肿瘤标志物检测的影响因素PPT课件.ppt

肿肿瘤瘤标标志物志物检测检测的影响因素的影响因素 郴州市第一人民医院儿童医院郴州市第一人民医院儿童医院检验检验科科李李胜胜涛涛2015.9.181.主要内容一、一、肿肿瘤瘤标标志物的定志物的定义义二、二、理想的理想的肿肿瘤瘤标标志物志物三、影响血液和体液中三、影响血液和体液中肿肿瘤瘤标标志物志物浓浓度的因度的因素素四、四、肿肿瘤瘤标标志物志物检测检测的影响因素的影响因素2.Other Diseases其它疾病其它疾病36.6%Cardiopathy心心脏脏病病17.74%Several Tumors 多种多种肿肿瘤瘤 24.9%Cerebrovascular Diseases 脑脑血管疾病血管疾病 21.28%恶恶性性肿肿瘤、瘤、脑脑血管疾病、血管疾病、心心脏脏病病 =高死亡率！高死亡率！3.肿肿瘤早期瘤早期诊诊断早期根治的重要性断早期根治的重要性肿肿瘤是瘤是严严重威重威胁胁人人类类健康的重大疾病，死亡健康的重大疾病，死亡率高，因此人率高，因此人们们害怕害怕肿肿瘤。而防治瘤。而防治肿肿瘤的最瘤的最好好办办法是早期法是早期诊诊断、早期治断、早期治疗疗。如胃癌早期行根治如胃癌早期行根治术术，5 5年生存率达年生存率达90%90%，如，如侵及肌侵及肌层则层则下降下降为为50-70%50-70%，如侵入，如侵入浆浆膜膜则仅则仅为为8-17%8-17%。4.所以人所以人们对肿们对肿瘤瘤标标志物的志物的检测检测寄予了极寄予了极大的希望。那么大的希望。那么肿肿瘤瘤标标志物志物测测定能否达到早定能否达到早期期诊诊断的目的？能否断的目的？能否对对一般人群一般人群进进行行筛查筛查？其其临临床意床意义义到底有多大？到底有多大？评评价有多高？引起价有多高？引起了医学界的争了医学界的争议议。5.目前目前临临床床应应用中常用中常见见的的问题问题1.1.对肿对肿瘤瘤标标志物在志物在肿肿瘤瘤诊诊断中的作用断中的作用认识认识和和评评价不一致，甚至价不一致，甚至错误错误。2.2.纠纠正正“不用不用”和和“滥滥用用”两个极端。两个极端。6.一、一、肿肿瘤瘤标标志物的定志物的定义义 肿肿瘤瘤标标志物志物（tumor markertumor marker，TMTM）是指在是指在肿肿瘤的瘤的发发生和增殖生和增殖过过程中，由程中，由肿肿瘤瘤细细胞本身所胞本身所产产生生的或者是由机体的或者是由机体对肿对肿瘤瘤细细胞反胞反应应而而产产生的，反映生的，反映肿肿瘤存在和生瘤存在和生长长的一的一类类物物质质，包括蛋白，包括蛋白质质、激素、激素、酶酶（同工（同工酶酶）、多胺等。）、多胺等。可在可在肿肿瘤患者血液或体液中瘤患者血液或体液中检测检测到到肿肿瘤瘤标标志物。志物。7.二、二、理想的理想的肿肿瘤瘤标标志物志物应应具有：具有：灵敏度灵敏度100%100%；特异性特异性100%100%；器官特异性；器官特异性；与与肿肿瘤的大小或分期有关；瘤的大小或分期有关；与与预预后有关；后有关；监测肿监测肿瘤的复瘤的复发发。然而目前所然而目前所应应用的用的肿肿瘤瘤标标志物均未达到上述要志物均未达到上述要求，但如正确合理使用，仍有很大求，但如正确合理使用，仍有很大临临床价床价值值，关，关键键是要正确是要正确评评价价肿肿瘤瘤标标志物志物检测检测的的临临床意床意义义。8.9.10.三、三、影响血液和体液中影响血液和体液中肿肿瘤瘤标标志物志物浓浓度的因素度的因素1肿肿瘤的大小和瘤的大小和肿肿瘤瘤细细胞的数目：胞的数目：肿肿瘤越大瘤越大细细胞胞越多，越多，肿肿瘤瘤标标志物的志物的浓浓度越高。度越高。11.2 2肿肿瘤瘤细细胞合成和分泌胞合成和分泌肿肿瘤瘤标标志物的速度：志物的速度：肿肿瘤瘤细细胞合成和分泌胞合成和分泌肿肿瘤瘤标标志物的速度越快，血液循志物的速度越快，血液循环环中中肿肿瘤瘤标标志物的志物的浓浓度越高。