北京市西城区北京师大附属实验中学2025年生物高二第二学期期末复习检测试题含解析.doc

北京市西城区北京师大附属实验中学2025年生物高二第二学期期末复习检测试题
考生请注意：
1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。
2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。
3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）
1．图示某动物细胞分裂的不同时期。细胞内染色体与核DNA数目比的变化关系，下列相关叙述错误的是

A．ab段细胞中核糖体的活动很活跃
B．bc段的细胞可发生基因突变、基因重组和染色体变异
C．处于cd段的细胞可以不存在同源染色体
D．着丝点断裂发生在de段
2．下列对孟德尔研究过程的分析，错误的是
A．孟德尔在纯合碗豆亲本杂交和F1自交遗传实验的基础上提出问题
B．孟德尔为了验证所做出的假设是否正确，设计并完成了正、反交实验
C．孟德尔在豌豆花成熟前进行去雄、套袋，再进行授粉、套袋，从而实现亲本的杂交
D．豌豆产生的子代数量足够多、相对性状易于区分是孟德尔成功的部分原因
3．下列有关细胞的结构和功能的叙述，正确的是
A．细胞膜中的磷脂分子是由甘油、脂肪酸和磷酸等组成
B．人体成熟的红细胞中核孔数目很少，因此红细胞代谢较弱
C．组成细胞膜的主要成分是脂质、蛋白质和多糖
D．黑暗条件下，植物细胞的细胞质基质中不能合成三磷酸腺苷
4．甲地因火山喷发被火山岩全部覆盖，乙地因地震使原有植被消失，之后两地均发生了群落演替。关于甲、乙两地群落演替的叙述，错误的是
A．甲地和乙地发生的演替经历的时间不同，乙地的演替时间更长
B．若没有外力干扰，乙地可重现森林，形成次生林
C．地衣会比苔藓更早地出现在甲地火山岩上
D．甲、乙两地随着时间延长，生物多样性逐渐增多
5．下列关于育种的叙述，正确的是（ ）
A．马和驴杂交的后代骡是不育的二倍体，而雄蜂是可育的单倍体
B．单倍体育种常用一定浓度的秋水仙素处理单倍体的种子
C．二倍体植物的花药经离体培养能得到叶片和果实较小的单倍体植物
D．三倍体西瓜不结子的性状可以遗传，它不是一个新物种，但八倍体小黑麦是用基因工程技术创造的新物种
6．下列关于蛋白质工程的说法，正确的是
A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现
C．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程完全相同
D．蛋白质工程与基因工程密不可分，被称为第二代基因工程
二、综合题：本大题共4小题
7．（9分）某校课外兴趣小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测定。取6支灭菌的试管，分别加入9mL灭菌的生理盐水，编号为B1、B2、B3、B4、B5、B6；吸取1mL酸奶样液加入试管 B1中，混合均匀；然后另取一支吸管从B1中吸取1mL溶液，加入B2中，依次类推，最后从试管B6中取0.1 mL样液进行涂布计数，涂布三个平板，其菌落数分别为251、265、276个。 请回答下列问题：
（1）乳酸是乳酸菌___________呼吸的产物，进行的场所是：______________________。
（2）制备乳酸菌的培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是___________。平板冷凝后，倒置的目的是___________。
（3）该兴趣小组对乳酸菌接种所采用的方法是___________。根据三个平板中的菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为___________个/mL，该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比，一般___________（填“偏大”或“偏小”）。
（4）为了使测量结果更加准确，对照组的设置是___________。
8．（10分）如图是甲病(用A、a表示)和乙病(用B、b表示)两种遗传病的系谱图，已知其中一种为伴性遗传。请据图回答下列问题。

（1）乙病是_______________遗传病。
（2）4号的基因型是______；若7号与9号个体结婚，至少患一种病的概率为________。
（3）若医学检验发现，7号关于甲病的致病基因处于杂合状态，且含有该隐性基因的精子会有1/2死亡，无法参与受精作用，存活的精子均正常，则7号与9号个体结婚，生育的子女正常的概率为_________________。
（4）人群中某常染色体显性遗传病的发病率为36%，一对夫妇中妻子患病，丈夫正常，他们所生的子女不患该病的概率是_________。
9．（10分）I以富含纤维素的作物秸秆为原料、利用微生物发酵生产乙醇，是现代化石能源的重要途径。科学家通过实验筛选出分解纤维素能力较强的菌株，实验流程如下。

