非发酵ppt课件.ppt
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1、*第九章第九章 不发酵革兰阴性杆菌不发酵革兰阴性杆菌张 楠*不发酵革兰阴性杆菌不发酵革兰阴性杆菌*定义:一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌;多为条件致病菌。葡萄糖OF反应结果*不发酵菌主要特点不发酵菌主要特点*氧化酶:;不动杆菌,嗜麦芽窄食单胞 菌属除外,部分洋葱伯克霍尔德菌。*O/F试验:O/*动力试验:多数有鞭毛,但半固体动力试验不明显,常采用镜检或鞭毛染色*肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别鉴定试验鉴定试验肠杆菌科肠杆菌科非发酵菌非发酵菌弧菌科弧菌科氧化酶氧化酶葡萄糖氧化葡萄糖氧化/发酵(发酵(O/F)FOF鞭毛鞭毛
2、周鞭毛周鞭毛单、丛、周单、丛、周单、丛单、丛常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定试验试验假单胞菌属假单胞菌属无色杆菌属无色杆菌属黄杆菌属黄杆菌属不动杆菌属不动杆菌属产碱杆菌属产碱杆菌属丛毛菌属丛毛菌属莫拉菌属莫拉菌属氧化酶氧化酶+/-+/-O/F试验试验O/-OOO/-动力动力+/-+/-+/-+-注:注:+:90%以上阳性;以上阳性;-10%以下的阳性;以下的阳性;+/-:约:约70%为阳性;为阳性;O:为氧化。:为氧化。不发酵革兰阴性杆菌不发酵革兰阴性杆菌*第一节第一节 假单胞菌属假单胞菌属*假单胞菌属细菌根据rRNA-DNA同源性分为5群,其中群最多见
3、共12种细菌,代表菌种为铜绿假单胞菌。*假单胞菌属多为条件致病菌,占非发酵菌感染的70-80%。*现把II、V群分别独立为伯克霍尔德属及窄食单胞菌属。*假单胞菌属共同点假单胞菌属共同点*革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜,单或丛鞭毛*专性需氧*氧化酶:*O/F:O*产生水溶性色素*二二 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌*假单胞菌属的代表菌种,假单胞菌感染主要为铜绿假单胞菌,分布广泛主要的条件致病菌。*铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌形态染色形态染色*革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜,单鞭毛(一)生物性状(一)生物性状形态染色性:革兰阴性菌杆,呈球杆状或长丝状,长短不一,单个或短链排列。无芽胞,无荚膜,单端单鞭毛,运动活
4、泼。培养特性:专性需氧,4不长,42可生长。血平板:典型的菌落扁平、湿润、毛玻璃样、金属光泽、有透明的溶血环、生姜味、菌落和培养基灰绿色 普通平板:可产多种色素,主要有:绿脓素(兰绿色,可溶于水)和荧光素(即青脓素,黄或黄绿色,只溶于水)。从临床标本中分离的菌株大多产生此色素(90%)铜绿假单胞菌在血琼脂平板上的菌落特征(18-24h)*80-90%80-90%产生绿脓素和荧光素产生绿脓素和荧光素铜绿假单胞菌产荧光素铜绿假单胞菌产荧光素铜绿假单胞菌产绿脓素铜绿假单胞菌产绿脓素铜绿假单胞菌绿脓素铜绿假单胞菌荧光素 麦康凯上可形成5种不同形态的菌落:典型型:灰绿色,大小不一,扁平湿润,边缘不齐,表
5、面可见金属光泽。大肠菌群型:圆形凸起,灰白色半透明。粗糙型:菌落中央凸起,边缘扁平,表面粗糙。侏儒型:细小无光泽,半透明菌落粘液型:光滑凸起呈粘液状生化反应:氧化酶,O/F上能氧化分解葡萄糖、木糖产酸、精氨酸双水解酶,枸橼酸盐,硝酸盐。抵抗力:较强,临床分离株对多种抗生素耐药葡萄糖OF反应结果 (二)致病性:(二)致病性:可产生多种致病物质:菌毛、荚膜、胞外酶和溶血物质、内毒素、外毒素.除自然界外,也存在于人体皮肤上及与外界相通的腔道中。多为继发感染,如烧伤后的创面感染,也可引起肺炎、脑膜炎、尿道感染,严重时可引起败血症,死亡率甚高。(三)微生物学检验(三)微生物学检验*1、显微镜检查:标本直
6、接涂片革兰染色镜检;鞭毛染色镜检*2、培养:标本接种血平板、Mac平板分离培养,血标本先增菌,再转种*3、鉴定:*初步鉴定:菌落特征、水溶性绿色色素、生姜气味、氧化酶、O/F*全面鉴定:色素不典型者需全面鉴定*铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌检验程序检验程序标本标本 增菌增菌 分离培养分离培养(血平板)(血平板)最后鉴定最后鉴定可疑菌落(性状、色素)可疑菌落(性状、色素)初步鉴定初步鉴定 涂片涂片染色镜检染色镜检血标本血标本涂片镜检涂片镜检氧化酶氧化酶菌落特征菌落特征绿脓素绿脓素气味气味色素鉴定色素鉴定生化反应生化反应42生长生长分型分型O/F:O枸櫞酸盐利用枸櫞酸盐利用精氨酸双水解精氨酸双水解乙酰胺
7、酶乙酰胺酶明胶液化明胶液化*荧光假单胞菌荧光假单胞菌*革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛*专性需氧*营养要求不高,普通平板、Mac平板可生长*最适生长温度2530,4生长,35、42不生长*产生水溶性荧光素(青脓素),不产绿脓素*氧化酶;O/F:O;卵磷脂酶;明胶液化*具有嗜冷性,可在冰箱储存血中繁殖*恶臭假单胞菌恶臭假单胞菌*革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛*专性需氧*最适生长温度2530,4及42不生长*产生水溶性荧光素(青脓素),不产绿脓素;陈旧培养物有腥臭味*氧化酶;O/F:O;卵磷脂酶;明胶液化*第二节第二节 伯克霍尔德菌属伯克霍尔德菌属*属于rRNA第II群*主要有马勒伯克霍尔德菌、伪马勒伯克霍尔德
8、菌、洋葱伯克霍尔德菌等*条件致病菌。*马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌菌*鼻疽病与类鼻疽病的病原体*2004年NCCLs称为可能成为生物恐怖的细菌*肺鼻疽病、皮肤鼻疽病、内脏脓肿、菌血症、脓毒血症*生物学特性生物学特性 *革兰阴性杆菌*无芽胞、无荚膜*伪马勒鼻伯克霍尔德菌一端有丛鞭毛(14 根),42生长*马勒鼻伯克霍尔德菌无鞭毛无动力,42 不生长*洋葱伯克霍尔德菌洋葱伯克霍尔德菌染色:细小阴性杆菌菌落:细小透明的菌落、可产黄色素、紫色素生化:O/F非发酵,有动力,多数氧化酶阳性(缓慢阳性)。*三、嗜麦芽窄食单胞菌三、嗜麦芽窄食单胞菌*属于假单胞菌科的r
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