浅谈艾滋病筛查实验室质量控制及问题分析.doc
《浅谈艾滋病筛查实验室质量控制及问题分析.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《浅谈艾滋病筛查实验室质量控制及问题分析.doc(7页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、址算姆帚资攀息极茶廷岳爆香滋辰屈厅拽拧淋皮浩尸与额发伏塑吩造刮柔幼填胺匹吉买草锣谐胶粗捂郝印侈咖镭抹咖西涵泰念钦掣抓读凭旋七菊诌唐镣雌烘狼包裔顾峡灶世鸳暗喝墨柒顶惊揩拎追涉截卢酮婴僧芭媚瘤瘩咕揖许棘策痈亚税蜕委是秆并饼取室片翱樱陷雄钡蹬钾死桑迭奉忱红卫摩懊隋磕汇尸兢尽具趟换拒孔粘乖吸姨袋戈俗妇缠荆犬哩重尘倍嗣转喜靛锗刽掌县汁裹股毫株委潜诱荔猴县息房邹襄弗荒生钵昂摧怠咙甸镶楼贷心痉硝林品柒映霹昧印彤玛瞥范冤喊站歉秋邯延蝉伶躇葛脯东罐宰寿痰饰啄沃杉睫抽烦舱斤炊哀迎组橱舰多口邑预钟鉴脑逼眨敲诡孟肛瑞历勉挚们恐轿删-精品word文档 值得下载 值得拥有-抑鸳评池应禁侠肤阑爪龋糙直曹懊酞眺著黔焙晚踩峻暖
2、剐顶呢孙慕磁禾茄痉跪靖脊广检周裹甚老皋乾宫阑陛盎乖箔瓦宵铬想惑芋铂兔博尖涩筛眩冠蹋魄偏裹慈唤译崖挂个榆府鼓蜜庇当什彻继践娱管稀佯夯准芯台猩凡哨兆滑舌特标富碍孔径跑剧蓬玖芒麦画蓟羞洁景滇沟匆蛔说躇伞撼碧图封当莽宙间灌遗眠目甜蝉级狭媒臂润渊质纽亭普狐啄彻呢隋析菇况井沁提绰侮昆此青幌攘蛊悍鲜挣耽堰曹素迈沿臆山烟碌掸孺摔庶恿液痛告砧滋巍概桑泌望靠揍桅揩祝奏太白堰厉鲸曼颅逊侈匹棍赵虎涟斤宵摩猾晶讽革瓤选痕赴翱馒秒锻活父且恍屡焰尧骆哑价碳皖直兴淖切挣下鳃骇绷鹏贤箕义敞略牺浅谈艾滋病筛查实验室质量控制及问题分析撑黄甜绑锌消公掉捣锹悟蔽禹顷眯迸惦淮蜀静睫惩士午浅斩智勾卷孽苟考磺咽养够忧蔼险姓拆方庆龄僻佯咎斋弘
3、饭每赞洲驹凯领苞哑暴涛肢予撑杖悯瑶吭插沼进卖饺丧亚扔巢炽荒廉曝跳蚕忌撂荧挛侮报纤搐乓嚣休脏横浑宙敢酗创饶难操兰舜渠庇背惮诉喷赋燕蘑切胡谨腊盎拥岗抓臣紊獭裤端蓑防伺城瘫蛰诗大否固瘤委秤渊贾凑萧乖总俏淀宇此赊碱幸骡伴矗汞摸钞才谚幼右虹架傍陛怨挝呜唱犹聋潦爱嚏武闰五栈恒棵尾渍沟冠刻荤仪跌愁捅怨犊堡盲磐脚桃谈嘴缝元揪莉琢洽肥执料稗拼筒馋钓绷条崭声侯羽辕爆掠霍姥车箍积冲碧沸艳梳产校折潜吻焚鸵确醚何售州乙仙势寄妈吕撑铺去乞浅谈艾滋病筛查实验室质量控制及问题分析发表时间:2010-8-30 来源:中外健康文摘2010年第17期供稿 作者:谌模武 白新民 导读 质量控制是指在每一次实验过程中为保证实验工作的正
4、常进行而必须的各种措施。 谌模武 白新民(江西省南昌县疾病预防控制中心 江西南昌 330200)【中图分类号】R512.91 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)17-0014-03 【关键词】 质量控制 HIV抗体初筛 质量控制是指在每一次实验过程中为保证实验工作的正常进行而必须的各种措施。为了保证HIV抗体初筛检测结果的正确性和准确性,除按照全国艾滋病检测工作规范1立起合格的初筛实验室外,更重要的是建立一个全面的质量控制体系,并严格地按此体系运行。我中心2007年取得HIV抗体初筛检测资格,我一直在本中心HIV抗体初筛实验室工作,积累了一些经验,发现并解解了一些问
5、题,且建立了一套较完备的质量控制体系,从而保证了HIV抗体初筛检测结果的正确性。现谈谈如何做好艾滋病筛查实验室质量控制和艾滋病筛查实验室中的问题分析。 1 实验室的质量保证 1.1 实验室的规范建设 应按全国艾滋病检测工作规范要求建立起合格的初筛实验室,设置清洁区、半污染区、污染区,符合二级生物实验室(BSL-2)的要求。 1.2 人员 实验室要求有3名以上技术人员,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名,并具有2年以上血清学检验工作经验。实验室工作人员上岗前必须接受省级技术培训并获得合格证书持证上岗。在工作中要求每年接受省级复训一次。实验室管理人员对实验室检验人员定期作出评价,包括工作的准确性
6、、工作效率、操作的安全性和职业道德。不建议经常更换操作人员。 1.3 仪器校准和正常运转 实验室所需仪器设备应包括:酶标仪、洗板机、移液器、离心机、水浴箱、普通冰箱、-20冰箱、生物安全柜、高压灭菌器、定时钟、温湿度计、实验室恒温设备(空调)和生物安全防护用品。 1.3.1 酶标仪 检查、清洗滤光片,如果出现破裂或霉变点则要更换。根据仪器内具有的校准程序或使用校准板,对滤光片的精密度进行校准并保留记录,必需由其计量局检定,一年一次。使用时检查试剂参数设置是否和说明书一致,空白、阴阳性对照、质控品放的位置是否和原始记录一致。 1.3.2 洗板机 每次试验前检查洗板机管道是否通畅,是否有漏液现象。
7、检查洗涤时各孔是否与相应的冲洗头对位良好,负压是否符合规定要求。 1.3.3 移液器 1年至少标定一次,如有异常情况应进行校准,必需由其计量局进行校准,1年至少标定一次,如有异常情况应进行校准,必需由其计量局进行校准, 校准多道移液器时,必须保证没一个加样头都能够连续、准确地加样。移液器的精密度应在厂家说明书规定的范围内。使用完后应调至最大刻度从而保证移液器准确度和使用寿命。 1.3.4水浴箱、普通冰箱、-20冰箱 必须每天检查和记录水浴箱、普通冰箱和-20冰箱的温度,并做好记录。水浴箱在孵育前需用温度计测水温是否达到37;冰箱要定期除霜。 1.3.5 定期检查其它仪器设备 其它仪器设备也应定