请回答:
（1）样品最好取自于______的土壤。
（2）筛选过程中，可以采用______染色法进行鉴定，其中______的菌落中的菌种分解纤维素能力较强。
（3）培养基b应为______（固体、液体）培养基。扩大培养后，可采用______的方法进行计数。
（4）得到的目的菌种，一般用______法进行固定，常用的多孔性载体有______（写出1种即可）。在工业生产中使用固定化菌种的优点是____________（写出2点即可）。
Ⅱ肿瘤细胞的蛋白PD-L1能够与T细胞的蛋白PD-1结合，抑制免疫系统对肿瘤的杀伤作用。某种靶向药物可以阻断上述结合过程，从而增强免疫系统对肿瘤的杀伤作用。下图是制备该药物的流程图：

请据图回答：
（1）以______作为抗原注入小鼠体内，发生免疫反应后，从小鼠体内的______（器官）中提取细胞a。
（2）细胞a与b能融合的原理是______，常用的诱导方法有______（写出2个即可）。经过诱导，两两融合的细胞有______类。
（3）细胞d的特点是：____________。可将细胞d通过______或______进行大规模培养。
（4）鉴定提取物中是否含有该靶向药物时，可取适量提取物，加入______，观察是否出现凝集沉淀。
10．（10分）为探究减轻番茄遭受盐胁迫的影响，科研人员研究了硝酸钙对番茄遭受氯化钠胁迫的缓解作用，实验结果如图所示。

回答下列问题：
（1）据图可知番茄遭受盐胁迫的影响可通过____检测。
（2）叶绿素存在于番茄叶绿体的____中，可采用____法分离色素。番茄遭受盐胁迫时，叶绿素含量减少会导致光反应产物____减少，使____循环中三碳酸还原减弱，光合作用产物增加相对减少，从而影响苗高。
（3）由图可知，在氯化钠浓度相同时，不同浓度的硝酸钙处理下，可测番茄叶片的叶绿素含量____（差异显著/差异不显著）；在加入硝酸钙后，在不同氯化钠浓度溶液中都获得了苗高的结果，表明硝酸钙使番茄对氯化钠胁迫的适应性范围____。
11．（15分） (一）乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流 程为：

（1）玉米秸秆中的主要成分是纤维素，预处理包括粉碎、酶解等过程，使之转化为发酵所需的____。
（2）从以下哪些微生物中可以提取上述预处理所需的酶？_____
A．醋杆菌 B．黑曲霉 C．乳酸菌 D．酵母菌
（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的选择培养基中的碳源为____，配制好的培养基要用_____法灭菌，为了更好地分离并进行活菌计数，可以采用的接种方法是____。
（4）酒精发酵阶段需要的菌种属于________（填“原核生物”或“真核生物”），在产生酒精时要控制的必要条件是____。
（二）下图表示利用生物技术获得转基因猪和转基因烟草的过程(图中数字表示过程或技术，字母表 示物质或结构)。请回答下列问题：

（1）如果想利用转基因猪生产用于移植的心脏等器官，目的基因是人的 MHC 基因，并且已知该基因的碱基序列，可以用____方法获得该基因并扩增，然后将目的基因与质粒等载体结合形成了重组质粒。在重组质粒的构建过程中需要的工具酶有____。 在这个操作过程中受体细胞应选用猪的_____________（A．胚胎干细胞 B．T 淋巴细胞 C．B 淋巴细胞 D．心肌细胞）。培养该受体细胞时，一般要在培养皿底部制备一层胚胎成纤 维细胞，目的是________________。
（2）从苏云金芽孢杆菌中获得的毒蛋白基因与 Ti 质粒重组，之后需要先使重组 Ti 质粒进入_________细 胞，为了增加转化效率，需要用_________ 处理该细胞，以增加其细胞壁的通透性，筛选后利用该细胞对植物细胞的侵染能力使目的基因进入植物细胞并表达，从个体水平鉴定烟草是否获得抗虫能力的方法是_____________。
参考答案

