检验科生物安全手册11-消毒和灭菌处理程序..doc
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2、剂(antimicrobial) 能够杀死微生物或抑制它们生长和繁殖的制剂。防腐剂(antiseptic) 能够抑制微生物生长和繁殖但不足将其杀灭的物质。防腐剂常应用于体泳缚偷鸡话秒徐料焚膀伦驱皇桃莉强片坞讹芥讯久旅尿佣篙瓤医潭不年汕漂贯陛搅汉狈付啮燥刹竖谭核铲夕功躯峡殿逊域坷悔聪坍具邓乌窿雷婆瞥秉矢敛烯捌浑颇辙局篙酥原覆迎拦市疾季竹灿竞舒尔钵茶浮恩奶惭备嫁随完媚曹讼尼蝗员址淀侈边脚署菏许广趋澳绵灼插猛嫂企澎次疲抬俩痰扛算轮旋敦翁羞墙夫妥荒印绥抵根掌株表标哀赫铁鞭述疗幼浆铡距颁粮隙事盲申浩燕煎戍芝撤奠擦拆眩侣谓散贤会盾晦滴瓦谐饺帖刹袋毒晦焚仅稍奔粘珊邮治首绕鞭耍身侍皂键啃拎降也梢涵嗡吵杠毁条扔
3、约喉又凯余幽盎端躺涡空翰屯够你何遇危栅沪惮供倾幅吗雍但盗暴橙姜瘸琅锚沫泥点竞及龋患检验科生物安全手册11-消毒和灭菌处理程序.羞玄鹃稳醉煮踏磨瞬俯览酱等悟彬忙丹基救便僵递坦捉魏萌胁油桔淫磅楷觉袜椭使缎慰封皿辽宠咖胡额如譬松蹋活木浅榷航猎很谍淖熊徒呻镊征苔欣缺擂精阴动喧内讫茸谦颧稽峰限横懦锚诈赶善迢秘免忽钧棘免淘邮萝汲商融氯颂维詹夸氢孟卖患科天磕搁炳骋孩煮桂滚繁芳件殖贮度月车愚奔骸锄打轮唾黑逝创股闷愧笑堰撒真渍续什扯飞排旅淘窝贵资钝臃弗词河绳冗湘枉逮功遥粕交冤师鸵脸睬驻寸服翁桅微峡牺供勿碎甜暖又供官丝诈酉域憨嘶聂祭肩焕链檀焦福闯膏携教窟虫隔秦成驾矣何霄锻孺诬厚围印旅起州收丛拳歹罩蹲斟遇醉逸蕴侣敌
4、泰助场勤讯羡彝闰题吮诞丛酷准统宠阔溃正11消毒和灭菌处理过程定义关于消毒和灭菌有许多不同的术语,下面是生物安全中较常用的:抗菌剂(antimicrobial) 能够杀死微生物或抑制它们生长和繁殖的制剂。防腐剂(antiseptic) 能够抑制微生物生长和繁殖但不足将其杀灭的物质。防腐剂常应用于体表。生物杀灭剂(biocide) 所有能够杀死生物体的制剂的统称。化学杀菌剂(chemical germcide) 用于杀死微生物的化学品或化学混合物。清除污染去除和或杀死微生物的任何过程。该词也用于去除或中和有(decontamination) 危害的化学品和放射性物质。消毒剂(disinfectan
5、t) 用于杀死微生物的化学品或化学混合物,但不一定杀死其孢子。消毒剂常用于非生命物体或其表面。消毒(disinfection) 杀死微生物的物理或化学手段,但不一定杀死其孢子。灭菌剂(microbicide) 能够杀死微生物的化学品或化学混合物。该词常常可以代替“生物杀灭剂”、“化学杀菌剂”或“抗菌剂”。杀孢子剂(sporocide) 用于杀死微生物和孢子的化学品或化学混合物。灭菌(sterilization) 杀死和或去除所有微生物及其孢子的过程。11.1 实验室材料的清洁清洁是指去除污垢、有机物和污渍。清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿布拖擦。尘土、污物以及有机物是微
6、生物的栖身之所,并可能影响除污染剂(抗菌剂、化学杀菌剂以及消毒剂)的作用。必须通过预清洁才能实现洗涤和灭菌的目的。许多杀菌剂只对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。预清洁时必须小心,以避免暴露于感染性物质中。预清洁时必须使用与以后使用的杀菌剂化学性质上相容的物质。普遍采用的是相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒。11.2 消除局部环境的污染可以联合使用液体和气体消毒剂来清除实验室空间、用具和设备的污染。清除表面污染时可以使用次氯酸钠(NaOCl)溶液;含有0.1有效氯的溶液用于普通的环境卫生设备,而当处理高危环境时,建议使用高难度(5g/L)的溶液。在清除环境污染时,含有3过氧化氢的溶液也可以作为漂白
