食品添加剂未来研究趋势综述.pptx
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1、第六章第六章 食品添加剂分析食品添加剂分析6.1 6.1 食品添加剂的概况食品添加剂的概况食品添加剂是用于改善食品的品质、延长食品保存期、便于食品加工和增强食品营养成分的一类化学合成或天然物质。它在食品的制造加工、包装处理及感官评定等方面起了很大的作用。世界各国为确保食品添加剂的安全使用,制定了有关食品添加剂的法规。食品添加剂的定量、定性分析,是食品安全的一个至关重要的方面。食品添加剂的分类食品添加剂的分类按来源分:天然的和化学合成的按功能分:防腐剂、漂白剂、发色剂、着色剂、酸度调节剂、抗结剂、消泡剂、抗氧化剂、膨松剂、稳定剂和凝固剂、胶姆糖基础剂、乳化剂、酶制剂、增味剂、被膜剂、水分保持剂、
2、营养强化剂、甜味剂、增稠剂、香料及其它,共22类。几种食品添加剂举例:几种食品添加剂举例:防腐剂:防腐剂:苯甲酸和苯甲酸钠、山梨酸和山梨酸钾苯甲酸和苯甲酸钠、山梨酸和山梨酸钾漂白剂:漂白剂:过氧化苯甲酰、过氧化苯甲酰、SO2发色剂:发色剂:亚硝酸钠(火腿肠中含有,能使肉鲜红,且有防腐的作用)亚硝酸钠(火腿肠中含有,能使肉鲜红,且有防腐的作用)抗氧化剂:抗氧化剂:BHA,BHT,TBHQ,维生素维生素E,维生素维生素C被膜剂:被膜剂:紫胶(用于巧克力糖的外膜涂层,防止巧克力受潮发粘)紫胶(用于巧克力糖的外膜涂层,防止巧克力受潮发粘)营养强化剂:营养强化剂:食盐中的碘,食盐中的碘,氨基酸,氨基酸,
3、维生素,维生素,矿物质,如、钙、铁、锌。矿物质,如、钙、铁、锌。食品添加剂的作用食品添加剂的作用 食品添加剂的发展大大地促进了食品工业的发食品添加剂的发展大大地促进了食品工业的发展,其所以如此,是因为食品添加剂具有以下展,其所以如此,是因为食品添加剂具有以下作用:作用:(1)增加食品的保藏性,防止腐败变质增加食品的保藏性,防止腐败变质(2)改善食品的感官性状改善食品的感官性状(3)有利于食品加工操作,适应生产的机械化和有利于食品加工操作,适应生产的机械化和连续化连续化(4)保持或提高食品的营养价值保持或提高食品的营养价值(5)满足其他特殊需要满足其他特殊需要食品添加剂的一般要求食品添加剂的一般
4、要求 根据多年来的工作,由动物实验对添加剂已作根据多年来的工作,由动物实验对添加剂已作出出 毒理学的评价,从而规定了添加剂的毒理学的评价,从而规定了添加剂的“每日允许每日允许摄取量摄取量”(Accepted Daily Intake),即即ADI值。值。ADI值,是指人每天允许食用的量,就是说,某种值,是指人每天允许食用的量,就是说,某种化学物质某种化学物质一个人每天食用同样的数量,化学物质某种化学物质一个人每天食用同样的数量,并且长期不断食用下去,对人体也不致产生危害的并且长期不断食用下去,对人体也不致产生危害的剂量。这是通过动物试验的结果将它应用到人类而剂量。这是通过动物试验的结果将它应用
5、到人类而制定的。制定的。任何对人体有重要作用的不可缺少的物质,都是任何对人体有重要作用的不可缺少的物质,都是有一定限量的,超过就会对人体有害。有一定限量的,超过就会对人体有害。6.2 6.2 某些食品添加剂的检测某些食品添加剂的检测6.2.1 6.2.1 防腐剂防腐剂能抑制食品中微生物的繁殖,防止食品腐败变质,延长食品保存期。常用的防腐剂有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对羟基苯甲酸酯,以上三种防腐剂主要用于酱油、醋、果汁、汽水、果酱、果子露和罐头等。此外还有二氧化硫,用于葡萄酒、果酒。丙酸钙主要用于面包、糕点、酱油、醋、黄油和乳制品。苯甲酸、山梨酸及对羟基苯甲酸酯苯甲酸、山梨酸及对羟基苯甲酸