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）
1、B
【解析】
ab段表示G1期，细胞中进行蛋白质合成，所以细胞中核糖体的活动很活跃，A正确；
曲线bc段为间期，主要进行DNA分子的复制，此时细胞可发生基因突变和染色体变异，但不会发生基因重组，B错误；
曲线cd段可表示G2期、有丝分裂前期、中期、减数第一次分裂、减数第二次分裂前期和中期，其中处于减数第二次分裂前期和中期的细胞内不存在同源染色体，C正确；
曲线de段是染色体上的着丝点分裂，染色单体分开形成染色体，D正确。
2、B
【解析】
孟德尔采用假说演绎法得出了基因的分离定律和基因的自由组合定律。
假说演绎法包括：观察实验、提出问题→做出假说→演绎推理→实验验证。
【详解】
A、孟德尔在纯合碗豆亲本杂交（如高茎和矮茎杂交）和F1自交遗传实验的基础上提出问题（如子二代中高茎：矮茎为什么是3:1？），A正确；
B、孟德尔为了验证所做出的假设是否正确，设计并完成了测交实验，B错误；
C、为了避免自身花粉的干扰，孟德尔在豌豆花成熟前进行去雄、套袋，再进行授粉、套袋，从而实现亲本的杂交，C正确；
D、豌豆产生的子代数量足够多、相对性状易于区分是孟德尔成功的部分原因，另外还有豌豆是严格的自花闭花传粉植物，自然状态下都是纯种等，D正确。
故选B。
3、A
【解析】细胞膜中的磷脂分子是由甘油、脂肪酸和磷酸等组成，A正确。人体成熟的红细胞无细胞核，因此无核孔，B错误。组成细胞膜的主要成分是脂质、蛋白质，C错误。黑暗条件下，植物细胞的细胞质基质可以通过呼吸作用产生能量，然后合成三磷酸腺苷（ATP），D错误。
4、A
【解析】
甲地因火山喷发被火山岩全部覆盖，所以甲地发生的是初生演替，乙地因地震使原有植被消失，但是还保留着植物的种子和繁殖体，所以乙地发生的是次生演替。初生演替经历的时间较长，次生演替经历的时间较短。
【详解】
甲地发生初生演替，经历的时间长，乙地发生次生演替，经历的时间短，A错误；如果没有外力的干扰，乙地一般会演替到森林阶段，B正确；初生演替过程中，先是裸岩阶段，然后是地衣阶段，然后是苔藓阶段，C正确；在演替的过程中，生物的多样性是逐渐增加的，D正确。
初生演替发生在火山岩、冰川泥或者沙丘，次生演替发生在火灾后的森林、废耕的农田等保留土壤条件，甚至保留植物种子和繁殖体的地方。
5、A
【解析】
四种育种方法的比较如下表：

杂交育种
诱变育种
单倍体育种
多倍体育种
方法
杂交→自交→选优
辐射诱变、激光诱变、化学药剂处理
花药离体培养、秋水仙素诱导加倍
秋水仙素处理萌发的种子或幼苗
原理
基因重组
基因突变
染色体变异（染色体组先成倍减少，再加倍，得到纯种）
染色体变异（染色体组成倍增加）
【详解】
A、马和驴是不同物种，它们杂交的后代骡没有同源染色体，因此是不育的二倍体；雄蜂虽然是单倍体，但其可以进行假减数分裂形成可育配子，仍然是可育的，A正确；
B、单倍体是高度不育的，没有种子，应该用秋水仙素处理单倍体幼苗，B错误；
C、二倍体植物的花药离体培养得到单倍体植物，只含有1个染色体组，单倍体植物高度不育，不可能得到果实，C错误；
D、由于三倍体植株减数分裂过程中，联会紊乱不能产生正常配子，因此三倍体不是一个物种；八倍体小黑麦是多倍体育种的结果，原理是染色体变异，D错误。
故选A。
本题考查诱变育种、杂交育种和多倍体育种的相关知识，识记单倍体和多倍体的特点，掌握相应的育种方法。
6、D
【解析】
蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界已有的蛋白质。
【详解】
由概念可知：蛋白质工程是在分子水平上对现有控制蛋白质合成的基因分子进行操作，改造基因即改造蛋白质，而且可以遗传，A错误；对蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的，B错误；蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是不完全相同的，C错误；蛋白质工程是在基因工程基础上形成的，与基因工程密不可分，又被称为第二代基因工程，D正确。
本题考查蛋白质工程的相关知识，蛋白质工程的原理（实质）是：改造基因。蛋白质工程的过程：（1）根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；（2）进行基因修饰或基因合成；（3）最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成．因此蛋白质工程生产合成的蛋白质是自然界中不存在的新型蛋白质分子。

