染料结构剖析.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,染料的结构剖析,剖析的任务,1.,天然物（染料）结构测定,2.,商品染料结构的测定扬锦宗,3.,科研，生产中分析控制测定,参考书：,1.,扬锦宗 染料的分析与剖析 化学工业出,出版社,1987,2.,赵德峰 精细化学品结构剖析 大连理工大学,出版社,1988,3.K.Venkatarraman The Analytical Chemistry of Synthetic Dyes 1977,第一章 导论,1.,染料剖析与染料工业发展史,（,1,）,.,天然物结构剖析,苜蓿做为蕃茄的绿肥。可获高产,但并不是,N,P,K,等的做用,酒精溶解,有机溶剂萃取,元素分析,分子式定为,CH3(CH2)28CH2OH,一克可用于,1500,亩地。,（,2,）第一个天然染料 品红,1856,年剖析，,1859,年就建厂生产 结构如下：,第二个天然染料,茜素,第三个天然染料,靛蓝,（,3,）商品染料的结构剖析,1956,年活性染料问世，经剖析我国于,1958,年开始就有三套,系统上线生产,Procion,;,Remazol,;,Cibacron,，,同时分析出：,对于乙基砜硫酸酯染料在任何,pH,值下，都有三个组份：,D-SO,2,CH,2,CH,2,OSO,3,HD-SO,2,CH=CH,2,D-SO,2,CH,2,CH,2,OH,商品染料,去除助剂,着色物上染料,溶剂萃取,分离、精制,类别鉴定,结构鉴定,结构降解、制备衍生物，分离、精制，结构鉴定,合成验证,(4).,染料剖析的过程,染料剖析的具体程序,1.,单一性鉴定采用纸色谱或薄层色谱纸色谱,水溶性染料（酸性，活性，直接等）薄层色谱,非水溶性染料（分散等）一般须选用,2-3,种展开剂（酸性，碱性，中性）,2.,分类试验,3.,全分析：对精制后的纯样品进行全面分析测定：紫外可见吸收光谱，红外吸收光谱，核磁共振波谱，质谱和色谱等。,3.,文献查阅,4.,元素定量分析,5.,官能团定量分析,6.,结构降解,7.,降解产物的分离和鉴定,8.,合成验证,第二章 色谱,1.,色谱的由来色谱这一术语是跟据“,Chromatography”,一词反译而来由俄国植物学家茨维特（,Tsvet,),于,1930,年首创第二章,.,色谱的分类,1.,按分离的原理分类：,1.1.,吸附色谱,1.2.,分配色谱,1.3.,离子交换色谱,1.4.,凝胶色谱,1.5.,亲和色谱,2.,按两相的物态分类,2.1.,液相色谱法,2.2.,气相色谱法,一 纸色谱,溶剂前沿,起始线（,23mm,）,斑点的直径,23,毫米,样点与样点间距,1.5,厘米,纸色谱的基本原理,分配色谱,固定相,吸附在滤纸上的水,移动相,展开剂,样品在水和展开剂中的溶解度不同，故分配不同而达到分离。,试教：碘从水中萃取到,CCl,4,中去。,分配系数,K,物质在两相中的浓度的比值，,K,与温度压力有关。,把,K,应用到纸色谱中,S1,，,S2,为要分离的,两种物质,因此，要分离两种物质时，两物质的,K,值必须有差别才行。,二,.,比移植（,R,f,),及其应用,因此,R,f,是,1,，在,01,之间，对,于要分离的物质的,R,f,，,最理想的,是,0.50.85,1.,影响比移值,R,f,的因素,1,）,.,分配系数的影响,一个化合物的分配系数大，,R,f,小；分配系数小，,R,f,大。,如果斑点跑到层析纸前沿，换展开剂时应使化合物的溶解度小一点。,例：,K,R,f,丁醇,醋酸,水（,415,）,42.3 0.37,9.5 0.65,3.2 0.78,2,）,.,化合物分子结构的影响（极性大小的影响）,如上例，随着,C,链的增长，极性减小。