微生物-金黄色葡萄球菌.ppt
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1、闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系一、生物学特性菌体形态及培养特征革兰氏阳性球菌,直径为0.5-1.0微米,镜检时呈单个、成对、四联或不规则的簇群,如葡萄状,故称为葡萄球菌。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系大多数菌株产生类胡罗卜素,使细胞团呈现出深橙色到浅黄色,色素的产生取决于生长的条件,故称金黄色葡萄球菌。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系大多数菌株最适生长温度30-37,最适pH为7.0-7.5;兼性厌氧菌,在好氧条件下生长最好;可在15%氯化钠和40%胆汁中生长。一般用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉
2、汤增菌或7.5%氯化钠肉汤增菌。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系 所有的毒株产生血浆凝固酶,人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。金黄色葡萄球菌产生磷脂酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶等,大多数菌株可水解天然的动物蛋白并释放脂肪酸。在BP平板产生磷脂环。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系生物学特性 致 病 性 金黄色葡萄球菌为条件致病菌,菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶:a.溶血素:外毒素,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死;在血平板培养出现溶血环。b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞;c.
3、血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞噬作用。d.脱氧核糖核酸酶(DNA酶)e.肠毒素:引起急性胃肠炎。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,临床表现多种多样,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系葡萄球菌皮肤感染闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系 葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病,可引发不同程度的急性胃肠炎症状
4、,恶心、呕吐最为突出而且普遍,腹痛、腹泻次之。当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品,如牛奶和奶制品、肉、蛋等,在温度条件适宜时,经8-10小时即可相当数量的肠毒素。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系二、检验程序与操作方法根据中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准:食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验 GB 4789.10-94 金 黄 色 葡 萄 球 菌 检 验闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系检样25g(ml)+225ml灭菌生理盐水国标:金黄色葡萄球菌检验程序直接计数方法增菌培养方法Baird-parker(贝尔德-
5、帕克)0.3ml、0.3ml、0.4ml75氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤 血平板血平板,Baird-parker涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验报 告36 1 24hr 36 1 24hr 36 1 24hr 闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系检验程序 增菌培养 利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性(可耐受15%的氯化钠),用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤或7.5%氯化钠肉汤增菌。置37摄氏度培养箱培养24小时。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系检验程序 分离培养血平板:金黄色葡萄球菌可以产生溶血素,因此在血平板上产生明显的溶血环。典型菌落:呈金
6、黄色,有时也为白色,大而突起,圆形,不透明,表面光滑,有溶血环。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系大而突起,圆形,不透明,表面光滑,有溶血环闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系血平板制作成分:豆粉琼脂(或营养琼脂)100mL,脱纤维羊血(或兔血)5-10mL。制法:加热融化琼脂,冷至50,以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血,摇匀,倾注平板。或分装灭菌试管,摆成斜面。BPBP(贝尔德(贝尔德-帕克)平板:帕克)平板:胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和矿物元素矿物元素丙酮酸钠
7、是一种生长促进剂丙酮酸钠是一种生长促进剂亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性,并使菌落产生黑色性,并使菌落产生黑色卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。用。闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系检验程序分离培养闽北职业技术学院食闽北职业技术学院食品与生物工程系品与生物工程系 在BP平板上典型菌落为:灰色到黑玉色,圆形,光滑突起,湿润,直径2-3mm,边缘常为淡色(米黄
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