高中生物学浙科版必修1-分子与细胞(2019)-植物细胞工程.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,植物细胞工程,中草药瑰宝,三叶青,资料：,1.,三叶青,是二倍体植物，,其全草均可入药,以地下块根药用效果,最好。,三叶青在气温,20,35,时生长较好，冬春季平均气温低于,5,10,时停止生长，低温冻害已成为影响三叶青生长发育和地理分布、制约其药材生产、影响药材品质的主要环境胁迫因子。,2.,胡萝卜,是,二倍体植物，体内,存在抗冻蛋白（,AFPs,）基因。,任务,1,：,请你,设计抗冻三叶青的培育方案。,（以流程图形式表示）,抗,冻三叶,青,任务,2,：,含,抗冻蛋白基因,的转基因细胞经植物组织培养，没有再生成植株，请分析可能的原因。,培养基,配方,：,培养,条件,：,任务,2,：,含,抗冻蛋白基因,的转基因细胞经植物组织培养，没有再生成植株，请分析可能的原因。,光照、温度、湿度、,PH,等,外因,培养基中的营养物质、生长调节剂配比等,蔗糖浓度,大量元素、,微量元素、有机成分,3 000 mL MS,培养基含,1.5 mg BA,的溶液含,0.02 mg NAA,的溶液,30 g,蔗糖,40 g,琼脂（加蒸馏水至,4000mL,）,1 000 mL MS,培养基含,0.38 mg NAA,的溶液,30 g,蔗糖,20 g,琼脂（加蒸馏水至,2000mL,）,30g/L,30g/L,30g/L,发芽培养基,生根培养基,MS,培养基,培养基比较,培养基配方,蔗糖浓度,大量元素、,微量元素、有机成分,3 000 mL MS,培养基含,1.5 mg BA,的溶液含,0.02 mg NAA,的溶液,30 g,蔗糖,40 g,琼脂（加蒸馏水至,4000mL,）,1 000 mL MS,培养基含,0.38 mg NAA,的溶液,30 g,蔗糖,20 g,琼脂（加蒸馏水至,2000mL,）,30g/L,30g/L,30g/L,发芽培养基,生根培养基,MS,培养基,培养基比较,培养基配方,与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加,，促进丛状苗基部细胞分裂形成愈伤组织并进一步分化形成,，,最终形成根。还可通过改变,MS,培养基促进生根，如,（,A,提高蔗糖,浓度,B,降低培养基,浓度,C,提高大量元素浓度,D,不添加琼脂）。,生长素,根的分生组织,B,培养基,配方,：,培养,条件,：,任务,2,：,含,抗冻蛋白基因,的转基因细胞经植物组织培养，没有再生成植株，请分析可能的原因。,光照、温度、湿度、,PH,等,外因,培养基中的营养物质、生长调节剂配比等,无菌操作,P60,若使用野生的三叶青叶片进行植物组织培养，要先进行,，依次在,70%,和,5%,中浸泡，最后在超净台中用,冲洗。,消毒,乙醇,次氯酸钠溶液,无菌水,培养基中添加,抗生素,起到,的作用。,杀灭细菌,外因,培养基,配方,：,培养,条件,：,光照、温度、湿度、,PH,等,培养基中的营养物质、生长调节剂配比等,无菌操作,内因,植物种类,取材部位,基因型,继代培养次数,尽量,选择,性状优良,、,细胞全能性表达充分的基因型,，要深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件。,任务,2,：,含,抗冻蛋白基因,的转基因细胞经植物组织培养，没有再生成植株，请分析可能的原因。,原生质体融合,脱分化,胡萝卜细胞,三叶青细胞,原生质体,原生质体,杂种细胞,再生细胞壁,愈伤组织,再,分化,杂种植物,任务,3,：获得三叶青,-,胡萝卜杂种植株的培育方案,如何制备原生质体？,植物体细胞杂交技术,收集和纯化的大致方法：,用滤网,过滤,混合液，去除大的残渣，收集滤液，滤液进行,离心,，转速的控制以将原生质体沉淀而细胞碎片等杂质仍然悬浮在上清液为准。经离心后，原生质体沉降于管底，上部为含碎片的混合液。,弃去含杂质的上清液，重新悬浮原生质体，,再次离心,，重复,3,次,。,用原生质体培养基洗涤一次，收集管底纯净的原生质体。,原生质体活性的测定方法：,染色法，渗透吸水或失水,等,去掉细胞壁,原生质体融合,脱分化,胡萝卜细胞,三叶青细胞,原生质体,原生质体,杂种细胞,再生细胞壁,愈伤组织,再,分化,杂种植物,任务,3,：获得三叶青,-,胡萝卜杂种植株的培育方案,植物体细胞杂交技术,在无菌条件下，,分别取已消毒的三叶青、胡萝卜,叶片，放入含,0.5,0.6mol/L,甘露醇（维持较高渗透压）,的,纤维素酶和果胶酶,混合,液处理，酶混合液需,通过,灭菌,，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需,在,中进行。酶解后，经,多次,获得,原生质体。,过滤,超净台,离心,纯化,去掉细胞壁,原生质体融合,脱分化,胡萝卜细胞,三叶青细胞,原生质体,原生质体,杂种细胞,再生细胞壁,愈伤组织,再,分化,杂种植物,任务,3,：获得三叶青,-,胡萝卜杂种植株的培育方案,植物体细胞杂交技术,将原生质体进行培养，重新长出,，形成胚性细胞。此时，应该,培养基中甘露醇浓度，以利于胚性细胞继续培养形成细胞团,，然后经,胚胎发生,途径或,器官发生,途径形成再生植株。,细胞壁,降低,任务,3,：获得三叶青,-,胡萝卜杂种植株的培育方案,植物体细胞杂交技术,方法,1,：,利用,异源植物在试管内进行,，对其产生的胚进行培养产生杂种植株。,受精,方法,2,：,试管受精,培养,植物细胞（包括原生质体），,借助,方法,，将外源遗传物质（,DNA,）导入受体细胞（包括原生质体受体）中，或,通过,、,等将,不同来源的遗传物质重新组合，再通过对这些转基因细胞或重组细胞进行培养，获得具有特定性状的新植株。,植物细胞工程的概念和操作过程,基因工程,显微注射,细胞融合,植物细胞工程,概念,快速繁殖,细胞培养生产有用物质,应用,器官发生,胚胎发生,分生组织,培养,基因工程,细胞融合,胚胎技术,新品种,脱毒,