SN∕T 5208-2021 短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法.pdf
《SN∕T 5208-2021 短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《SN∕T 5208-2021 短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法.pdf(124页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5208 2021短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法 Detection and Identification of Pratylenchus spp.(non-Chinese species)Filipjev,1936ICS 65.020CCS B 162021-11-22 发布 2022-06-01实施中 华 人 民 共 和 国 海 关 总 署发 布ISN/T52082021前 言本文件按照 GB/T1.12020给出的规则起草。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国北京海关、中华人民共
2、和国天津海关、中华人民共和国宁波海关、中华人民共和国广州海关。本文件主要起草人:葛建军、王旭、熊玉芬、边勇、王金成、顾建锋、赵立荣。1SN/T52082021短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法1 范围本标准规定了短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物苗木及携带土壤、植物栽培介质中的短体线虫(非中国种)检疫鉴定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T 2122 2008进出境植物及植物产品检疫抽样GB/T 24831 2009香蕉穿孔线虫
3、检疫鉴定方法3 短体线虫基本信息中文名:短体线虫属学名:Pratylenchus Filipjev,1936英文名:Root-lension nematodes分类地位:线虫门 Nematoda、侧尾腺纲 Secementea、垫刃目 Tylenchida、垫刃亚目 Tylechina、垫刃总科 Tylenchoidea、短体科 Pratylenchidae、短体亚科 Pratylenchinae。传播途径:短体线虫主要依靠带根苗木、土壤等寄主材料的调运做远距离的传播;农事操作中农机具和人员等的黏带以及灌溉和风雨运动可造成近距离扩散。短体线虫属目前共有 78 个有效种,其中咖啡短体线虫 P.c
4、offeae、穿刺短体线虫 P.penetrans、伤残短体线虫 P.vulnus、玉米短体线虫 P.zeae、艾蒿短体线虫 P.artemisiae、山药短体线虫 P.dioscoreae和异玉米短体线虫 P.parazeae 为中国已有发生的种类,其余为非中国种。其寄主范围和地理分布等相关信息参见附录 A。4 方法原理短体线虫主要在根部皮层取食,造成伤痕,引起根部组织坏死腐烂。在植物根上最明显的表现就是在所取食的细根上存在明显的病斑。病斑呈淡黄色至褐色,病斑伸长方向和根的纵轴平行。病害严重时根全部病成黄褐色。植株的根受害后可能会表现出根丛生或比正常植株的根少。从寄主植物根系及根围土壤或介质