,再如：,都带有相同的极性基团,COOH,，但,CH,2,个数不同，草酸的极性最大，,R,f,最小。,表二：二羧酸,R,M,值与,C,原子个数的关系,R,M,C,原子个数,展开剂,.,丙醇,氨水（,8,2,）,.,丙醇,氨水（,6,4,成线性关系的还只限于局限于结构较简单的化合物，对染料的,复杂结构则比较复杂。,关于极性的例子,碱性 酸性,正丙醇,氨水（,21,）正丁醇,2.5,摩尔,/,升,HCl,=41,）,0.90 0.69,0.59 0.46,0.61 0.41,0.25 0.18,3,）氢键的影响,被分离的物质与固定相或移动相形成氢键，对,R,f,的影响较大。,例：,正丙醇,氨水 丁醇,HCl,0.68 0.52,0.45 0.37,0.62 0.37,0.37 0.25,I,II,III,IV,正丙 醇,5%NaHCO,3,=21),分别为异构体在 邻位有,SO,3,H,存在，因空间障碍，使得,NH,2,不易与展,开剂中的,H,2,O,形成氢键，故,R,f,大；,比,多一个,O,，,可能也形成氢键，所以,的,R,f,比,小。,4,）溶剂性质的影响,同一个化合物在不同的展开剂中的,Rf,值是不同的。,表：对氨基苯甲酸的分离，斑点的数不同，有的得一个斑点，有的,得两个斑点，因为展开剂丁醇,25%HCl,水（,100152,）中的,HCl,可能与,-NH,2,形成盐酸盐，另外化合物可能形成内盐。,总之，得到两个斑点不一定不是一种物质。,要鉴定一个物质是不是单一的，不能用一种展开剂就能定论，一般,应用碱性、酸性、中性展开剂试验。,丁醇,醋酸,水 丁醇,吡啶,水,（,415,）（,311,）,0.26 0.44,0.75 0.71,0.32 0.46,0.72 0.69,苯基化后极性减小，,R,f,增大。,5,）滤纸对染料的吸附性的影响,综合举例：,氨基萘磺酸的异构体,12,，,13,，,14,，,15,，,16,0.8,0.6,0.4,0.2,R,f,偶极矩,R,f,0.2,0.4,0.6,0.8,12 13 14 15 16 17,2.,影响比移值（,R,f,）,重复性的因素,1,）温度的影响,温度变化后，样品在两相中的溶解度是否变化。,例：,正丁醇,甲酸,水,=1532,20 4043,0.43 0.41,0.27 0.31,展开剂中各物质互溶性在温度变化中，变化不大，但被分离物质在温度变化下，在展开剂中的溶解度有些变化。,b.,展开剂中各物质的互溶性随温度的变化而变化较大,展开剂：三甲基吡啶用水饱和。,1015 20 25,有机相,水相 有机相,水 有机相,水相,41778 54934 5933,甘氨酸,0.25 0.06 0.05,丙氨酸,0.32 0.10,0.10,c.,展开集中组分的沸点低，易挥发的影响,2,）滤纸的影响,纸的本身结构紧密，含水分就较少，上升的速度慢,纸的本身结构松散，含水分就较多，上升的速度快,3,）起始线和展开剂表面的距离,距离大，移动相少。,4,）层析缸内展开剂蒸汽饱和度,不饱和时，上移的展开剂就挥发，就降低了展开的速度。,5,）展开剂的“老化”程度,a.,时间长了，各组分的比例变了。,b.,丁醇,醋酸,水 时间长，醇与酸发生酯化，（有人指出，配,好后，放两个星期后，即酯化完成后再用）。,R,f,值的用途,1,）观察各组分的相对位置；如：一个是,0.1,，一个是,0.2,2,）作为一种纪录的手段；,3,）与前人工作的结果进行比较。