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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本幻灯片资料仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请参考专业资料。谢谢,一、果酒制作,1、酵母菌：真菌、出芽生殖、兼性厌氧、20度,3、流程：选果,冲洗,榨汁,发酵,酒精,2、原理：C,6,H,12,O,6,2C,2,H,5,OH+2CO,2,+2ATP,4、检验：酸性条件酒精遇重铬酸钾呈,灰绿色,第1页,例：有酿制葡萄酒两个简易装置，请分析回答,（1）果酒制作离不开酵母菌，酵母菌在有氧无氧条件下都能生存，所以，它属于_微生物。,（2）在葡萄酒自然发酵过程中，酵母菌起源是,。,（3）制作果酒，需将温度严格控制在_。制作果酒后制果醋，应将温度控制在_。,（4）葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3空间，这是因为_。,既为酵母菌大量繁殖提供适量氧气，又预防发酵旺盛时汁液溢出,兼性厌氧型,附着在葡萄皮上野生型酵母菌,1825,3035,第2页,（5）甲装置中，A液体是_，NaHCO3溶液作用是,；,葡萄汁,若用乙装置，在发酵过程中，必须进行操作是,。与乙装置相比，甲装置优点是,。,（6）果汁发酵后是否有酒精产生，可用,来检验。在酸性条件下，该试剂与酒精反应展现,。,在果酒酿造过程中，假如果汁灭菌不严格，含有醋酸杆菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸杆菌能否将果汁中糖发酵为醋酸?,。,灰绿色,不能,吸收酵母菌酒精发酵产生CO2,每隔12小时左右（一定时间）将瓶盖拧松一次,既能及时吸收（发酵产生）CO2，又能降低被杂菌污染机会,重铬酸钾,第3页,二、果醋制作,1、醋酸菌：原核、分裂生殖、异养需氧、30度,3、流程：选果榨汁,酒精发酵,醋酸发酵,2、原理：,（2）C,6,H,12,O,6,2C,2,H,5,OH+2CO,2,（1）C,6,H,12,O,6,+2O,2,2CH,3,COOH+2CO,2,+H,2,O,C,2,H,5,OH+O,2,CH,3,COOH+H,2,O,第4页,三、腐乳制作,1、毛霉：真菌、孢子生殖、异养需氧、18度,3、流程：,豆腐长毛,加盐腌制,瓶装卤汤,密封腌制,2、原理：毛霉,蛋白酶,、,脂肪酶,分解豆腐,小分子肽、氨基酸,、,甘油、脂肪酸,4、盐与酒精：抑制微生物生长,第5页,1腐乳制作有各种微生物参加，其中起主要作用是,。,2豆腐发酵主要利用了微生物产生,，经过发酵，豆腐中营养物质种类,，且更易于消化和吸收。,3在腐乳制作过程中，抑制微生物物质有盐、,、,等。,4含水量为,左右豆腐适于制作腐乳，若你完成了腐乳制作，能够从,等方面评价乳腐质量。,毛霉 蛋白酶等酶类 增多 酒,香辛料 70 色泽、口味、块形等,实例：就腐乳制作回答以下问题：,第6页,四、泡菜制作,1、乳酸菌：原核、分裂生殖、异养厌氧,3、流程：菜叶、盐水、装坛、密闭,2、原理：C,6,H,12,O,6,2C,3,H,6,O,3,+2ATP,4、测定亚硝酸盐：NO,2,-,+对氨基苯磺酸玫瑰红,第7页,专题2：微生物培养与应用,如图所表示接种方法为,，在此接种过程中接种环在火焰上灼烧,次。,第8页,一、培养基：,3、种类：液体培养基、固体培养基（琼脂）,4、选择培养基：,青霉素培养基：杀细菌、留真菌,1、概念：微生物生长营养物质,2、成份：水、无机盐、碳源、氮源,第9页,二、无菌技术,1,、消毒：温和方法杀死表面部分有害微生物,巴氏消毒、煮沸、药剂、（如：,75%,酒精）、紫外线,2,、灭菌：强烈方法杀死一切微生物、孢子和芽孢,（,1,）灼烧灭菌：接种环、试管口,（,2,）干热灭菌：玻璃器皿、金属用具,（,3,）高压蒸气灭菌：培养基、无菌水,第10页,三、微生物培养技术,1、步骤：,（1）配制培养基,（2）灭菌：高压蒸气灭菌,（3）倒平板：把培养基分装培养皿,（4）接种：分散菌种、形成菌落,方法：平板划线法、稀释涂布平板法,第11页,2、应用：,(,1)土壤中分解尿素细菌分离和计数,1选择培养基：氮源-尿素,2步骤：土壤溶液,稀释,接种,菌落计数,（2）土壤中分解纤维素微生物分离,1选择培养基：碳源-纤维素,2原理：纤维素,纤维二糖,葡萄糖,C1酶、C,X,酶,葡萄糖苷酶,纤维素+刚果红红色物纤分解透明圈,第12页,KH,2,PO,4,1.4 g,Na,2,HPO,4,2.1 g,MgSO,4,7H,2,O,0.2 g,葡萄糖,10 g,尿素,1 g,琼脂,15 g,将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100 mL,（4）转为固体培养基时，常,方法接种.,（5）以下材料或用具：培养细菌用培养基与培养皿，玻棒、试管、锥形瓶和吸管，试验操作者双手。