二、综合题：本大题共4小题
7、无氧 细胞质基质 干热灭菌法 既可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基，又可以避免培养基中的水分过快地挥发 稀释涂布平板法 2.64×109 偏小 另增设一组培养基，接种等量无菌生理盐水，其他操作均相同
【解析】
试题分析：制备培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是干热灭菌法，对培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。倒平板时，温度太低会导致培养基凝固，无法铺展均匀，温度太高，可能会烫伤手指等，因此倒平板时培养基的温度不能太低也不能太高；待平板冷凝后，要将平板倒置，其目的是防止平板冷凝后，培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染，同时又可以避免培养基中的水分过快地挥发。分离微生物常用的方法:平板划线法和稀释涂布平板法，但要对微生物分离后再计数,则只能采用稀释涂布平板法。
(1) 乳酸是乳酸菌进行无氧呼吸的产物，无氧呼吸的场所是乳酸菌细胞的细胞质基质。
(2)制备培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是干热灭菌法，对培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。平板冷凝后将平板倒置的目的是防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染，同时又可以避免培养基中的水分过快地挥发。
(3)取6支灭菌的试管，分别加入9mL灭菌的生理盐水，标号B1、B2、B3、B4、B5、B6，吸取1mL酸奶样液中加入试管B1中，然后另取一支吸管从B2中吸取1mL溶液，加入B2中，依此类推，最后从试管B6中取0.1mL样液进行涂布计数，这种接种方法是稀释涂布法。根据操作步骤可推知，得到101、102、103、104、105、106倍的稀释液。从试管B6中取0.1mL样液进行涂布计数，三个平板中菌落数分别为251、265、276个,可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为(251+265+276)÷3×10×106=2.64×109个/mL。稀释涂布平板法测定活菌数目时，因为相邻的细菌可能形成一个菌落，因此测定值可能比实际值小。
(4)为了使测量结果更加准确，需要另增设一组培养基，接种等量灭菌的生理盐水，主要是检测对培养基和培养器具灭菌是否彻底和操作是否严格按无菌操作要求进行。
【点睛】注意两种常用的接种方法区别，仅用于分离微生物得到单菌落，两种方法均可，但要对分离的微生物进行计数，则需要用稀释涂布平板法，常考点有计数原理、计算方法和测定值偏小的原因等等。
8、伴X染色体隐性 AaXbXb 1/2 1/2 4/9
【解析】
分析遗传系谱图：5号和6号表现型正常，生有患甲病的女儿，故甲病属于常染色体隐性遗传病；已知甲病、乙病，其中一种为伴性遗传，2号患乙病，有正常的女儿5号，故乙病为伴X染色体隐性遗传病。甲病（用A、a表示），则患甲病为aa，不患甲病为AA、Aa；乙病（用B、b表示），则患乙病为XbY、XbXb，不患乙病为XBXB、XBXb、XBY。
【详解】
（1）根据试题分析：甲病属于常染色体隐性遗传病，乙病属于伴X染色体隐性遗传病。
（2）对于甲病来说，甲病是常染色体隐性遗传病，4号不患甲病，而其女儿8号患甲病，因此4号的基因型为Aa；对于乙病来说，4号患乙病，因此其基因型为XbXb，综合两种病来说，4号的基因型为AaXbXb。7号不患甲病，有患甲病的妹妹，故7号基因型及概率为1/3AAXbY，2/3AaXbY，9号患甲病，相关基因型为aa，5号关于乙病的基因型为XBXb，9号关于乙病的基因型及概率为1/2XBXB、1/2XBXb，因此9号的基因型及概率为1/2aaXBXB、1/2aaXBXb。若7号与9号个体结婚，生育的子女患甲病的概率为2/3×1/2=1/3，患乙病的概率为1/2×1/2=1/4，只患一种病的概率为1/3×3/4+2/3×1/4=5/12，患两种病的概率为1/3×1/4=1/12，至少患一种病的概率为5/12+1/12=1/2。
