国家自然科学基金年度研究计划及预期研究结果示例.doc
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1、年度研究计划及预期研究结果示例:本项目预计在4年内完成,具体进展计划如下:u 2016.012016.06:回顾性收集组织标本,定量PCR和免疫组化实验检测肠癌组织标本中A基因的表达水平,分析临床病理及预后的相关性;u 2016.072016.12:过表达A基因和靶向A的RNAi慢病毒构建、包装和纯化,感染肠癌细胞,并通过实时定量PCR和western blot实验方法检测A的表达水平改变;u 2017.012017.06:通过细胞实验(MTT 生长实验,克隆形成实验和转移小室实验)验证A被消减或过表达后,细胞表型的变化,在多株细胞株上做验证;u 2017.072017.12:通过pathwa
2、y array,验证A对于Y信号通路的影响及其下游分子信号通路的改变,鉴定调控的关键节点分子。同时筛选A基因的相互作用蛋白;u 2018.012018.06:根据筛选结果聚焦于对Y通路已有报道的靶分子,利用co-IP实验验证A与靶分子之间的相互作用关系,建立A调控Y通路的直接作用机制认识;u 2018.072018.12:信息学预测作用靶位点,制备点突变载体对两个分子直接的结合位点进行验证,明确结合的精细模式;u 2019.012019.06:动物实验验证A对小鼠移植瘤模型和转移模型的影响,在组织样本中检测A基因调控的Y通路分子和相互作用分子的表达改变;u 2019.072019.12:总结数据,发表论文,根据修回意见补充实验。预期研究结果1) 揭示A参与肿瘤转移细胞可塑性调控(科学问题)的功能,通过体内、体外实验结合过表达和RNAi手段,证实其具有调节肿瘤细胞可塑性的表型并由此影响肠癌的转移;2) 阐明A通过介导Y调节Z作用的机制。不仅通过生物信息学预测靶分子,还要通过实验进行验证,找到A干预的Y通路关键分子,解析其相互作用模式。3) 通过临床样本分析,检测A在肠癌组织及肝转移灶中(临床问题)的表达情况并分析其与肠癌肝转移及预后、生存的相关性,明确A的临床意义; 4) 在专业学术刊物上发表3-4篇SCI研究论文;5) 培养博士生1名,硕士研究生2名;
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