其中需,要灭菌是：,；需要消毒是：,。（填序号）,（6）在进行分离分解尿素细菌试验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其它同学只选择出大约50个菌落。A同学试验结果产生原因可能有,（填序号）,因为土样不一样 因为培养基污染 因为操作失误 没有设置对照,（7）试验结束后，使用过培养基应该进行,处理后，才能倒掉。,（1）右表所表示培养基不能用于植物组织培养理由是,。,（2）培养基中加入尿素目标是筛选,。,（3）“目标菌”生长所需氮源和碳源分别来自培养基中,和,，试验需要振荡培养，原因是 。,缺乏植物激素,目标菌,尿素,葡萄糖,为目标菌提供氧气,稀释涂布平板法或平板划线法,和,灭菌,实例：分解尿素细菌分离与计数,第13页,一、菊花组织培养,1,、原理：植物细胞全能性,2,、步骤：,（,1,）制备,MS,固体培养基,（灭菌）,无机盐、维生素、,蔗糖,、激素,（,2,）外植体消毒,（未开花新生侧枝）,（,3,）接种、培养、移栽,脱分化,-,愈伤组织,-,再分化,-,从芽,-,诱导生根,PH5.8,、温度,18-22,、每日光照,12h,专题,3,植物组织培养技术,第14页,二、月季花药培养,1、花药选取：初花期、未开放花蕾、单核期,2、培养过程：,花粉,（脱分化）,愈伤组织,（脱分化）,（再分化）,胚状体,（分化）,丛芽,诱导生根,3、花粉发育检验：,（1）醋酸洋红法（细胞核红色）,（2）焙花青-铬矾法（细胞核蓝黑色）,第15页,接种和培养,植物体,选取水稻花药,对花蕾消毒,实例：就水稻花药培养步骤，请回答以下问题：,1.选取水稻花药应为,期,，此时细胞核由中央移向细胞一侧，花药培养成功率最高,2.经过花药培养产生单倍体植株普通有两种路径：一个是花粉经过,阶段,发育为植株，另一个是在诱导培养基上先形成,再将其诱导分化成植株,3.试管苗形成过程中，必须从培养基中取得无机盐或矿质元素和小分子有机物质等营养物质要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有,和,两类激素,单核胚状体愈伤组织细胞分裂素生长素,第16页,一、果胶酶在果汁生产中应用,1、作用：分解细胞壁、胞间层果胶，形成半乳糖醛酸,2、种类：,多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶,3、水果泥+果胶酶保温混合过滤统计果汁量,二、加酶洗衣粉洗涤效果,1、种类：碱性蛋白酶、碱性脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶,2、作用：分解污渍（蛋白质、脂肪、淀粉、纤维素）,3、酶制剂：用特殊化学物质包裹酶，使之耐酸碱、耐高 温、忍受表面活性剂,专题4：酶应用,第17页,三、固定化酶,1、原理：把酶固定在不溶水载体上，易于催化回收、重复使用,2、高果糖浆生产：,（1）原理：葡萄糖果糖（葡萄糖异构酶）,（2）固定化酶：酶固定在载体上、装入反应柱,（3）生产过程：上端注入葡萄糖，柱内酶催化，下端生产果糖浆,第18页,固定化酶和固定化细胞,是利用理化方法，把酶或细胞固定在一定空间内发挥作用技术。,四、固定化细胞,2、方法：,（1）包埋法：包埋在多孔载体里,（2）化学结正当：结合到载体上,（3）物理吸附法：吸附到载体表面,1、概念：,第19页,3、固定化酵母细胞,（1）酵母细胞活化：1g干酵母10ml水,（2）配制CaCl,2,溶液：0.05M,（3）配海藻酸钠溶液：0.7g海藻酸钠10ml水,（4）海液与酵母细胞混合成A液,（吸入注射器）,（5）固定化酵母细胞：把A液滴入CaCl,2,形成凝胶珠,（6）冲洗凝胶珠（蒸馏水）,（7）酒精发酵：凝胶珠+葡萄糖液酒精（25度）,第20页,专题5 DNA和蛋白质技术,第21页,DNA,粗提取与判定,一、试验原理,1.,血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过分而造成细胞膜和细胞核膜破裂。