miRNA及其发展和应用PPT课件.ppt
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1、miRNAmiRNA及其研究和应用谢东君 2015202030079RNA在生命过程中的作用mRNA合成蛋白质的蓝图rRNA合成蛋白质的工厂tRNA合成蛋白质的搬运工miRNA?被关注的RNA研究2000年,RNAi的研究进展被Science杂志评为重大科技突破。2001年,RNAi作为当年最重要的科学研究成果之一,再次入选“十大科技突破”。2002年12月20日,Science杂志将“Small RNA&RNAi”评为2002年度最耀眼的明星。同时,Nature杂志亦将Small RNA评为年度重大科技成果之一。2003年,microRNA的研究第四次入选“十大科技突破”。2005年,mic
2、roRNA的研究第五次入选“十大科技突破”。2006年,RNAi获得当年的诺贝尔生理学或医学奖。并且microRNA的研究第六次入选“十大科技突破”。RNA研究的突破性进展,是生物医学研究领域近20年来,可与HGP相提并论的最重大成果之一。什么是miRNAmiRNA的发现miRNA的产生过程miRNA的作用机制miRNA的特点与其他寡核苷酸相比,主要有三点不同:1.没有开放阅读框架及蛋白质编码基因的特点2.通常的长度约为22个核苷酸,但在3端可以有几个碱基的长度变化3.成熟的miRNA5端有一磷酸基团,3端为羟基miRNA的生物学功能miRNA的保守性miRNA 靶基因的寻找 尽管数百种miR
3、NA在最近几年中被发现了,但是只有非常少量的miRNA被确定其作用,许多其他的miRNA基因的作用还没有被阐明。因此发现miRNA的作用靶点成为了解其在不同的生理过程中的功能的关键。目前主要利用生物信息学方法和生物学实验方法寻找 miRNA 的靶基因。生物信息学方法寻找miRNA 靶基因生物信息学方法主要是利用某种算法对靶基因样本进行评分及筛选。主要遵循以下几个常用原则:1.miRNA 与其靶位点的互补性2.miRNA 靶位点在不同物种之间的保守性3.miRNA-mRNA 双链之间的热稳定性4.miRNA 靶位点处不应有复 杂二级结构5.miRNA 5端与靶基因的结合能力强于 3端常用的算法有
4、:miRanda、TargetScan、RNAhybrid、PicTar、miTarget等生物学实验方法寻找miRNA 靶基因由于计算机模拟在预测 miRNA 靶基因时存在一定的局限性,因此很多学者也希望能够利用生物学实验方法直观地寻找 miRNA 靶基因。一般可以从两个水平去寻找miRNA靶基因1.从 mRNA 水平寻找 miRNA 靶基因 2.从蛋白质水平寻找 miRNA 靶基因 从 mRNA 水平寻找 miRNA 靶基因基因芯片法将 miRNA 成熟体双链或腺病毒载体转染至细胞中,使得 miRNA 在细胞中过表达,之后利用基因芯片分析 mRNA的变化以找出相应 miRNA 的靶基因。由
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