免疫球蛋白细胞免疫检测肿瘤标志物.ppt
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1、临床常用免疫学检测临床常用免疫学检测李朝虹李朝虹徐医临床学院徐医临床学院内科诊断教研室内科诊断教研室第一节第一节血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测概述概述免疫球蛋白免疫球蛋白(immunoglobulin(immunoglobulin,Ig)Ig)是指一组具有抗体活性的是指一组具有抗体活性的球蛋白。球蛋白。由浆细胞合成与分泌,存在于机体的血液、体液、外分泌液由浆细胞合成与分泌,存在于机体的血液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上。和部分细胞的膜上。按其功能和理化性质分按其功能和理化性质分IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM、IgDIgD、IgEIgE五大类。五大类。一、免疫球蛋白一、免疫球蛋
2、白G G检测检测 免疫球蛋白免疫球蛋白G G(IgGIgG)为人体含量最多和最主要的为人体含量最多和最主要的IgIg,占总占总IgIg的的70708080;对病毒、细菌和寄生虫都有抗体活性;对病毒、细菌和寄生虫都有抗体活性;唯一能够通过胎盘的唯一能够通过胎盘的IgIg。一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白G G检测检测参考值:参考值:7.016.6g/L7.016.6g/L临床意义:临床意义:1 1、IgGIgG增高:增高:多克隆增高:即多克隆增高:即IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM均增高。均增高。常见于慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球常见于慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球菌感
3、染及自身免疫性疾病如菌感染及自身免疫性疾病如SLESLE、RARA。一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白G G检测检测临床意义:临床意义:1 1、IgGIgG增高:增高:单克隆增高:仅有某一种单克隆增高:仅有某一种IgIg增高。增高。主要见于免疫增殖性疾病,如分泌型主要见于免疫增殖性疾病,如分泌型MMMM(分为(分为IgGIgG型、型、IgAIgA型、型、IgDIgD型、型、IgEIgE型)型)一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白G G检测检测临床意义:临床意义:2 2、IgGIgG降低:降低:各种先天性和获得性体液免疫缺陷病各种先天性和获得性体液免疫缺陷病 肾病综合征:蛋白丢失肾病综合征:蛋白丢失 病毒感染
4、:抑制免疫病毒感染:抑制免疫 应用免疫抑制剂患者应用免疫抑制剂患者二、免疫球蛋白二、免疫球蛋白A A检测检测IgAIgA分为血清型分为血清型IgAIgA与分泌型与分泌型IgAIgA(SIgASIgA)血清型血清型IgAIgA占血清总占血清总IgIg的的10101515SIgASIgA在外分泌系统中有重要的免疫功能:在外分泌系统中有重要的免疫功能:如呼吸道、消化道、泌尿生殖道的如呼吸道、消化道、泌尿生殖道的 感染、炎症、肿瘤感染、炎症、肿瘤二、免疫球蛋白二、免疫球蛋白A A检测检测参考值:参考值:血清血清IgAIgA:0.73.5g/L0.73.5g/L SIgA SIgA:唾液平均为唾液平均为
5、 0.3 g/L0.3 g/L 泪液泪液 303080 g/L80 g/L 初乳平均为初乳平均为 5.06 g/L5.06 g/L 粪便平均为粪便平均为 1.3 g/L1.3 g/L二、免疫球蛋白二、免疫球蛋白A A检测检测临床意义:临床意义:1 1、IgAIgA增高:增高:IgAIgA型型MMMM、SLESLE、肝硬、肝硬 化、肾脏疾病化、肾脏疾病 2 2、IgAIgA降低:反复呼吸道感染、非降低:反复呼吸道感染、非IgAIgA型型 MMMM、原发性和继发性免疫缺陷病、原发性和继发性免疫缺陷病三、免疫球蛋白三、免疫球蛋白M M检测检测IgMIgM是分子质量最大的是分子质量最大的Ig;Ig;占