度越高。3肿肿瘤瘤组织组织的血液供的血液供应应好坏：若血液供好坏：若血液供应应差，差，血液循血液循环环中中肿肿瘤瘤标标志物的志物的浓浓度低。度低。12.4肿肿瘤瘤细细胞是否有坏死和坏死的程度：胞是否有坏死和坏死的程度：肿肿瘤瘤细细胞坏死后，胞坏死后，释释放出大量放出大量肿肿瘤瘤标标志物，使志物，使肿肿瘤局部瘤局部和血液中和血液中肿肿瘤瘤标标志物的志物的浓浓度升高。度升高。5肿肿瘤瘤细细胞的分化程度和胞的分化程度和肿肿瘤的分期：瘤的分期：肿肿瘤瘤细细胞分化程度越差，胞分化程度越差，恶恶性程度越高，越晚期，性程度越高，越晚期，产产生生的的肿肿瘤瘤标标志物越多。志物越多。13.6 6肿肿瘤瘤细细胞是否表达和合成胞是否表达和合成肿肿瘤瘤标标志物：志物：有些有些肿肿瘤瘤细细胞不表达、不携胞不表达、不携带肿带肿瘤瘤标标志物，志物，则则在血液和体液中就在血液和体液中就检测检测不到。不到。7 7肿肿瘤瘤标标志物在体内的降解和排泄速度：志物在体内的降解和排泄速度：若肝、若肝、肾肾功能差，排泄速度慢，功能差，排泄速度慢，则肿则肿瘤瘤标标志物志物在体内可异常升高。在体内可异常升高。14.四、四、肿肿瘤瘤标标志物志物检测检测的影响因素的影响因素15.分析前分析前 1.1.标标本采集本采集对检测结对检测结果的影响果的影响:前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、导导尿和直尿和直肠镜肠镜检查检查后，血液后，血液PSAPSA和和PAPPAP值值可升高可升高(宜在此操作宜在此操作过过后后一周取一周取样样）；）；肝、肝、肾肾功能异常和胆道排泄不功能异常和胆道排泄不畅畅、胆汁淤滞等均、胆汁淤滞等均可造成如可造成如CEACEA、ALPALP、GGTGGT等等浓浓度增高。度增高。16.某些某些药药物会影响物会影响肿肿瘤瘤标标志物的志物的浓浓度，如抗雄激素治度，如抗雄激素治疗疗前列腺癌前列腺癌时时可抑制可抑制PSAPSA产产生，生，导导致致PSAPSA假阴性假阴性结结果。果。唾液和汗液唾液和汗液污污染染标标本可使本可使鳞鳞状上皮状上皮细细胞癌相关抗原胞癌相关抗原（SCCSCC）、）、CA 19-9CA 19-9浓浓度升高，度升高，CEACEA也会也会轻轻度升高。度升高。17.2.2.标标本保存本保存对检测结对检测结果的影响果的影响:血液血液标标本采集后本采集后应应及及时时离心，若从采血到血清离心，若从采血到血清分离的分离的间间隔隔时间时间60min60min，NSE NSE浓浓度会从血小板中度会从血小板中释释放放而增高；保存於而增高；保存於44冰箱中，冰箱中，2424小小时时内内测测定；如在定；如在2 23 3个月内个月内测测定，定，则应则应-20-20保存，避免反复保存，避免反复冻冻融。融。酶酶类类和激素和激素类肿类肿瘤瘤标标志物不志物不稳稳定，易降解，定，易降解，应应及及时测时测定或低温保存。定或低温保存。18.由于由于红细红细胞和血小板中也存在神胞和血小板中也存在神经经元特异性元特异性烯烯醇化醇化酶酶（NSENSE），因此，），因此，样样本溶血可使血液中本溶血可使血液中NSENSE浓浓度增高（度增高（RBCRBC中有大量的中有大量的NSENSE，1%1%的溶血可使血清的溶血可使血清NSENSE升高升高5ug/L)5ug/L)。黄疸血黄疸血样样本，会引起本，会引起PSAPSA的的检测值检测值升高。升高。19.分析中分析中 1.1.测测定方法和定方法和试剂对检测结试剂对检测结果的影响：果的影响：从方法学来看，从方法学来看，肿肿瘤瘤标标志物志物测测定方法很多，有定方法很多，有放射免疫放射免疫测测定法，定法，酶酶联联免疫免疫测测定法，化学定法，化学发发光免疫光免疫测测定法等，每种定法等，每种测测定方法有自己的精密度和重复性，定方法有自己的精密度和重复性，但手工操作的方法重复性但手工操作的方法重复性较较差，差，误误差比差比较较大，操作大，操作时时要特要特别认别认真；用自真；用自动动化化仪仪器器进进行行测测定，重复性好，定，重复性好，误误差小。