,例：,丁醇,:,乙醇,:,水 丁醇,:2.5N,HCl,正丙醇,:5%NaHCO,3,211 41 21,对,0.22 0.16 0.47,间,0.29 0.16 0.53,邻,0.41 0.35 0.67,要分离对、间、邻时可用第三种。,2%HCl,丁醇,2.5N,HCl,0.85 0.63,0.85 0.09,三,.,展开方法,a.,上升法（最常用）,特点：设备简单，操作方便，,缺点：展开剂借毛细管作上爬，爬到一定高度就爬不动了，,最后使斑点扩散。,上升法适用于不用很长时间就能分开的物质。,b.,下行法 适用于,R,f,值很低的组分的分离,缺点：操作烦一点,优点：由于重力与毛细管作用重合，斑点时间长了不扩散。,c.,两向法,滤纸应是方的改变方向后，可换展开剂，也可用同一种展,开剂。氨基酸用两向法可分出,19,种,d.,径向法（也叫圆形色谱）,展开的速度快，缺点是,R,f,值不确定。,e.,重复展开,四,.,展开剂的选择,因在纸色谱中，固定相是水，因此纸色谱主要适用于水溶性物质。,1.,对展开剂的要求,a.,纯度,如氯仿（药用的氯仿中常含有,2,的乙醇作稳定剂）药用酒精常含有含量,75,一般要求化学纯,如 丁醇,DMF,水,=11 3 11,，刚好是一个互溶体。,b.,所用的展开剂与被分离的物质发生化学反应,如：吡啶就比较活泼，容易与二氯三嗪生成络合物，这会使活性染料分成几个点。,c.,使用过程中变化要小（主要是挥发性），时间长了比例就变了，如：丙酮,丁醇中丙酮易挥发。,d.,毒性要小，易从色层纸上除去，成本要低。,2.,怎样选展开剂,A,选用的展开剂的极性与被分离的物质的极性不要相差太大。,在多元体系中,丁醇,DMF,水,=11 3 11,丁醇,吡啶,水,=1 1.3 1,丁醇,醋酸,水,=4 1 5,丁醇与水是不互溶的，中间物质的作用,与丁醇与水不互溶，,调节,PH,值，,阻止纸与分离物质的相互吸引。,介绍常用的展开剂,胺类化合物（芳胺）,S,1,正丁醇,醋酸,水,=4 1 5,（上层）万能展开剂,S,2,丁醇,浓盐酸（或,2.5N,HCl,）,=4 1l,S,3,丁醇,己醇,水,=2 1 1,S,4,正丙醇,氨水（浓）,=2 1,S,5,正丙醇,5%NaHCO,3,水溶液,=2 1,（把析出的,NaHCO,3,过滤掉）,直接性很高的染料,丁醇,吡啶,水,=0.5 1,1,活性染料（可指活性的与水解的分开）,丁醇,DMF,水,=11 3 1,丁醇,DMF,水,醋酸,=10 3 11 2,所用的大多为伯醇，易与纤维生成氢键，这样就与被分离物质发,生竞争，使被分离物就较少的与纤维结合。,五,.,展开斑点的特异形状,1.,拖尾：可能试样溶解的不好，太浓，分配系数不同；,2.,紧跟前沿：在展开剂中的溶解度太大；,3.,重叠：含无机盐太多，如,Sn,+4,、,Na+,、,Cl,-,太多；,4.,与标准样位置不一致：点样的介质是否相同，如：游离芳胺与,其盐酸盐就不一样。,六,.,显色方法,许多中间体是无色的，需要显色,注意事项：,1.,斑点物质在显色剂中溶解度要小；,如：,用,与其偶合生产染料。,用,+,乙醇或,+,水,+,NaOH,的水溶液在显色时,生成物的水溶性较大，就溶解了。,1.,碘蒸汽熏：几乎与所有的有机物生成黄色或棕色的斑点，但不是发生化学反应，一旦离开碘蒸汽，斑点就消失，纸色层与薄层色谱都可用。或用,1%,乙醇或,0.5%,氯仿的碘溶液。,2.,荧光法：在紫外灯下（,254,、,365nm,）,下发生荧光。,苯系：,有荧光，而,则没有荧光。,有很弱的荧光。,萘系：,都有较强的荧光。,J,酸,荧光为蓝紫色,R,酸,荧光为浅蓝色,吐氏酸,荧光为红紫色,N,W,酸,荧光为暗蓝色,蒽醌磺酸,1-,蒽醌磺酸 黄荧光,2-,蒽醌磺酸 蓝绿色,1,6,二蒽醌磺酸 黄绿色,硝基化合物,能消灭荧光，（在紫外灯下是棕黑色的点）,黄曲霉素,B,1,（,致癌）有蓝紫荧光。