5、中分离获得线虫后,用显微镜观察。根据线虫成虫的形态特征,结合寄主范围、地理分布和传播途径对线虫进行属种的判定。5 仪器设备和主要试剂5.1 仪器设备显微镜(100 倍以上)、体视显微镜(10 倍以上,具透射光源)、加热板、水浴锅、离心机。2SN/T520820215.2 器具自封袋、钟面皿或培养皿、载玻片、盖玻片、网筛(20 目、100 目、500 目)、烧杯(500 mL、1000 mL)、漏斗、漏斗架、乳胶管或硅胶管、止水夹、小镊子、剪刀、挑针、浅盘、线虫滤纸或卫生纸、酒精灯、干燥器、试管。5.3 主要试剂4%甲醛、指甲油、甘油、无水乙醇、石蜡、蔗糖。6 现场检疫将其主要寄主植物作为现场检
6、疫最重要的对象。注意观察植株的生长状况,重点对植物种苗的根系进行检查,注意检查是否有变褐和坏死等症状;以及寄主植物及其产品是否带土壤或栽培介质。重点选择上述可疑植物材料及土壤或栽培介质取样。如无可疑症状则按 SN/T 2122-2008 5.5 抽样。7 实验室鉴定7.1 线虫分离按照 GB/T 24831-2009 附录 A 中的方法分离线虫。7.2 体视显微镜观察分离获得的线虫样品在生物体视显微镜下观察。雌虫和雄虫均为长蠕虫形,挑取线虫制成临时玻片或永久玻片在生物显微镜下观察线虫形态。具体玻片标本制作方法参见 GB/T 24831-2009 附录 B。7.3 生物显微镜观察和测量在生物显微
7、镜下观察线虫的形态结构,对照短体线虫的主要鉴定特征进行重点观察、拍摄、测计。在线虫样品数量充足时,应观察雌、雄虫各 20 条以上。8 形态鉴定特征8.1 短体线虫属形态鉴定特征8.1.1 短体线虫属形态特征描述虫体短胖的圆柱形,长度小于 1mm。头部较宽阔,尾部钝圆。除了六沟纹短体线虫(Pratylenchus hexincisus)有 6 条刻线以外,其侧区只有 4 条刻线,其它一些种类中有极少的个体存在差异。侧尾腺口位于肛门后尾长的 1/3 处,或更后一些。头骨架骨化,有折光性。口针粗,长 14m 19m,具强壮的基部球。中食道球椭圆形,大于颈部 1/2 体宽。食道基部球向后伸展覆盖肠端,
8、通常在腹侧面与肠相交。贲门、排泄孔均明显。阴门横裂,阴道向内并略向前斜伸。前卵巢伸展,后阴子宫囊退化。通常较少发现雄虫。交合伞包裹尾部,具侧尾腺孔,位于交合伞基部附近。交合刺略成弓形。8.1.2 短体线虫属与近似属的鉴定特征比较短体线虫属与其近似属的鉴定特征比较参见附录 B和附录C。3SN/T520820218.2 短体线虫属非中国种形态特征描述 8.2.1草地短体线虫(附录 D 图 D.1)学名 Ptatylenchus pratensis(De Man,1880)Filipjev,1936雌虫 温热杀死后体略弯。侧区 4 条侧线,外部侧线锯齿状,侧带光滑无横纹,体中部侧区占体宽的 1/4。
9、唇区较高,前端略平,近圆形,唇环 3 条,第一条唇环窄于后两条唇环。头骨架发达,向体后延伸至第一条体环的后缘。头小体位于第三条体环处。口针强壮,口针基球较大,呈杯状。背食道腺开口距口针基部球末端 2.5m。中食道球卵圆形,占该处体直径的 1/2。排泄孔和食道与肠连接处几乎处于同一水平线上,半月体在排泄孔的前方,有半月小体。食道腺从腹面和侧面覆盖肠前端,长度约25m。单卵巢前伸,卵母细胞单行排列。受精囊长方形或卵圆形,内有精子。后阴子宫囊较短,长为阴门处体直径的 1.6 2.7 倍,未见细胞分化。阴道短、直。尾亚圆柱形或锥形,末端钝尖或圆。尾端具环纹,侧尾腺孔位于尾的中后部,腹面尾环 27 条。
10、雄虫 虫体比雌虫略短,体前部与雌虫相似。交合伞中等宽度,长约 35m;交合刺发达,长20m;引带长 3.3m。侧尾腺孔位于尾的中后部。8.2.2锐尾短体线虫(附录 D 图 D.2)学名 P.acuticaudatus Braasch&Decker,1989雌虫 温热杀死后虫体略弯,阴门后到尾端逐渐变细。体中部体环宽 1.0m,肛门处体环宽于体中部体环宽。唇区较低,前端平,不缢缩;2 条唇环;高 2m 宽 7m 8m。头骨架发达。口针短而强壮,口针基球前端较平。背食道腺开口距口针基部球 2m 3m。侧区 4 条侧线,体中部侧区宽 4m 5m,阴门后部侧区减小到 2.5m 3m。侧区中部的侧线在阴