差小。20.有研究有研究报报道，道，使用使用1212种不同的种不同的CEACEA试剂试剂盒盒检测检测某某一混合血清中一混合血清中CEACEA的的浓浓度，度，结结果其差异超果其差异超过过100%100%。导导致分析致分析间误间误差的主要原因是没有差的主要原因是没有测测定的定的标标准化，包准化，包括缺乏括缺乏统统一的抗原、抗原成分、校正品和参考方法一的抗原、抗原成分、校正品和参考方法等。等。因此，在工作中要尽量使用同一种方法，同一因此，在工作中要尽量使用同一种方法，同一种种仪仪器和同一厂家的器和同一厂家的试剂试剂盒盒进进行行测测定。定。21.2.2.交叉交叉污污染染对检测结对检测结果的影响：果的影响：当当测测定非常高定非常高浓浓度度标标本本时时，交叉，交叉污污染成染成为为一个一个导导致假阳性的潜在致假阳性的潜在问题问题。所以。所以应应不不时时地复地复查查有无有无标标本被交叉本被交叉污污染。染。22.3.3.嗜异性抗体嗜异性抗体对检测结对检测结果的影响：果的影响：大多数大多数肿肿瘤瘤标标志物的志物的测测定中常使用一定中常使用一对对鼠鼠单单克隆克隆抗体来与抗体来与肿肿瘤抗原反瘤抗原反应应，如果病人血清中存在嗜异性，如果病人血清中存在嗜异性抗体（特抗体（特别别是人抗鼠抗体），它可能在两种鼠是人抗鼠抗体），它可能在两种鼠单单克隆克隆抗体抗体间间起起“桥桥梁梁”作用，作用，导导致在无抗原的情况下，出致在无抗原的情况下，出现肿现肿瘤瘤标标志物志物浓浓度增高的假象。度增高的假象。23.分析后：分析后：1参考参考值值范范围围：不同：不同标标本如血液、尿液、胸、本如血液、尿液、胸、腹水等，必腹水等，必须须有不同的参考有不同的参考值值。不同地区、不同人群、不同方法、不同不同地区、不同人群、不同方法、不同试剂试剂和和设备应设备应建立自己的参考建立自己的参考值值范范围围。24.治治疗疗0123456月 2病人基病人基础测础测定定值值的的变变化，化，对对于于结结果的分析极有果的分析极有价价值值。故。故应监测应监测病人治病人治疗疗前、治前、治疗疗中和治中和治疗疗后各个后各个阶阶段段肿肿瘤瘤标标志物含量的志物含量的变变化，最好画一化，最好画一张肿张肿瘤瘤标标志物含志物含量的量的变变化的曲化的曲线图线图，以便，以便综综合分析。合分析。25.3一般病人的一般病人的结结果在排除果在排除检测检测方法引起的方法引起的误误差后，差后，上升或下降上升或下降25都有都有临临床价床价值值。对对于于测测定定结结果特果特别别异常异常的的标标本必本必须须复复查查，以防，以防测测定定误误差。差。4由于由于肿肿瘤瘤标标志物志物测测定其定其临临床意床意义义的特殊性，必的特殊性，必须须加加强强与与临临床的交流和沟通当改床的交流和沟通当改变肿变肿瘤瘤标标志物志物检测检测方法和方法和试剂时试剂时，必，必须须通知通知临临床，否床，否则则会影响会影响结结果的判断。果的判断。26.5必必须须知道知道肿肿瘤瘤标标志物的半寿期（手志物的半寿期（手术术后后降到一半所需的降到一半所需的时间时间），），这这有助解有助解释释某些某些肿肿瘤瘤标标志物，如志物，如AFPAFP和和hCG hCG 的的浓浓度度变变化，化，对对于于临临床床疗疗效判断有重要意效判断有重要意义义。27.主要肿瘤标志物经手术后半寿期肿肿瘤瘤标标志物志物半寿期半寿期参考范参考范围围CEA34天天10ng/mLCA19-98.5天天37UmlAFP45天天10.9ng/mLPSA2.33.2天天4ng/mLHCG1220小小时时2.9mIU/mLCA15-3815天天28U/mlCA1254.8天天35U/mlSCC20分分1.5g/LCYFRA21-14天天3.3ng/mL28.