6、血清总占血清总IgIg的的 510510;是有效的凝聚和溶解细胞的因子。是有效的凝聚和溶解细胞的因子。参考值:参考值:0.52.6g/L0.52.6g/L三、免疫球蛋白三、免疫球蛋白M M检测检测临床意义:临床意义:1 1、IgMIgM增高:初期病毒性感染、肝增高:初期病毒性感染、肝 硬化、硬化、RARA、SLESLE、原发性巨球、原发性巨球 蛋白血症。蛋白血症。2 2、IgMIgM降低:降低:IgGIgG型重链病、型重链病、IgAIgA型型 MMMM、先天性免疫缺陷症、免疫、先天性免疫缺陷症、免疫 抑制疗法。抑制疗法。四、免疫球蛋白四、免疫球蛋白E E检测检测血清中最少的一种血清中最少的一种
7、Ig;Ig;与变态反应、寄生虫感染和过敏与变态反应、寄生虫感染和过敏 反应有关。反应有关。参考值:参考值:ELISAELISA法:法:0.10.9mg/L0.10.9mg/L四、免疫球蛋白四、免疫球蛋白E E检测检测临床意义:临床意义:1 1、IgEIgE增高:增高:IgEIgE型型MMMM、重链病、重链病、肝脏病、结节病、肝脏病、结节病、RARA以及各种以及各种 过敏性疾病(哮喘、荨麻疹、过敏性疾病(哮喘、荨麻疹、寄生虫感染)。寄生虫感染)。四、免疫球蛋白四、免疫球蛋白E E检测检测临床意义:临床意义:2 2、IgEIgE降低:降低:先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症先天性或获得性丙种球蛋白缺乏
8、症 恶性肿瘤恶性肿瘤 应用免疫抑制剂应用免疫抑制剂五、血清五、血清M M蛋白检测蛋白检测 M M蛋白又称单克隆免疫球蛋白,是一种单克隆蛋白又称单克隆免疫球蛋白,是一种单克隆B B细胞细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。其分子片段。参考值:阴性参考值:阴性五、血清五、血清M M蛋白检测蛋白检测临床意义:临床意义:阳性提示单克隆免疫球蛋白增殖病阳性提示单克隆免疫球蛋白增殖病 MM MM、巨球蛋白血症、巨球蛋白血症、重链病、轻链病、半分子病、重链病、轻链病、半分子病、7S IgG7S IgG病病第二节第二节血清补体检
9、测血清补体检测概述概述补体(补体(complement,Ccomplement,C)是一组具有)是一组具有 酶原活性的糖蛋白;酶原活性的糖蛋白;补体参与灭活病原体的免疫反应;补体参与灭活病原体的免疫反应;补体也参与自身免疫损伤;补体也参与自身免疫损伤;一、总补体溶血活性检测一、总补体溶血活性检测CHCH5050以溶血素致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合物)激活待以溶血素致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合物)激活待测血清的测血清的C C1 1,引起补体活化的连锁反应,最终引起绵羊红细,引起补体活化的连锁反应,最终引起绵羊红细胞溶解。胞溶解。溶血程度与补体量呈正相关,为溶血程度与补体量呈正相关,为S S形
10、曲线关系。形曲线关系。一般以一般以5050溶血作为检测终点(溶血作为检测终点(CHCH5050 )。)。一、总补体溶血活性检测一、总补体溶血活性检测 参考值:试管法参考值:试管法5050100kU/L100kU/L 临床意义:主要反映补体传统途径临床意义:主要反映补体传统途径 活化的活性程度。活化的活性程度。CHCH5050增高:见于急性炎症、组织增高:见于急性炎症、组织 损伤、恶性肿瘤。损伤、恶性肿瘤。一、总补体溶血活性检测一、总补体溶血活性检测临床意义:临床意义:CHCH5050减低:更有意义。减低:更有意义。见于各种免疫复合物性疾病,见于各种免疫复合物性疾病,如肾小球肾炎、自身免疫性疾病
