DB14∕T 1353-2017 辣椒抗疫病田间鉴定技术规程.pdf
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1、ICS65.020B 16DB14山西省地方标准DB 14/T 13532017辣椒抗疫病田间鉴定技术规程2017 - 05 - 30 发布2017 - 07 - 30 实施山西省质量技术鉴定局发 布DB14/T 13532017I目次前言.II1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14病原菌接种体的制备.15抗病性鉴定圃设置.26接种.37病情调查.38抗性评价.49鉴定记载表.4附录 A(资料性附录)辣椒疫霉病菌(Phytophthoracapsici).6DB14/T 13532017II前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由山西省农业科学院提出并归口。本
2、标准起草单位:山西省农业科学院植物保护研究所。本标准主要起草人:周建波、殷辉、赵晓军、吕红、秦楠、牛国飞、原宗英。DB14/T 135320171辣椒抗疫病田间鉴定技术规程1范围本标准规定了辣椒抗疫病田间鉴定的术语和定义、病原菌接种体制备、抗病性鉴定圃设置、接种、病情调查、抗病性评价和鉴定记载表。本标准适用于各种辣椒资源对疫病抗性的田间鉴定及评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。NY/T 2060.1 辣椒抗病性鉴定技术规程 第1部分:辣椒抗疫病鉴定技
3、术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1辣椒疫病由辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)所引起的一种卵菌病害,主要危害叶片、茎杆及果实,茎基部、茎节分叉处最容易发病。受危害植株根部呈褐色,后期整个辣椒植株枯死;在近地面以及茎节分叉处最容易受危害。病斑初期呈水渍状、暗绿色,扩展一周后,病茎部缢缩、黑褐色,病部以上茎叶枯萎,最后整株死亡。3.2抗病性田间鉴定将病原菌孢子或者菌丝直接接种到田间植株的叶片、果实、茎杆及根等部位,依据植株的发病情况进行抗病性鉴定。3.3菌饼从菌落边缘用打孔器打取的带有菌丝的菌块。4病原菌接种体的制备4.1病原物分离DB14/T 135320
4、1724.1.1培养基V8培养基:V8蔬菜汁100 mL,碳酸钙 0.2 g,琼脂粉15 g,用蒸馏水定容至1 000 mL,121 高压湿热灭菌20 min。燕麦培养基:将燕麦片30 g用蒸馏水煮沸60 min,加琼脂粉15 g,双层纱布过滤,用蒸馏水定容至1 000 mL,121 高压湿热灭菌20 min。4.1.2主要仪器及设备光学显微镜、恒温培养箱、超净工作台。4.1.3分离病原物采集发病植株叶片、茎基部及病果的典型病斑。从病斑边缘病健交界处剪取约0.5 cm0.5 cm大小的病组织,用75%乙醇消毒90 s,然后用无菌水冲洗3次,用灭菌滤纸将水吸干,置于V8培养基上,25培养箱中培养
5、。4.2病原菌纯化和鉴定将辣椒疫霉菌(P.capsici)培养2 d,从菌落边缘挑取挑取单菌丝接种至V8培养基上,25 培养5 d。辣椒疫霉菌(P.capsici)形态学特征鉴定方法参见附录A。4.3病原菌的扩繁和保存4.3.1扩繁病原物在接种前10 d繁殖辣椒疫霉菌,选取已保存的菌种接于90 mm含燕麦培养基的培养皿(直径9 cm),25 黑暗培养7 d。在菌落离培养皿边缘10 cm处用5 mm灭菌打孔器打菌饼备用。4.3.2保存病原菌制作1.5 mL Eppendorf 离心管燕麦培养基小斜面,将待保存菌株接种至斜面,25 培养待菌丝长满斜面后,将Eppendorf 离心管放置4 8 保存
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