五、五、肿肿瘤瘤标标志物的志物的联联合合应应用用1.有关有关标标志物志物联联合合检测检测-提高特异性提高特异性2.2.阳性阳性标标志物志物动态观动态观察察-提高准确性提高准确性29.肿肿瘤瘤标标志物志物检测检测的目的是要达到的目的是要达到肿肿瘤的早瘤的早期期诊诊断，早期治断，早期治疗疗，因此，希望找到特异性，因此，希望找到特异性强强，敏感性高的敏感性高的肿肿瘤瘤标标志物。志物。肿肿瘤瘤标标志物的志物的联联合合应应用用有助于提高有助于提高检测检测的的敏感性。敏感性。30.一种一种肿肿瘤可分泌多种瘤可分泌多种肿肿瘤瘤标标志物，而不同的志物，而不同的肿肿瘤瘤或同种或同种肿肿瘤的不同瘤的不同组织类组织类型可有相同的型可有相同的肿肿瘤瘤标标志物，志物，而且在不同的而且在不同的肿肿瘤患者体内，瘤患者体内，肿肿瘤瘤标标志物的志物的质质和量和量变变化也化也较较大。大。因此，因此，单单独独检测检测一种一种肿肿瘤瘤标标志物，可能会志物，可能会因因为测为测定方法的灵敏度不定方法的灵敏度不够够而出而出现现假阴性，假阴性，联联合合检测检测多种多种肿肿瘤瘤标标志物有利于提高志物有利于提高检检出的阳性率。出的阳性率。为为此，此，选选择择一些特异性一些特异性较较高，可以互高，可以互补补的的肿肿瘤瘤标标志物志物联联合合测测定，定，对对提高提高肿肿瘤的瘤的检检出率是有价出率是有价值值的。的。31.一个一个肿肿瘤瘤细细胞胞经过经过1010次分裂能增殖至次分裂能增殖至10103 3个个细细胞，胞，达达1ug1ug重的微小病灶，再重的微小病灶，再经经1010次分裂，达次分裂，达10106 6个个肿肿瘤瘤细细胞，重胞，重约约1mg1mg。用生物物理方法，如用生物物理方法，如X X线线，CTCT和超声等和超声等检查检查，只，只有当有当肿肿瘤大小至少到瘤大小至少到1 12cm2cm时时才能才能发现发现，而此，而此时肿时肿瘤瘤细细胞已达胞已达1010亿亿（10109 9）甚至更多。）甚至更多。用免疫学方法用免疫学方法检测时检测时，肿肿瘤瘤细细胞需达到胞需达到1 1百万个百万个（10106 6）才可）才可检检出，但此出，但此时时可能已可能已经发经发生生肿肿瘤瘤转转移，移，而且也不是所有而且也不是所有肿肿瘤在此瘤在此时时都能被都能被检检出。出。32.常用常用肿肿瘤瘤标标志物志物联联合合检测检测的的临临床床应应用用肿肿瘤瘤 首首选标选标志物志物 补补充充标标志物志物 肺癌肺癌 CEACEA、NSENSE、CYFRA21-1CYFRA21-1 TPA TPA、SCCSCC、ACTHACTH、降、降钙钙素、素、TSATSA肝癌肝癌 AFP AFP AFU AFU、GTGT、CEACEA、ALPALP乳腺癌乳腺癌 CA15-3CA15-3、CEA CA549CEA CA549、hCGhCG、降、降钙钙素、素、铁铁蛋白蛋白 胃癌胃癌 CA72-4CA72-4 CEA CEA、CA19-9CA19-9、CA242CA242前列腺癌前列腺癌 PSAPSA、f-PSAf-PSA PAP PAP结肠结肠直直肠肠癌癌 CEACEA CA19-9 CA19-9、CA50 CA50 胰腺癌胰腺癌 CA19-9CA19-9 CA50 CA50、CEACEA、CA125 CA125 卵巢癌卵巢癌 CA125 CA125、CA724 CA724 CEA CEA、hCGhCG、CA19-9 CA19-9 睾丸睾丸肿肿瘤瘤 AFPAFP、hCGhCG宫颈宫颈癌癌 SCC SCC CA125 CA125、CEACEA、TPA TPA 膀胱癌膀胱癌 CYFRA21-1CYFRA21-1 TPA TPA、CEA CEA 骨髓瘤骨髓瘤 本本-周蛋白、周蛋白、2-2-M M 33.谢谢谢谢34.