（3）已知7号关于甲病的致病基因处于杂合状态，且含有该隐性基因的精子会有1/2死亡，则7号关于甲病的基因型为Aa，产生A配子的概率为1/2，产生的a配子能成活的概率为1/2×1/2=1/4，A：a=2：1，其成活配子类型及概率为2/3A、1/3a，因此对于甲病来说，7号与9号个体结婚，生育的子女正常的概率为2/3；对于乙病来说7号（XbY）与9号（1/2XBXB、1/2XBXb）结婚，后代正常的概率为3/4，综合两种病来说，7号与9号个体结婚，生育的子女正常的概率为2/3×3/4=1/2。
（4）人群中某常染色体显性遗传病的发病率为36%，则隐性个体的基因频率型频率为64%，假设控制该病的等位基因为A、a，根据遗传平衡定律可知，隐性基因的频率a=8/10，显性基因的频率A=2/10，则AA的频率为2/10×2/10=4/100，Aa的频率为2×8/10×2/10=32/100，患病人群中携带者所占的比例为Aa的频率/（AA的频率+Aa的频率）=32/100/（32/100+4/100）=8/9，一对夫妇中妻子患病（Aa或AA），丈夫正常（aa），他们所生的子女不患该病的概率是8/9×1/2=4/9。
本题的知识点是人类遗传病的类型和致病基因位置判断，伴性隐性遗传与常染色体显性遗传的特点，根据遗传系谱图中的信息写出相关个体的基因型，并推算后代的患病概率．解此类题目的思路是，一判显隐性，二判基因位置，三写出相关基因型，四进行概率计算。
9、富含纤维素 刚果红 透明圈直径越大 液体 显微镜直接计数 包埋 海藻酸钠 可以重复使用，减少投资（稳定性强、操作简便、发酵速度快、生产周期短、酒精得率高） PD-L1（或蛋白PD-L1） 脾 细胞膜具有流动性 聚乙二醇、灭活的病毒、电激等 3 既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体 体外培养 注入小鼠腹腔 PD-L1（或蛋白PD-L1）
【解析】
I本题考查纤维素分解菌的分离和培养,要求考生识记分离分解纤维素的微生物的原理,掌握固定化术及优点,能结合所学的知识准确题；Ⅱ本题主要考查人体免疫系统在维持稳态中的作用以及单克隆抗体制备过程,意在考查学生对基础知识的理解掌握,难度适中。据图分析,细胞a是经过抗原免疫的B淋巴细胞,细胞b是骨髓瘤细胞,筛选1是通过筛选得到杂交瘤细胞c(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞),筛选2是选出能够产生特异性抗体的细胞d,然后进行体外和体内培养,分离提取即可。
【详解】
I (1)要筛选出分解纤维素能力较强的菌株,样品最好取自于富含纤维素的土壤。
(2)在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌,其中透明圈直径越大的菌落中的菌种分解纤维素能力较强。
(3)要扩大培养菌种,应该采用液体培养基。扩大培养后,可采用显微镜直接计数的方法进行计数。
(4)固定化细胞一般采用包埋法,常用的多孔性载体有海藻酸钠。在工业生产中使用固定化菌种的优点是:可以重复使用,减少投资、稳定性强、操作简便、发酵速度快、生产周期短、酒精得率高等。
Ⅱ(1)由图示可知,以PD-L1作为抗原注入小鼠体内,发生免疫反应后,从小鼠体内的脾脏中提取细胞a。
(2)细胞a与b能融合的原理是细胞膜具有流动性,常用的诱导方法有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。经过诱导,两两融合的细胞有3类,即瘤瘤细胞、BB细胞、杂交瘤细胞。
(3)细胞d的特点是:既能无限增殖,又能产生专一抗体。可将细胞d通过体外培养或注入小鼠腹腔进行大规模培养。
(4)鉴定提取物中是否含有该靶向药物时,可取适量提取物,加入PD-1,观察是否出现凝集沉淀,若出现凝集沉淀,则说明提取物中含有该靶向药物。