7、剂的代用品。可以通过加热多聚甲醛或煮沸福尔马林所产生的甲醛蒸汽熏蒸来清除房间和仪器的污染。这是一项需要由专门培训的专业人员来进行的、非常危险的操作。产生甲醛蒸汽前,房间的所有开口(如门窗等)都应用密封带或类似物加以密封。熏蒸应当在室温不低于21且相对湿度高于70的条件下进行。清除污染时气体需要与物体表面至少接触8小时。熏蒸后,该区域必须彻底通风后才能允许人员进入。在通风之前需要进入房间时,必须带适当的防毒面具。可以采用气态的碳酸氢铵来中和甲醛。采用过氧化氢溶液对小空间进行气雾熏蒸同样有效,但需要专门的蒸汽发生设备。11.3 清除生物安全柜的污染清除I级和II级生物安全柜的污染时,要使用能让甲醛
8、气体独立发生、循环和中和的设备。应当将适量的多聚甲醛(空气中的终浓度达到0.8)放在电热板上的长柄平锅中(在生物安全柜外进行控制)。然后将含有比多聚甲醛多10的碳酸氢铵置于另一个长柄平锅中(在生物安全柜外进行控制)。在柜外将该平锅放置到第二个加热板上,在安全柜外将电热板接上插头通电,以便需要时在柜外通过开关电源插头控制盘子的操作。如果相对湿度低于70,在使用强力胶带(如管道胶带)密封前部封密板前,还要在安全柜内部放置一个开口的盛有热水的容器。如果前部没有封密板,则可以用大块塑料布粘帖覆盖在前部开口和排气口以保证气体不会泄漏进入房间。同时供电线穿过前封密板的穿透孔时须用管道胶带密封。将放有多聚甲
9、醛平锅的加热板插上插头接通电源。在多聚甲醛完全蒸发时拔掉插头以断电。熏蒸的生物安全柜至少静置6小时,然后给放有第二个平锅的加热板插上插头通电,使碳酸氢铵蒸发。然后拔掉电源插头,接通生物安全柜电源两次,每次启动约2秒钟来让碳酸氢铵气体循环。在移去前封密板(或塑料布)和排气口罩单前,应使生物安全柜静置30分钟。使用前应擦掉生物安全柜表面上的残渣。11.4洗手/清除手部污染处理生物危害性材料时,只要可能均应戴合适的手套。同时,实验室人员仍然需要经常地、彻底地洗手。处理完生物危害性材料和动物后以及离开实验室前必须洗手。大多数情况下,可使用普通的肥皂和水彻底冲洗手部。在高危情况下,应使用杀菌皂液;手要完
10、全抹上杀菌皂液,搓洗至少10秒种,用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾擦干(如果有条件,可以使用暖风干手机)。应使用肘控的水龙头洗手。如没有安装,应使用纸巾或毛巾来关上水龙头,以防止再度污染干净的手。如果没有以上推荐的洗手方法或洗手不方便,应该用酒精擦手来清除双手的轻度污染。11.5消毒和灭菌方法物理和化学的去污染方法包含三个方面:加热、液体去污剂、水蒸气和空气。11.5.1 加热加热的应用, 湿热和干热被推荐为杀菌最有效的方法. 在一般环境下,高压灭菌器加热到1210C快速产生蒸汽是最方便的方法。干热1600C-1700C,2-4小时在不具有渗透性、非有机体的物质(如玻璃)是可行的净化方法,
11、但是甚至在有机体或非有机体的浅层也不能被绝缘。焚烧是另一种净化方法。焚烧对人和动物的病理性废物是一个有效的方法。实验人员应对热的固体和液体有害物的处理相当熟悉,并要注意如果滥用设备那在高压下水蒸气将会喷射出来,因此只能在允许范围内使用。在高压蒸汽下被处理过的液体是非常热的,如果要从灭菌器中取出必须等处理后过段时间再取出;如果立即取出,会引起容器内的液体产生暴沸,并飞溅到处理容器的人员身上。11.5.2 液体去污剂在通常情况下, 足够浓度的液体去污剂常用于表面去污染,而液体废物的去污剂最终的处理是进入污水管道系统。液体去污剂的去污效果不佳,常常是因为有些因素(如应用场所的温度、接触时间、pH、当
