医学寄生虫——阿米巴鞭毛虫.pptx

Amoeba and flagella 阿米巴和鞭毛虫 .Entamoeba histolytica(E.histolytica)溶组织内阿米巴 .Giardia lamblia(G.lamblia)兰氏贾第鞭毛虫 .Trichomonas vaginalis(T.vaginalis)阴道毛滴毛虫 .Leishmania donovani(L.donovani)杜氏利什曼原虫Purpose and Requirements .Master morphological features of trophozoite and cyst of Entamoeba histolytica and Giardia lamblia;Master movement characteristics of trophozoites;.Master morphological features and movement characteristics of Trichomonas vaginalis;.Familiar with differtiations of E.histolytica cyst and other non-pathogenic amoebae cyst;.Familiar with iodine stain for cyst;.Understanding Balantidium coli;.Understanding morphological features of amastigote of Leishmania donovani and sandfly.1.1.独立观察玻片标本独立观察玻片标本 No.原原-1至No.原原-4：2.示教内容学习：1）图片及视频示教：2）镜下示教标本：3.完成实验操作：直接涂片法观察活动的阿米巴滋养体；直接涂片法观察活动的阴道毛滴虫；碘染色法观察包囊 4.完成实验报告：本次课学习任务本次课学习任务 1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4拿到玻片标本后请马上检查核对是否有漏、重复或破损，有问拿到玻片标本后请马上检查核对是否有漏、重复或破损，有问题的请马上举手报告老师！题的请马上举手报告老师！No.原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschliiNo.原-2:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 G.lamblia trophozoite(仅双号同学有，仅双号同学有，2 2个同学共用个同学共用1 1张张)No.原-3:蓝氏贾第鞭毛虫包囊 G.lamblia cystNo.原原-4:阴道毛滴虫滋养体 T.vaginalis trophozoite 注注意：在观察玻片标本前，先将显微镜光线调到最强！在观察玻片标本前，先将显微镜光线调到最强！本次课只使用本次课只使用1010倍镜和油镜；倍镜和油镜；No.No.原原-4-4:阴道毛滴虫滋养体T.vaginalis T.vaginalis trophozoitetrophozoiteAxostyleAxostyle 轴柱轴柱4 anterior 4 anterior flagellum 4flagellum 4根前鞭毛根前鞭毛Lateral flagellumLateral flagellum and and Undulating Undulating membrane membrane 波动膜波动膜 NucleusNucleus 1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4先10倍镜下调出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构要求拍照姬姆萨染色法(Giemsa staining method)No.No.原原-3-3:蓝氏贾第鞭毛虫包囊 G.lamblia G.lamblia cystcystSteined Steined with iron-hematoxylinwith iron-hematoxylinCyst wall 囊壁Nucleus 核Axostyle 轴柱Median body 中体.Cyst.Cyst wall:wall:.Axostyle.Axostyle:.Median.Median body:body:.Nucleus.Nucleus:1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4先10倍镜下调出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构要求拍照 No.No.原原-2-2:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 G.lamblia G.lamblia trophozoitetrophozoiteAnterior flagellum 前鞭毛Ventral flagellum 腹鞭毛Posterior flagellum 后鞭毛Caudal flagellum 尾鞭毛Adhesive disc 吸盘NucleusMedian body 中体Axostyle 轴柱 1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4先10倍镜下调出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构要求拍照姬姆萨染色法(Giemsa staining method)No.No.原原-2-2:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 G.lamblia G.lamblia trophozoitetrophozoiteSteined Steined with iron-hematoxylinwith iron-hematoxylinAdhesive disc and nucleus 吸盘和核Median body 中体Axostyle 轴柱 1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4先10倍镜下调出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构要求拍照 No.No.原原-1-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystCyst of E.histolytica,E.coli,E.of E.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschlii nana,I.buetschlii (铁苏木素染色)Chromatoid bodyChromatoid body拟染色体Glycogen vacuoleGlycogen vacuole糖原泡 Immature cyst Immature cyst 未成熟包囊nucleusnucleusnucleusnucleus Mature cyst Mature cyst 成熟包囊 E.histolytica E.histolytica cystcyst溶组织内阿米巴包囊溶组织内阿米巴包囊要求拍照：未成熟包囊先10倍镜下找出焦距平面，然后转油镜下观察细微结构 1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4 E.coli E.coli cyst cyst 结肠内阿米巴包囊mature cyst(8 nucleus)immature cystnucleusnucleuschromatoid chromatoid bodybody(Slim with taper(Slim with taper sharp end)sharp end)1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4 No.No.