11、门后到近尾端处合为一条侧线,侧尾腺模糊。中食道球卵圆形,食道腺长 42(32 50)m,腹面覆盖肠。神经环环绕于食道峡部,排泄孔位于中食道球后一个体宽,食道腺与肠连接处距头前端 85(75 95)m。半月体位于排泄孔前部。单卵巢前伸,卵母细胞单行排列。受精囊模糊,无功能。后阴子宫囊长 23(17 30)m,无细胞分化,占肛阴距 30(23 38)%。尾稍尖,尾环 20(17 26)条,透明区长 2.5m。尾端圆锥形,光滑;个别的弯曲,有凹痕。雄虫 未见。8.2.3艾伦短体线虫(附录 D 图 D.3)学名 P.alleni Ferris,1961雌虫 温热杀死后虫体呈直形。体中部体环宽 1.6m
12、。侧区侧线4条,侧线直。侧带光滑无横纹。唇区低,稍缢缩,唇环 2 条,第一唇环明显窄于第二唇环。头骨架中等发达,向体后延伸至第一体环的后缘。口针基球圆形,背食道腺开口距口针基球约 2.5m。中食道球较大,直径约占该处体宽的2/3。食道腺从腹面覆盖肠,覆盖长约25m。排泄孔在食道和肠交界处的后面。半月体约占2个体环,在排泄孔的前方。受精囊与阴门之间的距离大约为阴门处体直径的 3 倍。阴道弯曲,长约占阴门处体宽的 1/2。尾锥形。侧尾腺口位于尾的中前部。雄虫 体前部与雌虫相似,相对虫体较短。交合刺长 15m,引带长 3.8m。交合伞较宽,侧尾腺口位于尾的中部。8.2.4安第斯短体线虫(附录 D 图
13、 D.4)学名 P.andinus Lordello,Zamith et Boock,1961雌虫 温热杀死后虫体呈直线形或稍向腹面弯曲。表皮纹较细,体中部表皮纹间距为 1.8m。虫体至阴门后逐渐变细,尾端宽而光滑,近圆柱形,偶有凹痕。侧区侧线 4 条。外侧侧线呈规则的齿4SN/T52082021状,靠近尾端侧区有稀少的龟纹。唇区较低,3 条唇环较窄,略缢缩。头骨架中等骨化。口针强壮,口针基球圆形。背食道腺开口距口针基球 2m。中食道球卵圆形,较发达。食道腺腹面覆盖肠约28m 53m,长约 1.5 倍体宽。食道与肠连接处位于排泄孔前,排泄孔在半月体后,距虫体前端65m 93m。单卵巢前伸,受精
14、囊小、圆形。后阴子宫囊长 19m 34m,无细胞分化。尾亚圆柱形,末端钝圆,光滑,腹面 16 19 条尾环。雄虫未见。8.2.5棱角短体线虫(附录 D 图 D.5)学名P.angulatusSiddiqi,1994雌虫温热杀死后虫体呈直线形或略向腹面弯曲。虫体宽 12m 13m,体表环纹较细,近中部体环宽 1.2(1.1 1.3)m。侧区宽为体宽的 1/3,4 条侧线,3 条侧带中间侧带窄于外侧侧带,外侧的侧带无网状纹。唇区较低、平截。唇区与虫体间无缢缩,2 个唇环,前面的唇环有较尖锐的角,头骨化较明显,外缘延伸至虫体第一个体环。未见头小体。口针中等强壮,长 12.5(12 13)m 或为唇区
15、宽的 2.1 2.2 倍,口针两侧均等,锥体部分较细弱。口针基部球较小,圆形,宽 2.7m,高 1.6m。背食道腺开口距口针基球 2.0m 2.5m。中食道球圆到卵圆形,约10m 11m7m 8m。瓣门明显,宽 2.5m。排泄孔同食道腺与肠的连接处位于同一水平,距虫体前端 66(60 70)m。半月体位于排泄孔前面 2 个体环处。食道腺末端距虫体前端 120(108 126)m。阴门横裂,距虫体前端 292(253 310)m。阴道长为虫体宽的 2/5。卵巢较短,少量卵母细胞未伸至体中部。少数线虫的受精囊中存在精子。后阴子宫囊长约为 1 倍虫体直径,无细胞分化。直肠长为肛门处直径的 3/4。尾