6、酯样品处理从食品中提取苯甲酸、山梨酸最常用的方法是蒸气蒸馏法或乙醚萃取法。当样品加酸酸化后,其中的苯甲酸钠盐、山梨酸钠盐转变为苯甲酸和山梨酸,在酸性条件下可随水蒸气馏出,导入碱性吸收液中,然后酸化。用乙醚萃取游离酸,挥干乙醚,加适当的溶剂溶解残渣,便可进行测定。有时食品中的其它干扰物质存在时对提取会造成麻烦,因此在提取苯甲酸、山梨酸之前应先进行样品处理,目的是为了防止提取过程中出现乳化现象而损失苯甲酸、山梨酸,并消除苯甲酸、山梨酸以外的酸性物质给测定带来的误差。具体处理方法如下:除二氧化碳 碳酸饮料中二氧化碳可用超声法除去。除酒精 因酒精既可溶于乙醚,又可溶于水,当用乙醚提取苯甲酸时便容易乳化
7、,故应先加热挥去酒精,再将样品酸化后用乙醚提取苯甲酸。除脂肪 因脂肪易溶于乙醚,而脂肪酸也能消耗碱,当用酸碱滴定法分析苯甲酸时会带来正误差。通常在碱性条件下用乙醚提取出脂肪,然后再加酸酸化,并用乙醚提取苯甲酸。除蛋白质 蛋白质是高分子化合物,结构既有亲脂基团又有亲水基团,当用乙醚提取苯甲酸时,蛋白质的存在会导致乳化而给分离苯甲酸带来困难。除蛋白质的方法很多,例如盐析、加蛋白质沉淀剂、透析等。样品经酸化后,蒸馏法提取山梨酸、苯甲酸和对羟基苯甲酸酯,这一方法在基体复杂的食品中得到广泛应用。通过对大量不同样品的分析,蒸馏法的提取率一般在75-95之间。蒸馏法可以将防腐剂从含氯化钠和酒石酸的基质中提取
8、出来,导入至二氯甲烷-水的混合溶液(75:25)中,防腐剂被提取到有机相中,经浓缩后进行GC分析。()气相色谱法()气相色谱法苯甲酸和山梨酸可以被气相色谱法直接测定,一般用极性固定相进行分离。如果将苯甲酸、山梨酸衍生为酯(甲酯、丁酯)或硅醚的形式,则用非极性固定相分离。例:Graveland用3磷酸-乙醚溶液提取面包里的山梨酸和苯甲酸,离心后上清液作为样液进行GC测定,色谱柱为2m2mm的玻璃柱,内填Carbowax20M/对苯二甲酸固定液涂渍在60-80目ChromosorbW担体上,柱温以5/min从100升高到210,载气为氮气65mL/min。丙酸、山梨酸和苯甲酸在25min内完成分离
9、,最低检出量为5ng。(2)液相色谱法苯甲酸、山梨酸和对羟基苯甲酸酯可以用HPLC直接测定。添加剂样品提取方法流动相及色谱柱回收率/%苯甲酸、山梨酸苯甲酸、山梨酸苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸酯、丙酸苯甲酸、山梨酸调味品等饮料果酱、调味品、饮料、腌菜、人造黄油果汁、饮料、乳制品、酱、冷食等膜过滤超声脱气、膜过滤饱和硫酸铵水蒸气蒸馏膜滤及乙醚提取25mmol/L NaH2PO4-甲醇(3:7);TSKGEL ODS-80Tm柱甲醇0.02mol/L乙酸铵(3:7);C18柱0.025mol/L磷酸(pH7.2)-甲醇(95:5);Inertsil-pH柱甲醇-0.02mol/L乙酸铵(5
10、:95);ODS C18柱104-10898-11382-10195-101(3)薄层色谱法薄层色谱法苯甲酸、苯甲酸钠经分离提纯后,用薄层层析分离,在苯甲酸、苯甲酸钠经分离提纯后,用薄层层析分离,在紫外光下或显色后与标准比较定性与概略定量。紫外光下或显色后与标准比较定性与概略定量。(4 4)紫外分光光度法紫外分光光度法苯甲酸、苯甲酸钠在酸性溶液中蒸发出来后,在重铬酸苯甲酸、苯甲酸钠在酸性溶液中蒸发出来后,在重铬酸钾硫酸溶液中氧化除去挥发性的杂质及山梨酸,再进行钾硫酸溶液中氧化除去挥发性的杂质及山梨酸,再进行蒸馏分离,蒸馏液在波长蒸馏分离,蒸馏液在波长225nm处测光密度与标准比处测光密度与标准
