医学细菌学弧菌属.pptx

单击此处编辑母版标题样式,编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2018/10/24,#,细菌学弧菌属,第一节,霍乱弧菌,第二节,副溶血性弧菌,重点难点,熟悉,了解,掌握,1.,霍乱弧菌的形态特征、培养特性、分类（群、型）、致病性；,2.,副溶血性弧菌的培养特性和致病性。,霍乱弧菌的免疫性、微生物学检查和防治原则。,1.,霍乱弧菌的抵抗力；,2.,副溶血性,弧菌,的抵抗力、微生物学,检查和防治,原则。,霍乱弧菌,Vibrio cholerae,第一节,（一,）形态染色,新分离细菌呈,弧形或逗点状,，人工,培养,后常,呈,杆状,。,粪便,直接镜检,，排列如,“,鱼群,”,状,革,兰染色,阴性,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,霍乱弧菌形态（革兰染色）（韩俭提供）,霍乱弧菌“鱼群”状排列（邵世和 临床微生物学检验 第,5,版 配套光盘）,霍乱弧菌扫描电镜图（金属镀膜）（邵世和 临床微生物学检验 第,5,版 配套光盘）,（一,）形态染色,菌体,一端,有单鞭毛,，,运动活泼，,在,病人,“米泔水”样粪便,或,液体,培养物,中,呈,快速飞镖样或流星样,运动,有,菌毛，无芽胞,，,O139,群有荚膜,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,霍乱弧菌的端单鞭毛（电镜）（邵世和 临床微生物学检验 第,5,版 配套光盘）,由,2,条环状染色体,组成,大环：,2.96Mb,，携带,2690,个基因，编码,2534,个,蛋白,小环：,1.07Mb,，携带,1003,个基因，编码,970,个,蛋白,前噬菌体,基因组,：产生霍乱毒素,（,cholera toxin,）的霍乱弧菌基因组,含有前噬菌体,CTX,基因组,，携带,10,个基因（,rstR,、,rstA,、,rstB,、,psh,、,cep,、,orfU,、,ace,、,zot,、,ctxA,和,ctxB,），,ctxA,和,ctxB,编码霍乱毒素,（二）,基因组特征,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,（三）,培养,特性,耐碱,不耐酸，在,pH8.89.0,的碱性蛋白胨水或碱性琼脂平板上生长良好,，初次分离常用,碱性蛋白胨水增,菌,在普通,盐浓度环境,中可生长,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,霍乱弧菌在,碱性,蛋白胨,水,中的培养物。（邵世和 临床微生物学检验 第,5,版 配套光盘）,左测试管为对照，右侧试管为,经,4,6,小时培养的霍乱弧菌，大量,繁殖,，培养液混浊，形,成菌膜,。,（三）,培养,特性,在,碱性琼脂平板,上形成,圆形、透明或半透明,S,形、无色、扁平,菌落,在,硫代硫酸盐,-,枸橼酸盐,-,胆盐,-,蔗糖,（,TCBS,）培养基,上形成,黄色,菌落,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,霍乱弧菌在,TCBS,琼脂平板上,形成发酵,蔗糖的较大的黄色菌,落,（邵世和 临床微生物学检验 第,5,版 配套光盘）,氧化酶和触酶试验阳性,能,发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇等糖和醇，产酸不产,气,能,还原,硝酸盐,吲哚试验阳性,（四）生化,反应,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,（五）,抗原构造与分型,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,根据,O,抗原不同进行分群，已发现超过,200,个血清,群,O1,群的古典生物型（,classical biotype,）引发前六次霍乱大流行；,El tor,生物型（,El Tor biotype,）引发第七次大流行,1992,年于南亚分离出,O139,群,霍乱弧菌的抗原构造与分型（韩俭制作）,（六）,抵抗力,在,河水、井水及海水中可存活,13,周。