分解纤维素的微生物的分离实验的原理①土壤中存在着大量纤维素分解酶,包括真菌、细菌和放线菌等,它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶,可以把纤维素分解为纤维二糖,进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用,故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中,纤维素分解菌能够很好地生长,其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌。
10、苗高和叶绿素含量 类囊体膜 纸层析 ATP和NADPH 卡尔文 差异不显著 提高
【解析】
由图可知实验通过检测苗高和叶绿素含量探究硝酸钙对番茄遭受氯化钠胁迫的缓解作用，加入硝酸钙后，不同氯化钠浓度溶液中的番茄苗高和叶绿素含量都有所提高。
【详解】
（1）据图可知番茄遭受盐胁迫的影响可通过苗高和叶绿素含量检测。
（2）叶绿素存在于番茄叶绿体的类囊体膜中，可采用纸层析法分离色素。卡尔文循环中，C3接受光反应产生的ATP的能量并被NADPH还原，形成糖类和C5，而番茄遭受盐胁迫时，叶绿素含量减少，导致光反应产物ATP和NADPH减少，使三碳酸还原减弱，光合作用产物增加相对减少。
（3）由图可知，在氯化钠浓度相同时，不同浓度的硝酸钙处理下，可测番茄叶片的叶绿素含量差异不显著。在加入硝酸钙后，在不同氯化钠浓度溶液中都获得了苗高的结果，表明硝酸钙使番茄对氯化钠胁迫的适应性范围提高。
答题关键在于结合光合作用有关知识，分析处理实验结果，得出实验结论。
11、葡萄糖 B 纤维素 高压蒸汽灭菌 稀释涂布法（或涂布分离法） 真核生物 无氧（密闭、密封） 化学合成 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 A 促进细胞生长（增殖），抑制细胞分化 农杆菌 CaCl2 让害虫食用烟草叶片，观察其生活状态（是否死亡）
【解析】
培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
基因工程的操作步骤：获取目的基因（基因文库、PCR、人工合成）；构建基因表达载体（含标记基因、启动子、终止子、目的基因、复制原点等）；把目的基因导入受体细胞（显微注射法、农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、钙离子处理法）；目的基因的检测和鉴定。
【详解】
（一）
（1）纤维素经过纤维素酶处理后的产物是葡萄糖。
（2）纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中，如树林中多年落叶形成的腐殖土，下列生物中，应当从生活在腐木的黑曲霉中提取，故选B。
（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所选的培养基应该以纤维素为唯一碳源，只有能分解纤维素的微生物才能存活。培养基要经过高压蒸汽法灭菌处理，可以采用稀释涂布平板法分离并进行活菌计数。
（4）酒精发酵阶段需要的菌种是真核生物，属于真核生物，进行酒精发酵需要在无氧条件下进行。
（二）
（1）若已知目的基因的碱基序列，可以通过化学合成获得该基因并进行PCR扩增，然后利用限制酶和DNA连接酶将目的基因与质粒等载体结合形成重组质粒。猪的胚胎干细胞分化程度低，全能性较高，故应该选择猪的胚胎干细胞作为受体细胞。故选A。培养该受体细胞时，胚胎成纤维细胞可以促进细胞生长（增殖），抑制细胞分化。
（2）首先利用限制酶和DNA连接酶获得重组的毒蛋白基因与Ti 质粒，然后将重组Ti质粒导入经过CaCl2处理的农杆菌细胞，筛选后利用含目的基因的农杆菌侵染植物细胞使目的基因进入植物细胞并表达。可以通过让害虫食用烟草叶片，观察其生活状态，而从个体水平鉴定烟草是否获得抗虫能力。
目的基因的检测和鉴定包括分子水平和个体水平检测，前者包括DNA分子杂交、分子杂交和抗原抗体杂交；后者如抗虫抗病接种实验）。