11、比较定量本法适用于酱油、酱菜、果汁、果酱等样品。较定量本法适用于酱油、酱菜、果汁、果酱等样品。6.2.2 6.2.2 发色剂发色剂发色作用,抑菌作用亚硝酸盐是添加剂种急性毒性较强的物质之一,其次亚硝酸盐为亚硝基化合物的前体,具有致癌性,因此对其用量及残留量有严格的要求。抗坏血酸与亚硝酸盐有高度亲和力,在体内能防止亚硝化作用,因此在肉类腌制时添加适量的抗坏血酸,有可能防止生成致癌物质。虽然硝酸盐和亚硝酸盐的使用受到了很大限制,但至今国内外仍在继续使用。其原因是亚硝酸盐对保持腌制肉制品的色、香、味有特殊作用,迄今未发现理想的替代物质。更重要的是亚硝酸盐对肉毒梭状芽孢杆菌的抑制作用。硝酸盐和亚硝酸盐
12、的测定方法主要有比色法、气相色谱法和液相色谱法。(1)盐酸萘乙二胺法(测亚硝酸盐)样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成红紫色染料,与标准比较定量。本法检出下限为0.1mg/kg。(2)镉柱法(测硝酸盐用)样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,溶液通过镉柱,使其中的硝酸根离子还原成亚硝酸根离子,在弱酸性条件下,亚硝酸根与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成红紫色染料,测得亚硝酸盐总量,由总量减去亚硝酸盐含量即得硝酸盐含量。(3 3)气相色谱法)气相色谱法 测定前要进行衍生化以形成易挥发性的物质。硝酸盐的测定通常是将其衍生为硝基苯,
13、用热裂解检测器测定,检测限为100-200100-200g/kgg/kg。亚硝酸根衍生物的分离一般采用非极性固定相。(4)液相色谱法硝酸根和亚硝酸根的液相色谱测定方法,大多采用阴离子交换法分离,然后以抑制型电导或紫外检测。用离子交换色谱法分析食品中硝酸根和亚硝酸根不仅简便、快速,而且选择性好、准确度高。6.2.3 6.2.3 甜味剂甜味剂甜味剂是指能赋予食品甜味的一种食品添加剂。天然甜味剂主要是从植物组织中提取出来的甜味物质,近年也采用人工合成法获得。它可分为糖醇类和非糖类。糖醇类:木糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、乳糖醇等非糖类:甜菊糖苷、甘草、奇异果素、索马甜等。人工甜味剂主要是一些具有甜味但又
14、不是糖类的物质。它的品种很多,其中磺胺类有糖精、甜蜜素等;二肽类有阿斯巴甜、阿力甜等;蔗糖的衍生物有三氯蔗糖、帕拉金糖、果糖低聚糖等。糖精糖精糖精是广泛使用的人工甜味剂,我国规定糖精最大使用量为0.15g/kg。糖精的甜味是蔗糖的500倍,但食后会有一种金属余味,通常与甜蜜素配伍使用。由于糖精对人体并无营养作用,也不是食品中的天然成分,应尽量少或不用。对婴幼儿食品、病人食品和大量食用的主食食品不得使用。()比色法糖精经氯仿、苯提取分离后,与酚和硫酸于175加热,转化成酚磺酞,然后用碳酸氢钠处理,形成的红色在558nm波长测定,和标准比较而定量。()紫外吸收光谱法食品中的糖精钠用透析法进行透析,