黏附于藻类或甲壳类动物时，可形成生物膜样结构，存活期会,延长,对热,和,酸敏感,对含氯消毒剂敏感,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,（一,）致病物质,霍乱毒素（,cholera toxin,）,：,目前,已知的致泻毒素中最为强烈的毒素。,来源：,O1,群和,O139,群,携带前,噬菌体,CTX,的溶原性,霍乱弧菌产生,结构：,由,一,个,A,亚单位和,5,个相同的,B,亚,单位构成,，,A,亚单位由,A1,和,A2,两条肽链组成。,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,霍乱毒素结构模式图（韩俭制作）,B,亚单位,A1,A2,A,亚单位,霍乱毒,素,的作,用,机制,：,B,亚,单位与小肠上皮细胞,表面的,神经节苷脂,GM1,受体结合，介导,A,亚单位进入细胞,，,激活,腺苷酸环化酶，,使细胞,内,cAMP,水平升高,，刺激肠,黏膜细胞,主动分泌,Cl,-,和,HCO,3,-,，,抑制对,Na,+,的摄入,，水,伴随着离子大量丢失而丢失，导致患者出现严重腹泻与,呕吐,。,医学微生物学（第,9,版）,AC,：,腺苷酸环化酶（,adenylate cyclase,）,Gs,：腺苷酸环化酶,G,亚单位,ADPR,：,ADP,核糖,PKA,：蛋白激酶,A,霍乱毒素作用机制模式图（韩俭制作）,（一,）致病物质,与,定植有关的因素,毒素,共调解菌毛,A,（,TcpA,）：介,导细菌黏附和定植于小肠黏膜上皮细胞,表面,；,可,充当噬菌体,CTX,的,受体,HapA,：有助于,细菌穿透至小肠黏膜,层,趋,化蛋白（,chemotaxis protein,）,：,cep,编码,的黏附性因子,鞭毛：有助于,细菌,穿过黏液,层而接近肠壁,上皮细胞,形成生物膜,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,霍乱弧菌黏附于患者,小肠黏膜,上皮细胞（电镜）（邵世和 临床微生物学检验 第,5,版 配套光盘）,（一,）致病物质,其它致病,物质：副,霍乱,肠毒素、紧密连接毒素、神经氨酸酶、溶,血,毒素、空,泡,毒素、,RTX,毒素等,O139,群存,在多糖荚膜和特殊,LPS,毒性决定,簇,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,（二）流行环节,传染源：患者和带菌者,传播,途径：粪,-,口途径,易,感人群：,O1,群儿童更易感；,O139,群感染的,70%,为成人,影响流行的因素：,个人,因素：胃酸、,饮食,卫生习惯,其他,因素：,自然,因素和社会因素,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,（三）所致疾病,O1,群和,O139,群：引发霍乱（,甲类传染病,），可,从无症状或轻型腹泻到严重的致死性,腹泻（占,5%-10,%,）,。典型病例：剧烈,腹泻和呕吐,，排出,“米泔水”样,粪便；脱水,、肌肉痉挛、低钾血症、代谢性酸中毒、低容量性休克、肾功能衰竭、意识,障碍。未经治疗者死亡率,高达,60%,，及时治疗后死亡率,可小于,1,%,非,O1,群和,O139,群霍乱,弧菌引发,轻症,腹泻,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,（四）免疫性,感染后,可刺激机体产生牢固免疫力,，可,维持,3,年以上,。稻叶型与小,川,型之间有,交叉免疫,保护。,患病后，可,出现,保护性抗毒素,抗体及抗菌抗体，包括肠黏膜表面的,sIgA,和血清中的,IgM,和,IgG,，主要是,sIgA,发挥,作用。,O139,群的保护性免疫以针对脂多糖和荚膜多糖的抗菌免疫为主，抗毒素免疫为辅,。,O1,群获得的免疫不能交叉保护,O139,群感染。,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,医学微生物学（第,9,版）,三、微生物学检查法,标本,“米泔水”样粪便、肛拭、呕吐物,分离培养,快速诊断,血清分群,基因检测,生化反应,碱性蛋白胨水增菌,TCBS,培养基,/,4,号,琼脂,/,庆大霉素,琼脂,生长现象,形态及活菌运动观察,免疫制动试验、,O1,和,O139,群血清凝集试验,PCR,扩增,ctxA,、,rfb,控制传染源：,隔离治疗患者。