16、为亚圆柱形,尾末端为圆形至圆锥形,光滑或有 1 刻痕。尾长 20(15 25)m 或为肛门处体宽的 2.8(2.7 3.0)倍,尾腹面体环为 20(17 23)条。侧尾腺口位于近尾中部。雄虫 未见。8.2.6阿劳卡短体线虫(附录 D 图 D.6)学名 P.araucensis Gladis,Wim&Wilfrida,2009雌虫 虫体弯曲,蠕虫状,两端圆锥形。体表环纹明显,虫体中部环纹宽 0.9m。侧区 4 条侧线或 3 条侧带,侧区始于 2 条侧线于第 7 个体环处,后逐渐加宽至 3 条侧线,到中食道球水平位置时即为 4 条侧线,一直延伸至侧尾腺,仅外侧侧线延伸超过侧尾腺。尾末端前体环纹较少
17、。侧区 4 条侧线间距不等,中间侧带窄于外侧侧带,在体中部侧区几乎占一半虫体宽。外侧侧带有部分连续或中断的横纹,使其呈网纹状。中间侧带光滑或有平行纵条纹。唇区与虫体连续,常在唇基部外轮廓稍有不连续。头宽为头高的 3 倍。头骨架中等骨化。唇环 2 条(第二条唇环宽于第一条),偶有一侧 2 条唇环,另一侧 3 条唇环。个别群体在扫描电镜下可见一段微小的不完全的第三条唇环。唇盘前面呈低圆锥形或平圆形。头正面观唇区与头盘完全融合,表面平而光滑。口针短而强壮,口针基球较为发达,圆到长圆形,向两侧发展。口针锥部长度等于杆部与基球长度之和。背食道腺开口位于口针基球后2.7m。中食道球卵圆形,占体宽的一半。排
18、泄孔位于食道与肠连接处前,半月体位于排泄孔前 2 个体环处。半月小体明显,位于半月体后 8 10 个体环处,个别群体不明显。食道腺较短,腹面覆盖肠。阴门位置稍靠后,阴唇发达,常突出。单卵巢前伸,长度为肛阴距的二倍,卵母细胞单行排列。受精囊卵圆形到圆形,充满精子。受精囊到阴门的长度是肛阴距的三分之一。后阴子宫囊较短,未分化,末端可见个别细胞。肛门腹面观圆形到卵圆形。50%群体的尾形为圆锥形,25%为近圆柱形,其余的尾形为圆锥形渐变成近圆柱形。尾末端形状多变,多数为圆锥形末端圆或平截,近指状,二分裂或三分裂,偶尔分裂成尖。腹面尾环数为 21(16 28),尾尖端透明光滑。扫描电镜下可见尾末端前有一
19、段不正常的体环间隔区,导致表面平铺。侧尾腺小而圆位于尾中部侧区,距尾末端1015个体环处。尾末端透明区明显。雄虫 体态与雌虫虫体相似,略小于雌虫。除 a 值外其他形态学特征数据均略小于雌虫。单个5SN/T52082021精巢前伸,不延伸至食道腺附近。精巢长 195m,交合刺肠 15m。精子圆形。引带简单,不伸出。雄虫尾尖,交合伞出现于交合刺伸缩口前,延伸至尾。交合伞边缘光滑或有细微的圆锯齿状。侧尾腺明显,位于尾中间交合伞区域或稍靠前。8.2.7阿灵顿短体线虫(附录 D 图 D.7)学名 P.arlingtoni Handoo,Carta&Skantar,2001雌 虫 虫 体 蠕 虫 状,末
20、端 变 细。唇 区 稍 缢 缩,3 条 唇 环,高 2.5m 3.0m,宽7.5m 9.0m。头架骨化延伸至 2 到 3 个体环。体前端体环宽 1.2m,尾部体环宽 0.9m。口针基球宽圆,前缘稍向前,高 2.5m 3.0m,宽 4.5m 5.0m。背食道腺开口距口针基球2m 3m。侧区由口针后侧 4 条较窄的侧线开始,到中食道球位置变宽至 5 条侧线,肠前部到阴门部分侧线为 6 8 条,阴门到侧尾腺口侧区 4 条侧线,到尾端逐渐变成 3 条甚至更少,侧区末端有时有网纹。食道腺梨形占虫体 25%或稍覆盖肠(长 93m 107m)。排泄孔位于食道腺与肠连接处前后,距虫体前端 70(48 85)m
21、。阴门略鼓起,阴道长为体宽的 70%。前生单卵巢,卵母细胞单行排列,向前延伸至肛阴距的 3 倍。虫体内卵大小为 7521m、6414m。受精囊卵圆形长 17m,内有精子(直径为 1.4m 2.2m),位于阴门前 74m 处。阴门距受精囊的距离为肛阴距的 120%。后阴子宫囊一般无细胞分化,个别的在背面可观察的细胞。侧尾腺口位于距尾末端10 15 个体环处,尾末端环纹较粗糙,尾呈圆锥形、棒状或平截,有时出现分裂状,尾形较多变。雄虫 未见。8.2.8巴蒂短体线虫(附录 D 图 D.8)学名 P.bhattii Siddiqi,Dabur&Bajaj,1991雌虫 温热杀死后虫体较直或稍弯曲。体中部