,3.,高锰酸钾氧化法（用,1%,的高锰酸钾溶液，,2%Na,2,CO,3,或,0.3N,H,2,SO,4,酸，只适用于薄层色谱）适用于糖类，醇类。,结果是红颜色的底上有黄色的点，（高锰酸钾消耗后红色褪去）,4.,指示剂法,酸碱物质都可用指示剂,例：溴甲酸绿,PH=3.85.4,由 黄 蓝,（一般,0.03%,溴甲酸绿的乙醇或甲醇溶液，再加几滴稀,NaOH,，,以,保持指示剂为蓝色，用后得到蓝纸黄斑点）。,用时应把展开剂赶净，房间内算起不能有。,混合指示剂（为了缩短,PH,范围，提高灵敏度）,甲基橙,PH 3.1,红,4.4,黄,加入蓝色染料 红蓝 橙蓝 黄蓝,紫 灰 绿,应注意加入蓝色染料，本身对,PH,不应太敏感。,再如：,5.,硝酸银法（也是氧化剂）,5%AgNO,3,+10%NH,4,OH,适用于有还原性物质，生成棕黑色斑点。,如：活性基的,就可用硝酸银显色。,6.,化学特性反应（官能团反应时再讲）,7.,无机、金属离子的显色,Ni,、,Co,、,Cu,、,Fe,的氯化物展开，（丙酮,6N,HCl,=19 1,）,R,f,关系,Ni,Co,Cu,Fe,显色剂用红氨酸显色，,Ni,（,蓝）,Co,（,黄棕）,Cu,（,橄榄绿）,氨基指示剂,对二甲氨基苯甲醛,（埃利希试剂）,配制：,一克样品,+95ml,乙醇,+5ml,HCl,可与芳胺反应生成希夫氏碱,一个,NH,2,显黄色，两个,NH,2,，,间位显橙色，对位显红色。灵敏度,0.21mg,。,纸色谱展开剂,各类染料应用举例,酸性染料,酸性染料常含有一个或几个磺酸基，使强极性化合物，当用没,有预处理的纸时，常用极性较大的酸性展开剂水溶液。,正丁醇,醋酸,水,=2 1 5,（,1 1,1,）,醋酸,浓盐酸,水,=200 1 30,2%,盐酸,25%,乙醇,25%,氨水,=1 1,正丁醇,吡啶,水,=3 1,1,直接染料,直接染料对纸的直接性较大，拖尾长，一般用于处理纸或选择适,当的展开剂，效果较好。,纸用,7.5mL,甲酰胺和,142.5mL,乙醇预处理，或用正十六醇，,2%,乙醇处理。,展开剂：乙酸乙酯,吡啶,水,=3 4 3,正戊醇,吡啶,25%,氨水,=1 1.3 1,正丁醇,吡啶,25%,氨水,=2 1 2,正丁醇,乙醇,水,=3 1,1,正丁醇,浓氨水,=2 1,正丁醇,吡啶,水,=5 3,活性染料,活性染料分子结构中含有极性很强的水溶性基团，所以应当选择,极性较强的展开剂。另一方面，因为染料的结构上带有可以被碱剂,反应的基团，因此尽量避免采用碱性强的展开剂。,正丁醇,醋酸,水,=2 1 5,；,4 1 5,；,16 4 1,；,16 14 9,丁醇,DMF,水,冰醋酸,=10 3 11 2,正丙醇,醋酸,水,=5 2 3,正丁醇,水,DMF=11 11 3,正丁醇,吡啶,水,氨水,=4 5 4 1,分散染料,分散染料不溶于水，所以采用逆相层析比较好，即用,溴代萘浸纸（,溴代萘,10%,甲醇或丙酮液）用含水的极性溶剂作展开剂。所得斑点集中，呈圆形。,溴萘,/6080%,乙醇；,溴萘,/6080%,乙酸,溴萘,/6080%,吡啶,水,=1 3,（偶氮型）,甲酸,乙酸,水,=9 9 2,甲酸,水,醋酸,=14 20 1,（,8 1,1,）,分散染料,丁醇,醋酸,水,=4 1 5,（上层液）,环己烷,甲酸,水,=4 3 1,（上层液）,苯,环己烷,甲酸,=1 1,1,石油醚（,90%,）,乙酸乙酯,=2 1,丁醇,HCl,=4 1,阳离子染料,在碱性介质中进行色层分离是有利的。