,及时,补,充,水,和,电解质，,预防低血容量性休克,和酸中毒是治疗霍乱的关键,；,可选用的,抗菌药物,包括：,多,西环素、红霉素,、环,丙沙,星等。,有耐药菌。,切断传播,途径：,改善社区环境，加强食品和水源管理及粪便处理；培养良好个人卫生,习惯,。,保护易感人,群：,接种疫苗，包括减毒活疫苗,CVD,103HgR,、,重组,霍乱毒素,B,亚单位,-,全,菌疫苗,、,灭,活霍乱弧菌全菌,疫苗,。,医学微生物学（第,9,版）,四、防治原则,副溶血性弧菌,Vibrio parahaemolyticus,第,二,节,形态特征,：,大多呈弧状、棒状、卵圆状等多形性，革兰染色阴性。可形成端鞭毛和侧鞭毛，无芽,胞。,基因组：,两个环状染色体，携带,4832,个编码蛋白的基因。,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,副溶血性弧菌形态（革兰染色）（邵世和 临床微生物学检验 第,5,版 配套光盘）,培养特征：,嗜,盐，以,35g/L NaCl,为,适宜，无盐则,不生长,在,TCBS,平板,上可形成蓝,绿色,S,型,菌落,在,我,萋,琼脂,（,Wagatsuma agar,）,平板,上,可,产生,溶血，称为神奈川现象（,Kanagawa phenomenon,KP,）,医学微生物学（第,9,版）,一,、生物学性状,副溶血性弧菌在,TCBS,上的菌落特征（邵世和 临床微生物学检验 第,5,版 配套光盘）,侵袭力：,型分泌系统（,T3SS,）,、,毒力,岛、鞭毛、荚膜、生物膜、外膜蛋白,等,毒素：,耐热,直接溶血素（,thermostable direct hemolysin,，,TDH,）,：存在于,88%,96%,的临床标本中，具有直接溶血毒性和肠毒素活性，通过增加肠黏膜细胞内的钙含量诱导细胞分泌氯离子而引发腹泻。,耐热,相,关溶血素,（,thermostable related hemolysin,，,TRH,）,：,临床分离的,KP,-,副溶血性弧菌可产生,TRH,，,与,TDH,具有,类似生物学活性,。,（一,）致病物质,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,经口感染,引发,食物中毒,：,烹饪,不当的污染本菌的海产品（包括螃蟹、虾、贝类、牡蛎和蛤类等）、盐腌制品；因食物容器或砧板生熟不分污染本菌,后,均可,经口,引发,感染，,呈急性胃肠炎表现，,是造成我国沿海地区微生物性食物中毒的首要因素。,经伤口感染,可引发,蜂窝织炎,。,严重感染或伴有肝病、糖尿病或酒精中毒者的病例，细菌可扩散至血液引发,败血症。,（二）所致疾病,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,病后免疫力不强，可,重复感染,。,（三）免疫性,医学微生物学（第,9,版）,二、致病性与免疫性,医学微生物学（第,9,版）,三、微生物学检查法,标本（,粪便、肛拭或剩余食物,）,增菌（,3.5%NaCl,碱性蛋白胨水,培养基,）,分离培养,（,TCBS,）,可疑菌落（绿色）,纯培养,血清学鉴定,生化鉴定,PCR,扩增,tdh,和,trh,基因,加强,海产品市场和食品加工过程的卫生监,督管理,；,目前,尚无,有效疫苗,可以,预防,；,感染者,病程,较短，以对症治疗为主，严重病例需,补充,水,电,解质。必要时可选,用,强力霉素、米诺环素、第三代头孢菌素等,抗,菌药物进行,治疗,。,医学微生物学（第,9,版）,四、防治原则,霍乱弧菌呈弧形，革,兰阴性,，有单鞭毛,，运动活泼；嗜,碱不耐酸。,O1,、,O139,群是,引起霍乱的主要,病原，,O1,群又分为古典和,E1 Tor,生物型。霍乱毒素是主要致病物质,，其,B,亚单位和小肠黏膜细胞的,GM1,神经节苷脂受体结合后，,A,亚单位进入细胞内，激活腺苷酸环化酶，升高细胞内,cAMP,，造成,水和,电解质大量,丢失；传染源为患者和带菌者，经口感染,，患者,可出现剧烈的腹泻与呕吐，引发微循环障碍和肾功能衰竭，病死率高,。快速,大,量补充水和,电解质并配合,以抗菌药物是治疗的,关键。,副溶血性弧菌为弧,状或棒状革,兰阴性,菌，嗜盐。临床,分离株,KP,阳性,；存在,于近海鱼类、贝壳等海产品中,，因食用,烹饪不当的海产品或盐腌制品而感染，引发,食物中毒；也可经伤口感染引发蜂窝织炎。,