利用此特征可得到含有DNA溶液。,2.,DNA在氯化钠溶液中溶解度，是伴随氯化钠浓度改变而改变。DNA在,物质量浓度为0.14 molL氯化钠溶液中溶解度最低，,利用这一原理，能够使溶解在氯化钠溶液中,DNA析出,。,3.,DNA不溶于酒精溶液,，,但细胞中,一些物质则能够溶于酒精。,利用这一原理，能够深入,提取出含杂质较少DNA,。,4.,DNA遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色，所以，,二苯胺能够作为判定DNA试剂,。,第22页,二、,PCR,技术,1,、反应体系：,（,1,）模板、原料、酶、,ATP,、缓冲液,（,2,）耐高温,DNA,聚合酶（,Taq,酶）,（,3,）引物：一小段,DNA,或,RNA,2,、过程：,（,1,）变性：,95DNA,解旋,（,2,）复性：,55,引物与模板配对,（,3,）延伸：,72,合成子链,第23页,例：PCR技术(多聚酶链式反应)在DNA半保留复制前提下，利用热变性原理，在试管中进行DNA人工复制。很短时间内，将DNA大量扩增，使试验室所需要遗传物质不再受限于活生物体。,(1)PCR每次循环可分为 、三个步骤。,(2)当温度降低时，引物与模板 端结合，在DNA聚合酶作用下，引物沿模板延伸，最终合成两DNA分子，此过程中原料是 ，遵照标准是 。,(3)PCR技术必要条件，除了模板、原料、ATP、酶外以最少还需要三个条件，即：液体环境、适宜 、，前者由PCR仪自动调控，后者则靠 维持。,(4)DNA复制需要引物，其主要原因是 。,变性,复性,延伸,3,碱基互补配对标准,四种脱氧核苷酸,温度,酸碱度,缓冲液,DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链,第24页,三、血红蛋白提取和分离,1、提取：,（1）红细胞洗涤：生理盐水-除杂蛋白,（2）血红蛋白释放：蒸馏水-40%甲苯,（3）分离血红蛋白溶液：离心分层,第3层红色透明液体,（4）透析：磷酸缓冲液除杂（离子小分子）,维持血红蛋白正常特征,第25页,2、分离：,（1）凝胶色谱法,原理：依据分子量大小分离蛋白质,不一样蛋白质经过多孔凝胶通道时：,大分子旅程短、流动快,先搜集,小分子旅程长、流动慢,后搜集,（2）电泳法,原理：依据带电性质、分子大小形状不一样，电,场下迁移速度不一样，分离蛋白质,电荷性质,-移动方向、,电荷量,-移动速度,分子大小,-阻力大小,第26页,(4)洗脱用液体应尽可能与浸泡凝胶所用液体 （填“相同”或“不一样”)洗脱时对洗脱液流速要求是,(3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是 。,(2)自己制作凝胶色谱柱时。在色谱柱底部d位置相当于多孔板结构可由 替换。,a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，旅程较短，移动速度较快,尼龙网和尼龙纱,气泡会搅乱洗脱液中蛋白质洗脱次序降低分离效果,相同,保持稳定,实例：凝胶色谱技术，据图回答下列问题：,(1)a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来是 ，原因是 。,a,a,b,凝胶球,凝胶色谱柱,d,第27页,专题6：生物材料中成份提取,第28页,1、水蒸气蒸馏法：水蒸气+芳香油混合物油层和水层,3、压榨法：浸泡、漂洗、压榨、过滤、静置,2、萃取法：芳香油+有机溶剂溶液芳香油（去溶剂）,玫瑰精油：玫瑰花+清水乳浊液,NaCl：促进乳化液分层；无水Na,2,SO,4,：除水,橘皮精油：石灰水浸泡、NaHCO,3,、Na,2,SO,4,促进油水分离,胡萝卜素：橙黄色、易溶石油醚,水浴加热萃取液蒸发溶剂胡萝卜素,提取方法：,第29页,例：几个相关萃取问题：,（1）萃取剂可分为 和 两种。,(2)萃取效率主要取决于 。后受 等条件影响。,(3)萃取过程中，第一步需 ，以提升萃取效率。因为 ，所以应防止明火加热，而采取水浴加热方法。经过加热处理，-胡萝卜素溶解在萃取液中；再经 得到萃取液；经过 后，可 得到纯净-胡萝卜素。,萃取剂性质和使用量,原料颗粒大小、紧密程度、含水量、萃取温度和时间,将胡萝卜进行粉碎和干燥,有机溶剂都是易燃物,过滤,蒸馏,浓缩,水溶性,水不溶性,第30页,