15、用乙醚提取,转至aHCO3溶液中加盐酸和锌粉进行还原生成二氧化苯并异噻唑啉,此还原生成物用紫外吸收光谱法进行定性定量测定。()薄层层析法 糖精在酸性条件下,用乙醚提取,浓缩后经薄层层析分离,自薄层板上刮下,定量溶解,酸化后在波长207nm测定。()纳氏比色法 糖精先经薄层分离,自薄层板上刮下,定量溶解后,加 2SO4 和H2O2 消化,使成为铵盐,然后和碘化汞、碘化钾的复盐(HgI22KI)反应生成黄色化合物,用铵盐为标准,间接求出糖精的含量。(5)气相色谱法GC法测定糖精(钠)是将样品酸化后,用乙酸乙酯提取糖精,提取液浓缩后,用甲基化试剂衍生成甲基化合物,用GC测定。(6)液相色谱法HPLC
16、法测定汽水、果汁、配制酒类中糖精钠为我国国家标准方法中的第一法(GB/T5009.28-2003),样品处理相对简单,将样品加温除去二氧化碳和乙醇,用氨水(1:1)调pH值约7,过滤后就可以进样分析。6.2.4 6.2.4 色素色素食用色素按其性质和来源,可分为食用天然色素和食用合成色素两大类。天然色素安全性较高,但染色力弱,稳定性较差:叶绿素,类胡萝卜素花色苷等。目前已经有170多种不同原料的天然色素,常见的有叶绿素、类胡萝卜素、花色苷、紫胶、胭脂虫红、红花素、栀子黄、焦糖色等。合成色素着色能力强,且稳定性好,但大多数对人体有害(一般毒性、致泻性和致癌性):苋菜红,胭脂红,日落黄,柠檬黄等。
17、合成色素多以苯、甲苯、萘等化工产品为原料,经过磺化、硝化、偶氮化等一系列有机反应化合而成。因此,食用合成色素多为含有R-N=N-R键、苯环或氧杂蒽结构化合物,它们对人体存在一定的不安全性或者产生有害作用。“苏丹红苏丹红”风波风波“苏丹红苏丹红”型色素是一种人造化学制剂,全型色素是一种人造化学制剂,全球多数国家都禁止将其用于食品生产。这种球多数国家都禁止将其用于食品生产。这种色素常用于工业方面,比如溶解剂、机油、色素常用于工业方面,比如溶解剂、机油、蜡和鞋油等产品的染色。科学家通过实验发蜡和鞋油等产品的染色。科学家通过实验发现,现,“苏丹红苏丹红”会导致鼠类患癌,它在人类会导致鼠类患癌,它在人类
18、肝细胞研究中也显现出可能致癌的特性。肝细胞研究中也显现出可能致癌的特性。苏丹红是一种人工合成的偶氮类、油溶性的化工染色剂,1896年科学家达迪将其命名为苏丹红并沿用至今。苏丹红被大量地用在工业、化学和医学领域,用于机油、汽车蜡和鞋油等工业产品,以及生化毒理学研究的着色剂等。目前,苏丹红系列常见4种,其中二号、三号和四号均为一号的化学衍生物。苏丹红一号为暗红色;二号为红色;三号为有绿色光泽的棕红色;四号为深褐色。1995年,欧盟和其他一些国家已开始禁止在食品年,欧盟和其他一些国家已开始禁止在食品中添加苏丹红一号;我国中添加苏丹红一号;我国1996年出台的年出台的食品添食品添加剂使用卫生标准加剂使
19、用卫生标准中不包含苏丹红及其系列色中不包含苏丹红及其系列色素(标准中没有公布的添加剂不准用于食品中)。素(标准中没有公布的添加剂不准用于食品中)。2003年年6月,欧盟规定所有进口的辣椒及其制品月,欧盟规定所有进口的辣椒及其制品必须检测苏丹红项目,确定未添加后方可进口,必须检测苏丹红项目,确定未添加后方可进口,并要求成员国对市场上销售的辣椒及其制品进行并要求成员国对市场上销售的辣椒及其制品进行随机抽样检测。随机抽样检测。2005年年3月,国内已经证实的月,国内已经证实的“涉红涉红”产品名单:产品名单:肯德基肯德基肯德基新奥尔良烤翅、新奥尔良烤鸡腿堡调料肯德基新奥尔良烤翅、新奥尔良烤鸡腿堡调料亨
20、氏美味源亨氏美味源(广州广州)食品有限公司食品有限公司美味源桂林辣椒油和美味源金唛桂美味源桂林辣椒油和美味源金唛桂林辣椒酱林辣椒酱麦当劳麦当劳麦当劳西部烧烤调味汁麦当劳西部烧烤调味汁调味料调味料麦当劳地戎芥末蛋黄酱麦当劳地戎芥末蛋黄酱调味料调味料麦当劳凯馓调味汁麦当劳凯馓调味汁(普通脂肪型普通脂肪型)调味料调味料麦当劳凯馓调味汁麦当劳凯馓调味汁(低脂肪型低脂肪型)调味料调味料广州田洋食品有限公司广州田洋食品有限公司田洋牌田洋牌“辣椒红一号辣椒红一号”复合食品添加剂复合食品添加剂河北邯郸中进天然色素有限公司河北邯郸中进天然色素有限公司辣椒精辣椒精珠海市珠海市“公仔公仔DOLL”牌产品牌产品公仔日