,2.5%,月桂醇溶液浸纸 甲醇,氨水,=1 1,乙醇,氨水,=1 1,乙醇,1N,盐酸,=1 1,甲醇,醋酸,水,=2 1,1,（,4 2 1,）,甲醇,氨水,水,=63 40 77,乙酸乙酯,石油醚,吡啶,氨水,水（各种配比）,金属络合染料,金属络合物易溶于水、酸、醇及吡啶等极性溶剂中，而不溶于有机溶剂中。,12%,吡啶,正丁醇,吡啶,水,=5 3 5,（,3 1,1,）,醋酸乙酯,醋酸丁酯,醋酸,水,=1 7 2 4,60%,醋酸（分离,1 1,的金属络合染料）,60%,醋酸（用乙酰化纸分离,2 1,金属络合染料）,正丁醇,醋酸,水,=2 1 5,2%HCl,可溶性还原性染料,25%,氨水,甲醇,水,=1 2 3,吡啶,异戊醇,25%,氨水,=1.3 1,1,甲醇,醋酸,水,=4 1,1,可溶性硫化染料,吡啶,正丁醇,水,=2 1,1,（,3 1,1,）,吡啶,醋酸乙酯,=1 1,（,2 1,）,吡啶,苯,醋酸乙酯,=2 2 1,还原染料,还原染料纸上层析分离一般都是将染料转变为隐色体，然后进行,展开。,保险粉,水,4N,NaOH,吡啶,=10g 80 10 10,（,在氮气保护下）,一种简单的还原染料上层析方法，所用展开剂新鲜配制。,蒸馏水,32mL,土耳其红油（,1%,溶液）,48mL,35%NaOH 4mL,保险粉（工业品）,4g,吡啶,16mL,二,.,薄层色谱,2.1,概述,薄层色谱简写作,TLC,（,Thin Layer Chromatography),它是在吸附色谱的基础上发展起来的。,薄层色谱与纸色谱同为平床色谱，但它与后者相比有以下优点：,（,1,）分离迅速，一般分离仅需,1560min,，,而纸色谱一般 要几小时或更多时间；,（,2,）分离效率高，可使性质类似的化合物，如同系物异 构体等得到分离；分离效率比纸色谱高，其有效塔板数（,N/L,）,要比柱层析高,10100,倍。,（,3,）灵敏度高，一般比纸色谱高,10100,倍，检出灵敏度有时可达,0.01g,的物质；,（,4,）可用腐蚀性显色剂显色，：硫酸等，还可以在高温下烘烤；,（,5,）用作制备及定量分析，比纸色谱方便，而且有效。,2.2,基本原理,薄层色谱的原理与柱色谱及纸色谱的基本原理相同，包括有吸附、分配、离子交换、透析等作用，既有物理作用，兼有某些化学作用，并不是一种单一的机制。但对不同的色谱方法来说，总有一种占主要地位；移动相是液体，固定相是固体时，吸附和解吸附占主要地位；移动相和固定相都是液体的薄层色谱，则分配规律占主导地位。,吸附剂,（,1,）比表面积大，一般是内部多孔的细颗粒状固体物质；,（,2,）具有吸附的可逆性，即物质吸附后又容易用溶剂把它从表面解析下来；,（,3,）具有一定的机械强度和化学稳定性，在展开剂中不溶解，对被分离物质不起破坏或分解作用；,（,4,）为了便于观察层析结果，一般是白色固体。,我国青岛海洋化工厂及浙江黄岩化工厂均生产有薄层色谱用硅胶。以青岛的产品为例，其规格如下：,硅胶,G,（,含石膏,13%,）；,硅胶,GF,254,（,含石膏,13%,及荧光剂）,硅胶,GF,365,(,含石膏,13%,及荧光剂）,硅胶,H,（,不含粘合剂和荧光剂）,硅胶,HF,254,(,不含粘合剂，含荧光剂）,硅胶,HF,365,（,不含粘合剂，含荧光剂）。,荧光剂有两种，在,254nm,紫外光下能发出绿色荧光的是,3%,锰激活的硅酸锌（,ZnSiO,4,Mn),；,层析后在绿色荧光底上样品呈,暗紫色斑点。