥着重要作用.性能:不足:u通量低;成本相对较高测序原理:l文库制备l乳液PCR扩增l焦磷酸测序第二代ROCH-454IlluminaGAABISOLID测序原理:l制备DNA文库l乳液PCR/微珠富集l连接酶测
3、序lSOLID的双碱基编码矩阵测序原理:l制备DNA文库l桥式PCR产生DNA簇l测序第二代ABISOLID优势:u系统可扩展性u最大的灵活性u全基因表达图谱分析u更多RNA研究uSNP分析u甲基化分析第二代IlluminaGA技术特点:u测序通量高:每个测序反应能达到3G以上的数据通量;u准确率高:98.5%,同时也有效地解决了多聚重复序列的读取问题;u低成本:比传统毛细管测序技术成本的1%还低;uDNA序列的读取长度不断增加,当前达到200bp;u可以进行Pair-End双向测序,目前Pair-End文库插入片段大小范围可由200bp到10kb;u每张芯片有8个通道,每个通道可单独测序一个
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