金黄色葡萄球菌.ppt
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1、金黄色葡萄球菌1 1一金黄色葡萄球菌的生物学特性1、形态与染色:(staphylococcusaureus)典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8m左右,显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜。革兰氏染色阳性。2 2金黄色葡萄球菌的显微照片典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8m左右,显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜3 3金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片金黄色葡萄球菌的透射电镜照片4 42、培养特性:金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37C,最适生长pH7.4。平
2、板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10-15%NaCl肉汤中生长。5 53、生化特性:可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。6 6二金黄色葡萄球菌的抗原构造和分型型对分型进行简单的了解、血清学分型:金葡水解,获得两种抗原成分:蛋白抗原和多糖抗原。蛋白抗原是凝集抗原,无特异性。多糖抗原有特异性。绝大多数金葡含有A型抗原,B型抗原主要存在于凝固酶
3、阴性菌株,C型抗原在致病性和非致病性菌株中都存在。、噬菌体分型:、根据肠毒素分型:、根据血浆凝固酶分型:7 7三金黄色葡萄球菌的致病性三金黄色葡萄球菌的致病性金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶:a.溶血毒素:外毒素,分、四种,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死;b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞;c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球
4、菌形成的感染易局部化与此酶有关;d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温,可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌;e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素,分为A、B、C、D、E及F五种血清型。当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品,如牛奶和奶制品、肉、蛋等,在温度条件适宜时,经8-10小时即可相当数量的肠毒素。肠毒素可耐受100C煮沸30分钟而不被破坏,它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。此外,金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。8 82024/5/8 2024/5/8 周三周三9 9四金黄色葡萄球菌的流行病学四金黄色
5、葡萄球菌的流行病学金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。作为人和动物的常见病原菌,其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上,50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而,食品受其污染的机会很多。近年来,美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点:季节分布,多见于春夏季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%,所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。一般说,金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食
6、品:食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠毒素,引起食物中毒;熟食制品包装不严,运输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其他部位的污染。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占45%,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。肠毒素形成条件:存放温度,在37C内,温度越高,产毒时间越短;存放地点,通风不良氧分压低易形成肠毒素;食物种类,含蛋白质丰富,水分多,同时含一定量淀粉的食物,肠毒素易生成。1010五金黄色葡萄球菌的检验五
7、金黄色葡萄球菌的检验我们以SN标准中的最近似值(MPN)测定法来进行讲解:这种方法适用于检测认为带有大量竞争菌的食品及其原料和未经处理的食品中的少量金黄色葡萄球菌。1、样品制备:固体或半固体食品:以无菌操作称取25g样品,放入装有225mL灭菌生理盐水的灭菌均质杯内,于8000r/min均质12min,制成1:10样品匀液。液体食品:用灭菌吸管吸取25mL样品,放入装有225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠),经充分振摇制成1:10样品匀液。供计数检验时,可按十进位递增稀释法将样品匀液再进行适当稀释。2、选三个连续稀释度,从每个稀释度分别取1mL稀释样品液,接种3管含1
8、0氯化钠why?胰蛋白胨大豆肉汤。样品的最高稀释度必须达到能获得阴性终点,置361培养48h。3、用3mm接种环,从有细菌生长的各管中移取1环,划线接种于表面干燥的Baird-Parker琼脂平板,置361培养4548h。4、从有细菌生长的每一平板上至少挑取1个可疑金黄色葡萄球菌菌落,移种到肉汤培养基中,置361培养2024h。5、取肉汤培养物0.3mL同0.5mL凝固酶试验兔血浆于8mm100mm试管内充分混合,置361培养,定时观察是否有凝块形成,至少观察6h,以内容物完全凝固,使试管倒置或倾斜时不流动者为阳性。试验中需同时做巳知阳性和阴性对照。对可疑结果,应进行革兰氏染色、镜检和其他辅助
9、试验如耐热核酸酶试验等加以证实。6、报告结果:根据凝固酶试验结果查最近似值(MPN)表,报告金黄色葡萄球菌的MPN/g(mL)。1111SN标准中的最近似值(MPN)测定法这种方法适用于检测认为带有大量竞争菌的食品及其原料和未经处理的食品中的少量金黄色葡萄球菌。1、样品制备:固体或半固体食品:以无菌操作称取25g样品,放入装有225mL灭菌生理盐水的灭菌均质杯内,于8000r/min均质12min,制成1:10样品匀液。液体食品:用灭菌吸管吸取25mL样品,放入装有225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠),经充分振摇制成1:10样品匀液。供计数检验时,可按十进位递增稀释
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