11、如肾小球肾炎、自身免疫性疾病 (SLESLE)、感染性心内膜炎、病毒)、感染性心内膜炎、病毒 性肝炎和慢性肝病。性肝炎和慢性肝病。三、补体三、补体C C3 3检测检测补体补体C C3 3是一种由肝脏合成的是一种由肝脏合成的2 2球蛋白,由球蛋白,由和和两条多肽两条多肽链组成;链组成;在补体系统各成分中含量最多;在补体系统各成分中含量最多;是传统途径和旁路途径被激活的关键物质;是传统途径和旁路途径被激活的关键物质;三、补体三、补体C C3 3检测检测参考值:参考值:0.81.5g/L0.81.5g/L临床意义:临床意义:增高:见于急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应。增高:见于急性炎症、传染病早
12、期、肿瘤、排异反应。减低:见于急性肾小球肾炎、链球菌感染后肾炎、狼疮肾炎;减低:见于急性肾小球肾炎、链球菌感染后肾炎、狼疮肾炎;活动性的活动性的SLESLE、RARA。四、补体四、补体C C4 4检测检测是一种多功能是一种多功能1 1球蛋白球蛋白.在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒方在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒方面发挥作用面发挥作用.参考值:参考值:0.20.6g/L0.20.6g/L四、补体四、补体C C4 4检测检测临床意义:临床意义:升高:急性风湿热、结节性动脉炎、皮肌炎。升高:急性风湿热、结节性动脉炎、皮肌炎。降低:自身免疫性肝炎、降低:自身免疫性
13、肝炎、1 1型糖尿病、型糖尿病、SLESLE、狼疮肾炎、狼疮肾炎、RARA、SScSSc、IgAIgA性肾病、胰腺癌。性肾病、胰腺癌。第三节第三节细胞免疫检测细胞免疫检测概述概述人体淋巴细胞分为人体淋巴细胞分为T T、B B、NKNK等细胞群;等细胞群;其分别有若干亚群,并各有其特异的表面标志和功能;其分别有若干亚群,并各有其特异的表面标志和功能;临床上各种免疫病可出现不同淋巴细胞数量和功能的变化;临床上各种免疫病可出现不同淋巴细胞数量和功能的变化;一、一、T T细胞亚群的检测细胞亚群的检测(一)(一)T T细胞花结形成试验细胞花结形成试验 T T细胞表面有绵羊红细胞(细胞表面有绵羊红细胞(S
14、RBCSRBC)受体,可与)受体,可与SRBCSRBC结合形结合形成花结样细胞,称为红细胞玫瑰花结形成试验或成花结样细胞,称为红细胞玫瑰花结形成试验或E E玫瑰花结玫瑰花结形成试验(形成试验(ERFTERFT)。)。一、一、T T细胞亚群的检测细胞亚群的检测以每个以每个T T淋巴细胞粘附淋巴细胞粘附3 3个羊红细胞者称为花结形成细胞个羊红细胞者称为花结形成细胞(EtRFCEtRFC)。)。显微镜下计数花结形成细胞占淋巴细胞的比例,而检测显微镜下计数花结形成细胞占淋巴细胞的比例,而检测T T细细胞的数量。胞的数量。不能反映不能反映T T细胞的免疫功能。细胞的免疫功能。参考值:参考值:EtRFC
15、64.4EtRFC 64.46.76.7一、一、T T细胞亚群的检测细胞亚群的检测临床意义:临床意义:降低:见于免疫缺陷疾病,如恶性肿瘤、免疫性疾病、大降低:见于免疫缺陷疾病,如恶性肿瘤、免疫性疾病、大面积烧伤、多发性神经炎等。面积烧伤、多发性神经炎等。升高:见于甲亢、甲状腺炎、重症肌无力、慢活肝、升高:见于甲亢、甲状腺炎、重症肌无力、慢活肝、SLESLE活动活动期和器官移植排斥反应。期和器官移植排斥反应。一、一、T T细胞亚群的检测细胞亚群的检测(二)(二)T T细胞转化试验细胞转化试验 体外培养时,体外培养时,T T淋巴细胞被淋巴细胞被PHAPHA和和ConAConA刺激,转化为母细胞。刺
16、激,转化为母细胞。计数淋巴细胞和转化的母细胞数,求出转化率。计数淋巴细胞和转化的母细胞数,求出转化率。一、一、T T细胞亚群的检测细胞亚群的检测参考值:参考值:形态学法:转化率形态学法:转化率60.160.17.67.6临床意义:同临床意义:同T T淋巴细胞花结试验,淋巴细胞花结试验,但但DownDown综合征时明显增高。综合征时明显增高。反映反映T T细胞的免疫功能;细胞的免疫功能;估计疾病的疗效和预后;估计疾病的疗效和预后;一、一、T T细胞亚群的检测细胞亚群的检测(三)(三)T T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定T T细胞膜表面有许多特异性抗原,统称为白细胞分化抗原细胞膜表面有许多特异性
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