(高清正版)DB37_T 4009-2020 阿胶及含阿胶的食品中动物皮源性成分鉴定方法.pdf
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1、ICS 67.050 X 04 DB37 山东省地方标准 DB37/T 40092020 阿胶及含阿胶的食品中动物皮源性成分鉴定方法 Identification of animal-derived materials in Ejiao and Ejiao-containing food 2020-07-09 发布 2020-08-09 实施 山东省市场监督管理局 发 布 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由青岛海关提出、归口并组织实施。本标准起草单位:青岛海关技术中心、东阿阿胶股份有限
2、公司、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人:张晓梅、张鸿伟、张峰、周祥山、田守生、段小波、梁成珠、赵飒、凌云、艾连峰。本标准系首次发布。阿胶及含阿胶的食品中动物皮源性成分鉴定方法 1 范围 本标准规定了阿胶及含阿胶的食品中驴皮源性成分、牛皮源性成分、猪皮源性成分、马(骡)皮源性成分的液相色谱-质谱/质谱鉴定方法。本标准适用于阿胶块、阿胶糕、阿胶膏、阿胶口服液、阿胶浆、阿胶粉、阿胶颗粒等阿胶及含阿胶的食品中动物皮源性成分的鉴定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适
3、用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样经粉碎后,用1%碳酸氢铵溶液提取蛋白质,经胰蛋白酶酶解后,采用分子量截留膜过滤获取酶解肽段溶液,液相色谱-质谱/质谱测定皮源性特征肽段。4 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。4.1 阿胶 马科动物驴Equus asinus L.的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。中华人民共和国药典 2015版 一部,第189页 5 试剂与材料 除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T 6682规定的一级水。5.1 试剂 5.1.1 乙腈:色谱纯。5.1.2 甲酸:色谱纯。5.1.3 碳酸氢铵:优级纯。5.1.4 胰
4、蛋白酶:序列分析纯。5.2 溶液配制 5.2.1 1%碳酸氢氨溶液:准确称取碳酸氢铵(5.1.3)10.0 g,溶于水并稀释至 1 000 mL。5.2.2 1 mg/mL 胰蛋白酶溶液:称取 1 mg 胰蛋白酶(5.1.4),用 1%碳酸氢铵溶液(5.2.1)1 mL 溶解混匀,现用现配。5.2.3 0.1%甲酸-水溶液:取甲酸(5.1.2)1 mL,用水稀释至 1 000 mL。5.2.4 0.1%甲酸-乙腈溶液:取甲酸(5.1.2)1 mL,用乙腈(5.1.1)稀释至 1 000 mL。5.3 对照品、对照标准肽段 5.3.1 对照品:阿胶(对照药材);新阿胶(对照药材);黄明胶(对照药
5、材)。5.3.2 对照标准肽段:牛皮特征肽 A,纯度94.0%;马源寡肽 A,纯度96.0%。5.4 对照品、对照标准肽段溶液制备 5.4.1 1 mg/mL 对照品溶液:准确称取 10 mg 试样,用 1%碳酸氢铵溶液超声处理溶解,再用 1%碳酸氢铵溶液定容至 10 mL,摇匀。-20 以下避光保存,有效期 6 个月。5.4.2 对照标准肽段溶液:a)1 mg/mL 对照标准肽段储备液:准确量取 1%碳酸氢氨溶液 1 mL 溶解 1 mg 对照标准肽段,溶液浓度为 1 mg/mL。-20 以下避光保存,有效期 6 个月;b)0.01 mg/mL 对照标准肽段工作液:准确移取对照标准肽段储备液
6、(5.4.2.a)100 L 于 10 mL容量瓶中,并用 1%碳酸氢氨溶液稀释至刻度,混匀,-20 以下避光保存,有效期 3 个月。5.5 质控样品 5.5.1 质控样品:经过确证分析为相应皮源的阳性样品或阴性样品。5.5.2 报告限添加样品:a)驴皮源报告限添加样品:取经确证为阴性的样品基质 0.25 g,超声溶于 25 mL 的 1%碳酸氢铵溶液中,取 100 L 阿胶对照品溶液(5.4.1),用上述样品基质溶液定容至 1 mL,该样品溶液相当于非阿胶样品基质中含有 1%(w/w)的阿胶,作为驴皮源性的报告限添加样品;b)其他皮源报告限添加样品:取经确证为阴性的样品基质 0.25 g,超
7、声溶于 25 mL 的 1%碳酸氢铵溶液中,分别取 100 L 新阿胶、黄明胶对照品溶液(5.4.1),5 L 马源寡肽 A 标准工作液(5.4.2.b),用上述样品基质溶液定容至 1 mL,该样品溶液相当于纯阿胶样品基质中掺入1%(w/w)的新阿胶和黄明胶及 50 ng/mL 的马源寡肽 A,作为猪皮源性、牛皮源性、马(骡)皮源性的报告限添加样品。5.6 材料 5.6.1 超滤离心管:2 mL,分子量截留值 10 kDa。5.6.2 滤膜:0.22 m。6 仪器和设备 6.1 液相色谱-质谱/质谱分析仪:配有电喷雾离子源(ESI)。6.2 分析天平:感量为 0.01 g 和 0.000 01
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