激发波长为,365nm,的是用银激活的硫化锌、硫化镉,（,ZnS,、,CdSAg,）,铺层（湿法和干法）,湿法铺层条件及方法,类别,吸附剂,水,粘合剂,活化,硅胶,G,硅胶,H,氧化铝,G,氧化铝,-,淀粉,硅胶,硅胶,-,淀粉,硅藻土,纤维素,聚酰胺,123,1 23,1 2,1 2,1 2,1 2,1 2,1 5,溶于,5%,甲酸，,加,70%,乙醇,不加,加,不加,不加,加,0.7%CMC,不加,不加,不加,不加,110,，,0.5h,以上,110,，,0.5h,以上,250,，,4h,以上（,II,）,150,，,4h,（,IIIII,）,110,，,0.5h,110,0.5h,105,0.5h,105,0.5h,105,0.5h,80,15min,活化,硅胶及氧化铝等吸附颗粒表面活性剂多孔结构里孔的表面有吸附物,质的能力，也能可逆的吸附水分；如果吸附了水，那么吸附其他物,质的能力就降低。所以，吸附剂的吸附能力与他们吸附的水量有关,所谓活化就是指它们在一定的温度下烘烤,以除去吸附的水而言。,硅胶薄层一般在,105110,活化,3060min,；,氧化铝薄层如果不加,粘合剂，活化温度可达,150,左右。,展开剂的选择,一个层析条件的建立必须考虑三方面的因素：被分离物质的性质性质、吸附剂的活性及展开剂的极性。三者相互联系而有相互制约的关系可用下图来说明。在一个圆盘上，有三种刻度，分别代表物质的极性（极性 非极性）吸附剂的活性（活性最大的,I,级到活性最小的,V,极）和展开剂的极性（极性 非极性）。,圆盘中心有一个可转动的正三角形指针，如,A,转向非极性物质，,则,B,选用,I,级的吸附剂，,C,就指向选用非极性展开剂。如转到另一,位置，则又是另一种情况。三种因素相互联系又相互制约，其中,被分离物质的性质是首要因素，据此考虑选择吸附剂的活性和展开剂。,显层检出,1.,物理检出法,常用的物理检出法为荧光法。,2.,化学检出法,化学检出法是基于使用一种或多种化学试剂使无色化合物显色，这些试剂称为显色剂。,3.,生物化学法,薄层色谱展开剂,各类染料应用举例,分散染料 偶氮型的分散染料采用硅胶板，蒽醌型最好用氧化铝。,硅胶,G,氯仿,丙酮,=9 1,硅胶,G,苯,丙酮,=9 1,硅胶,G,甲苯,醋酸,=85 15,硅胶,G,苯,氯仿,丙酮,=5 2 1,硅胶,G,甲苯,丙酮,=20 1,阳离子染料,苯,甲苯,=9 1,硅胶,G,氯仿,甲醇,=8 1,硅胶,G,硅胶,G,正丁醇,乙醇,水,=9 1,1,硅胶,G,丁醇,醋酸,水,=4 1 5,硅胶,G,丁酮,醋酸,异丙醇,=2 2 1,硅胶,G,丙醇,甲酸,=8 2,氧杂蒽系,偶氮型,三苯甲烷系,酸性染料,硅胶,G,正丁醇,醋酸乙酯,水,=6 1 3,硅胶,G,正丁醇,吡啶,水,氨水,=4 5 4 1,硅胶,G,醋酸乙酯,吡啶,水,=6 3 1,BaSO,4,DMF,水,=3 4,硅胶 丁醇,氨水,=9 1,活性染料,硅胶 丁醇,醋酸,水,=16 5 15,（,16 14 9,）,硅胶 丁醇,水,DMF=11 11 3,硅胶,G,正丙醇,醋酸乙酯,水,=6 1 3,硅胶,G,正丁醇,吡啶,水,氨水（浓）,=5 5 3 2,（,4 5 4 1,）,硅胶,G,吡啶,正戊醇,氨水（浓）,=1.1 1,1,直接染料,氧化铝 乙酸,水（各种比例）,硅胶,G,醋酸乙酯,吡啶,水,=30 45 25,氧化铝,G,硅胶,G,正丙醇,氨水,水,=2 1,1,（上层液）,硅胶,G,正丁醇,水,氨水,=2 1,1,（上层液）,金属络合染料,硅胶,G,苯,醋酸,=4 1,硅胶,G,氯仿,醋酸,=9 1,聚酰胺 甲醇,水,氨水（浓）,=80 16 4,聚酰胺 甲醇,氨水（浓）,=95 5,硅胶,G,正丁醇,丁醇,2N,氨水,=60 20,20,