22、体环宽 1m,食道与肠连接处体环宽 1.1m。侧区占体环宽 1/4 1/3,4 条侧线,无网纹。唇区与虫体连续或略缢缩,3 条唇环。头骨架强壮,并延伸至虫体1个体环处。口针略弯,锥体长6.7m7m,口针基球较圆,宽3m,前缘较平或略凹。口针基球距虫体前端17(1618)个体环。背食道腺开口距口针基球2.5m3m。中食道球卵圆形,少数较圆,长 3.3m 3.7m,宽 2.3m 3.0m。食道腺覆盖肠 1.5 2.5 个体宽。排泄孔距体前端 68(65 73)m,位于半月体之后。半月体宽 2 4 个体环。单卵巢前伸,卵母细胞 2 行排列,繁殖区域为单行排列。受精囊一般较圆 12.511.5m,有些
23、为长卵圆形 16m11.5m,位于阴门前 37m 53m,内充满精子。阴门显著突出。后阴子宫囊长 11 22m,具有基本的卵巢细胞。尾为亚圆柱形到圆锥形,腹面尾环为 19(16m 23)个。尾端圆而光滑,侧区侧线未到达尾端,侧尾腺口位于尾中部。雄虫 口针和头骨化相对雌虫较弱,口针锥体长 6.2m 6.7m,交合刺长 15.5(13 16.5)m。引带长 3m 5m。侧尾腺口位于尾中部延伸至交合伞。8.2.9玻利维亚短体线虫(附录 D 图 D.9)学名 P.bolivianus Corbett,1983雌虫 温热杀死后,虫体较直或略向腹面弯曲,常 180扭曲,阴门后到尾端逐渐变细。侧区 4条侧线
24、,外部的侧带窄于中间侧带,有网纹,虫体中部中间侧带有倾斜的线纹。4 条侧线延伸至侧尾腺口,侧尾腺口距虫体末端 10 15 个体环处。唇区 3 条唇环,少数 4 条唇环。头区大块骨化延伸至虫体至少 2 个体环。口针强壮,口针基球较圆,背食道腺开口距口针基球 2.7m 4.0m。中食道球为卵圆形,较发达。食道腺腹面覆盖肠,覆盖长度为 18m 49m(1 2 个体宽)。食道腺与肠连接处位于排泄孔后,排泄孔距虫体前端 89m 105m。前生单卵巢,受精囊不明显,且无功能。后阴子宫囊长 22m 31m,约 1.25 个体宽。尾呈圆柱形较直,略向背面凸起,向腹面凹陷。腹面 15 19 个规则的体环,偶尔为
25、 24 个。尾末端圆而光滑。6SN/T52082021雄虫 未见。8.2.10短尾短体线虫(附录 D 图 D.10)学名 P.brachyurus(Godfrey,1929)Filipjev&Schuurmans Stekhoven,1941雌虫 唇区缢缩,前缘有棱角。2 条唇环,扫描电镜中有个别 3 条唇环。头骨架强壮。体中部侧区 4 条侧线,阴门部位分为 5 到 6 条侧线,近尾部为 2 条。口针强壮,口针基球较圆。排泄孔位于半月体后,距虫体前端 57m 108m,通常与食道腺与肠连接处处于同一水平位置。食道腺腹面覆盖肠。卵巢延伸,偶尔回折。卵母细胞单行排列,偶尔双行。阴门在虫体的 82
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- SNT 5208-2021 短体线虫非中国种检疫鉴定方法 SN 5208 2021 线虫 中国 检疫 鉴定 方法
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【clo****rst】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【clo****rst】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。