21、式碗面公仔日式碗面牛肉味公仔米粉牛肉味公仔米粉劲辣牛肉味公仔面劲辣牛肉味公仔面公仔拉面屋红烧牛肉公仔拉面屋红烧牛肉(两种两种)公仔拉面屋红油排骨公仔拉面屋红油排骨牛肉味公仔面牛肉味公仔面长沙长沙“坛坛乡坛坛乡”调料食品有限公司调料食品有限公司“坛坛乡坛坛乡”牌风味辣椒萝卜含有牌风味辣椒萝卜含有“苏丹红四号苏丹红四号”2006年11月,河北白洋淀的“红心鸭蛋”苏丹红事件2006年12月,陕西出产辣椒面再现苏丹红食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法(GB/T196812005)范围本标准适用于食品中苏丹红染料的检测。本标准规定了食品中苏丹红、苏丹红、苏丹红、苏丹红的高效液相色谱测定方法。方法最
22、低检测限:苏丹红、苏丹红、苏丹红、苏丹红均为10ug/kg。方法要点样品经溶剂提取、固相萃取净化后,用反相高效液相色谱紫外可见光检测器进行色谱分析,采用外标法定量。样品处理1.红辣椒粉等粉状样品称取1g5g(准确至0.001g)样品于三角瓶中,加入10mL30mL正己烷,超声5min,过滤,用10mL正己烷洗涤残渣数次,至洗出液无色,合并正己烷液,用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下,慢慢加入氧化铝层析柱中,为保证层析效果,在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样,在全程的层析过程中不应使柱干涸,用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶,一并注入层析柱。控制氧化铝表层吸附的色素带宽宜小于0.5cm,待样液完全流出后,
23、视样品中含油类杂质的多少用10mL30mL正己烷洗柱,直至流出液无色,弃去全部正己烷淋洗液,用含5%丙酮的正己烷液60mL洗脱,收集、浓缩后,用丙酮转移并定容至5mL,经0.45m有机滤膜过滤后待测。2.红辣椒油、火锅料、奶油等油状样品称取0.5g2g(准确至0.001g)样品于小烧杯中,加入适量正己烷溶解(约1mL10mL),难溶解的样品可于正己烷中加温溶解。按1中“慢慢加入到氧化铝层析柱过滤后待测”操作。3.辣椒酱、番茄沙司等含水量较大的样品称取10g20g(准确至0.01g)样品于离心管中,加10mL20mL水将其分散成糊状,含增稠剂的样品多加水,加入30mL正己烷:丙酮=3:1,匀浆5
24、min,3000rpm离心10min,吸出正己烷层,于下层再加入20mL2次正己烷匀浆,离心,合并3次正己烷,加入无水硫酸钠5g脱水,过滤后于旋转蒸发仪上蒸干并保持5分钟,用5mL正己烷溶解残渣后,按1中“慢慢加入到氧化铝层析柱过滤后待测”操作。4.香肠等肉制品称取粉碎样品10g20g(准确至0.01g)于三角瓶中,加入60mL正己烷充分匀浆5min,滤出清液,再以20mL2次正己烷匀浆,过滤。合并3次滤液,加入5g无水硫酸钠脱水,过滤后于旋转蒸发仪上蒸至5mL以下,按1中“慢慢加入到氧化铝层析柱中过滤后待测”操作。推荐色谱条件1.仪器条件 色谱柱:ZorbaxSB-C183.5m4.6mm1
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