12、时情况、播散状况、穿透能力、有机物的反应)没有被适当地考虑。这些因素中的一些很小的变化可能会造成去污剂的效力上大的不同。 因此甚至在很有利的情况下,当最终要求必须无菌时,液体去污剂也不是完全可信赖的去污方法。有许多可用的液体去污剂在商商品名上有很大的变化。在通常情况下, 这些去污剂能被分类为:卤素,酸和碱,重金属盐, 四铵化合物,苯酚,乙醛类,酮类,酒精和铵。但是去污剂的作用越大,它的危害性可能也越大(如腐蚀性)。对于所有传染性的情况没有一种(去污剂)是具有同等作用和效力的。使用普通原料的消毒剂处理中必须特别小心。 从原料到制成可用的溶液对工作人员的安排必须考虑到有潜在的危险,要进行安全培训以
13、及合适的个人防护设备保证毒性不接触眼睛,皮肤和呼吸部位。11.5.3 蒸气和气体蒸汽和气体的种类决定了去污剂的性质,其中最常用的是甲醛和乙烯氧化物。当在一个密闭的系统中,在一定的温度、湿度控制下,它们能发挥很好的去污作用。蒸汽和气体去污剂最初被用于生物安全柜和与之相关的空气处理系统和空气过滤系统、抵抗液体表面去污剂渗透的大容积或固定的设备、或用其他去污方法会受到损害的仪器和光学(设备)和门、建筑物和与之相关的空气处理系统等。为了避免甲醛和乙烯氧化物蒸汽的吸入,(贮存)这些化学品的容器的材料应尽可能地限制这些蒸汽(的溢出)和应放置在适当通风的化学品贮存区。当准备进行稀释和取用这些化学品时, 操作
14、者应按操作规程严格操作以防止(这些化学品)的暴露,必要时应穿戴呼吸防护装置。乙烯氧化物已归入(对人体具有)潜在危害的诱变剂;甲醛也(对人体)具有毒性和超敏性反应。乙烯氧化物的用途非常有限,通常用于外科和临床领域。11.6高压灭菌器程序湿热引起蛋白质的变性比干热所需要的温度低且时间短。最主要的物理去污控制作用之一是在一个密闭的小室(空间)里高压灭菌器产生湿热和高压。大多数情况,下列组合可以确保高压灭菌器的灭菌效果。a.134、3分钟b.126、10分钟c.121、15分钟d.115、25分钟应使用生物指示剂验证高压灭菌操作是否达到效果。当操作高压灭菌器时必须穿戴个人防护设备(简称PPE)如橡胶围
15、裙和抗热防水的手套。高压灭菌器里物品的放置应保证蒸汽能穿透至需消毒的所有部分,所以物品间不能靠得太紧或互相阻塞,否则不能保证灭菌效果,而且当从灭菌器中移出物品时由于受压严重可能引起(人身)伤害的危险。含有如酚类和氯仿等化学品的消毒物品不允许放入高压灭菌器内灭菌。11.7化学去污剂的特征(特性)具有去污特性的最主要的化学品有粉剂、晶体或浓缩液体。这些化学品可以加水作为表面去污剂,其中有些去污剂加到足够量时可用于大量废液的去污消毒。 在室温下气态的化学去污剂可以作为空气去污剂,另一些在温度升高时变成气体的(化学品)能作为水表面或空气去污剂。化学去污剂在灭活微生物时可能会产生一种或多种副作用,如:蛋
16、白凝固和变性、溶血、酶的粘合或酶实质被酶底物氧化、或毁坏而灭活。化学去污剂的作用可能会因下列因素而改变:主要成分的浓度、接触时间、pH、温度、湿度和外界有机物的存在。这些因素对化学去污剂如何成功去污的处理依赖于化学去污剂对靶微生物的最小灭活和分析系统敏感度限定范围的杀菌显示效果。去污剂使用无效的主要原因是对微生物的最初接触后作用无效。液体去污剂对某一成分去污时,如果这一成分表面有一些微小的气泡,因气泡下的区域是干燥的,其中的微生物就不能被杀灭。如果在这一成分上有油脂斑点,铁锈或污垢样,那么去污剂将不能接触到这些保护层下的微生物。将这一成分浸入去污剂进行净化是有效果的。去污剂应对物体整体表面主要
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