GB∕T 38261-2019 纳米技术 生物样品中银含量测量 电感耦合等离子体质谱法.pdf
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1、书 书 书犐 犆犛 犃 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准犌犅犜 纳米技术生物样品中银含量测量电感耦合等离子体质谱法犖犪 狀 狅 狋 犲 犮 犺 狀 狅 犾 狅 犵 狔犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狊 犻 犾 狏 犲 狉犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 狊犻 狀犫 犻 狅 犾 狅 犵 犻 犮 犪 犾狊 犪犿狆 犾 犲 狊犐 狀 犱 狌 犮 狋 犻 狏 犲 犾 狔犮 狅 狌 狆 犾 犲 犱狆 犾 犪 狊犿犪犿犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅犿犲 狋 狉 狔 发布 实施国 家 市 场 监 督 管 理 总 局国 家 标 准 化 管 理 委 员 会发 布书 书 书目次前言引
2、言范围规范性引用文件术语和定义缩略语原理仪器与试剂样品试验步骤数据分析 准确度和精密度 测试报告附录(资料性附录)实验流程图附录(资料性附录)测试报告模板附录(资料性附录)含有银包金纳米棒的生物组织中银含量的测量示例参考文献 犌犅犜 前言本标准按照 给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中国科学院提出。本标准由全国纳米技术标准化技术委员会( )归口。本标准起草单位:国家纳米科学中心、中国食品药品检定研究院、北京市理化分析测试中心、国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心。本标准主要起草人:吴美玉、刘颖、李瑞如、王新胜、柳琳、高峡、赵
3、婷、陈宽、淡墨、陈亮、徐丽明、谢黎明。犌犅犜 引言银纳米颗粒具有广谱的抗菌活性,广泛应用于生活用品以及医疗器械中,。随着应用范围的不断扩大,银纳米颗粒进入人体的途径更加多样化,并以多种形式存在于生物组织中。因此,银暴露的风险引起了高度关注。在银纳米颗粒的毒代动力学等生物效应和安全性评价中,银纳米颗粒暴露后,可以以颗粒、离子等多种形式存在于生物样品中,而不同形式的银元素均在其生物学功能中发挥重要作用,所以准确测量生物样品中银元素的总含量非常重要。但是,目前尚无相关国家标准。电感耦合等离子体质谱法( )是以等离子体为离子源的一种质谱型元素分析方法,主要用于进行多种元素的同时测定,适用于痕量或微量重
4、金属元素的分析。本标准包括经银纳米颗粒暴露的生物样品的微波消解方法,以及使用 测量消解后样品中银元素总含量的方法。犌犅犜 纳米技术生物样品中银含量测量电感耦合等离子体质谱法警示 本标准方法中使用的部分试剂具有腐蚀性和强氧化性,需谨慎防护,避免接触皮肤和衣物;微波消解过程应在通风橱内进行,按仪器相关设备安全规定操作;注意安全用电。范围本标准规定了生物样品中银含量的定量测量方法,包括样品制备和测量步骤。本标准适用于多种生物样品(生物组织、细胞、组织模型等)中银含量的定量测量。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件
5、,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 分析实验室用水规格和试验方法 纳米材料术语 无机化工产品杂质元素的测定电感耦合等离子体质谱法( )术语和定义 和 界定的术语和定义适用于本文件。缩略语下列缩略语适用于本文件。 :电感耦合等离子体质谱( )原理生物样品经微波消解后定容,所得溶液采用 方法进行元素含量检测。定量方法采用内标法,即在待测样品、空白样品和加标样品中通过蠕动泵在线加入相同浓度的内标元素,根据银元素的强度与内标元素强度值的比值和银元素浓度的定量关系实现对银的定量分析。该方法中设置加标样品以判定测量结果的准确性。仪器与试剂 仪器 电感耦合等离子体质谱分析仪( 分析仪) 。 微波
6、消解仪:具备程式化功率设定功能,最大输出功率 ,最高设定温度 。犌犅犜 消解罐:压力消解罐,聚四氟乙烯材质或等效材质, 。 聚四氟乙烯管: 。 赶酸仪:工作温度范围为室温至 。 分析天平:灵敏度 。 移液器:量程 ,量程 ,量程 ,量程 。 冰箱:可满足 冷冻存储条件。 试剂除非另有说明,分析时均使用确认为优级纯或以上级别的化学试剂,实验用水为符合 规定的一级水,标准溶液使用有证标准物质。 硝酸: 。 银标准溶液:介质 硝酸。 内标标准溶液:介质 硝酸。宜选用铟( )和铑( )为内标元素,内标元素的选择原则参考 。 氩气:纯度 。样品 样品前处理流程图参见附录中图 。 待测生物样品制备 将冷冻
7、的待测生物样品室温解冻,差量法准确称取一定量的样品(犿,宜为 )至 微波消解罐中。新鲜获得的样品可直接称量。注:对于总质量不足 的生物样品,可以实际称量质量为准。注:体外模型生物样品直接将收集的样品投入消解罐即可,可不称量;体外细胞经胰酶消化、离心收集入离心管后,在离心管中加入浓硝酸预消解过夜,然后转移至消解罐,进行微波消解步骤。 在上述每个微波消解罐中加入 浓硝酸,预消解 。 旋紧消解罐,将其对称安装在转盘上进行微波消解。微波消解参考程序见表。注:不同微波消解仪可根据仪器固有条件适当调整功率和消解时间等程序参数,保证样品消解完全即可。表生物样品微波消解参考程序步骤功率升温时间 温度保持时间
8、待消解程序结束,取出消解罐冷却至室温。 旋开消解罐,使消解过程产生的气体缓慢释放,观察并确定样品是否完全消解。若消解完全,则执行步骤 。若消解液中仍有油脂小液滴,则参考表中的程序继续消解,直至消解完全。犌犅犜 表生物样品微波消解参考程序步骤功率升温时间 温度保持时间 将消解液在赶酸仪上加热赶酸至近干,宜在 加热约 ,取出消解罐冷却至室温。 将 中的消解液转移至已称量的 聚四氟乙烯管中,然后用体积分数为的稀硝酸洗涤消解罐次次,将全部洗涤液转移至上述聚四氟乙烯管,并称量定容至 (犿)用于银含量测量。 移取 中的消解液各至离心管,室温差量法精确称量并记录该溶液的质量(犿,精确至) ,用于数据分析。
9、空白加标样品制备空白加标样品用来评价系统方法回收率。根据预实验生物样品中的银含量数据,确定在空白样品中加入银标准溶液的量。要求至少设置低、中、高银含量的三组空白加标样品,且此范围包含待测生物样品中的银含量。以实验用水代替标准银溶液,按以上相同步骤制备全程序空白溶液。注:一般情况下,低、中、高组可设置为 、 、 三组。对于肝脏以及其他含银纳米颗粒的特异性靶组织,适当提高加标样品组中银含量的设定值。 标准溶液样品制备 内标溶液本标准中选择铟作为内标元素。将铟标准溶液用稀硝酸梯度稀释为内标标准工作溶液。若需配制储备液,则储备液于密封保存,个月内有效。由于不同仪器蠕动泵管内径不同,导致内标与样品溶液混
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