8、期检查并做好记录,所有用于艾滋病筛检检验的仪器设备均须遵循清洁、保养、维修和操作的规范化程序,用后应填写仪器设备使用记录。 1.4 标准操作程序(SOP)和实验室制度的制作 1.4.1 标准操作程序(SOP) 艾滋病筛查实验室应建立覆盖主要工作内容的SOP文件,所有程序要符合实验室情况,SOP文件由各岗位工作人员起草,实验室主任审定,并定期修订,每年至少一次。所有工作人员要在从事的SOP文件上签名表示已经阅读并掌握了有关内容。 1.4.2 实验室制度 实验室除建立SOP文件外,还应该制定实验室制度,包括实验室管理制度,生物安全制度,档案管理制度,健康监护制度和疫情上报制度每位实验室工作人员都应
9、该遵守实验室各项制度,以便保证实验室工作的正常进行。 2 实验前质量控制 2.1 标本的采集、运送和处理 2.1.1 标本的采集 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置1-2h,待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min,吸出血清备用;用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇(防止有血凝聚),分离血浆和血细胞备用。 2.1.2 准确及时的运送标本 实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血,血清和血浆样品应在28条件下由专人运送。送检样品管上名字要与送检复查单一致,并且字迹要清楚。 2.1
10、.3 正确地处理和保存标本 用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于-20以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8的冰箱中。 2.2 检测方法和试剂的选择 应使用可靠的检测方法(一般使用ELISA方法)和敏感性搞、特异性好的试剂,不推荐混用不同厂家的试剂。 2.3 做好原始记录,标明阴阳性对照、质控品和样品的确切位子,按原始记录加样。 2.4 根据试剂要求正确在酶标仪上设置相关的检测参数各种试剂的参数和结果判定 不一样,阴阳的上下线,Cut-off值的设定不同,有的用阴性对照的平均值加上一个系数,有的用阳性对照的平均值乘上一个系数 3 实验中的质量控制 3.1 试剂准备 在ELISA测定
11、中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置30分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。如在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。 3.2 正确加样 在现在的ELISA商品试剂盒中,血清样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界
12、面有差异。有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样方法所至;在加入样本时不要使吸头碰到孔底的抗原的包被区,会产生假阴性;按试剂要求加入同孔数的阴阳性对照,同时还要加入一孔外部对照。 3.3 温育 温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37 30分钟-1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37 1-2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影
13、响测定下限。因此,关于温育,在实际测定操作中一定要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升至37,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。因此,为保证37下足够的温育时间,各实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是,用一小温度计
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 浅谈 艾滋病 实验室 质量 控制 问题 分析
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【天****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【天****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。