原原-1-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystCyst of E.histolytica,E.coli,E.of E.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschliinana,I.buetschlii E.nana E.nana cystcyst 微小内蜒阿米巴 Very small,6-12um,oval,only 4 nuclei 1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4 No.No.原原-1-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystCyst of E.histolytica,E.coli,E.of E.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschliinana,I.buetschlii I.buetschlii I.buetschlii cystcyst 布氏嗜碘阿米巴Stained with Iron-hematoxylinStained with IodineGlycogen vacuole糖原泡(very large)nucleus 1.Observation of glass slide No.原原-1至No.原原-4 No.No.原原-1-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊CystCyst of E.histolytica,E.coli,E.of E.histolytica,E.coli,E.nana,I.buetschliinana,I.buetschlii 2.示教内容学习示教内容学习:1）图片及视频示教：Nucleus 核Erythrocyte 红细胞NucleusErythrocyte Stained with Iron-hematoxylin E.histolyticaE.histolyticaE.histolytica tr tr trophozoiteophozoiteophozoite 2.示教内容学习示教内容学习:1）图片及视频示教：Amastigote(Leishman-Donovan body)Amastigote(Leishman-Donovan body)无鞭毛体无鞭毛体(利杜体利杜体)Kinetoplast动基体Basal body 基体Rhizoplast 根丝体Nucleus 核Amastigotes Amastigotes parasitize in mononuclear cell-parasitize in mononuclear cell-macrophagemacrophage(单核单核-巨噬细胞巨噬细胞)of humanof human 2.示教内容学习示教内容学习:S S Sandflyandfly(白蛉白蛉)驼背、眼大、多毛、翅竖1）图片及视频示教：2.示教内容学习示教内容学习:1）图片及视频示教：Balantidium coliBalantidium coliBalantidium coli tr tr trophozoite ophozoite ophozoite 结肠小袋纤毛虫滋养体结肠小袋纤毛虫滋养体Cytopyge 胞肛Macronucleus 大核Sytostome 胞口Cytopharynx 胞咽Food vacuole 食物泡Micronucleus 小核Cilia 纤毛 2.示教内容学习示教内容学习:1）图片及视频示教：Balantidium coliBalantidium coliBalantidium coli tr tr trophozoite ophozoite ophozoite 结肠小袋纤毛虫包囊结肠小袋纤毛虫包囊Round or near-round,diameter 40-60umCyst wall 囊壁Macronucleus 大核知识花絮:染色方法1 铁苏木素染色(Iron-hematoxylin staining methodron-hematoxylin staining method)主要用于各种阿米巴和蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊的鉴定，具有操作简单，现象明显的特点，呈墨蓝色。2 碘液染色(Iodine staining method)可以使真核细胞的细胞核呈黄褐色，所以,加碘液可以用来观察细胞核。3 姬姆萨染色法(Giemsa staining method)姬姆萨染液(天青色素、伊红、次甲蓝的混合液)的染色法。最适于血液涂抹标本,用以染血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等的染色，呈祡红色。4 瑞氏染色法(Wrights staining method)用瑞氏染色液对细菌进行染色以便进行显微镜检查的染色法。瑞氏染色液是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。5 瑞氏-姬姆萨染色法(Wright-Giemsa staining method)主要应用于血液和骨髓涂片染色，它是利用Romanowwsky Stain技术原理改良而成的。标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后，各类细胞呈现不同的着色，红细胞呈浅红色，白细胞的核着色非常明显，易于对白细胞进行分类。6 苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法 简称HE染色方法，是生物学和医学的细胞与组织学最广泛应用的染色方法。教学和研究都是用HE染色方法观察正常和病变组织的形态结构。2.示教内容学习示教内容学习:1）图片及视频示教：Iodine stain Iodine stain 碘液染色法碘液染色法 2.示教内容学习示教内容学习:1）图片及视频示教：Iron-hematoxylin stain Iron-hematoxylin stain 铁苏木素染色法铁苏木素染色法2 2）镜下示教：）镜下示教：请拿上实验指导移步到示教显微镜，观察时请勿请拿上实验指导移步到示教显微镜，观察时请勿移动视野！移动视野！.溶组织内阿米巴滋养体和包囊 E.histolytica trophozoite and cyst.结肠内阿米巴包囊 E.coli cyst.微小内蜒阿米巴包囊 E.nana cyst.布氏嗜碘阿米巴包囊 I.buetschlii cyst.蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊 G.lamblia trophozoite and cyst .阴道毛滴虫 T.vaginalis trophozoite .杜氏利什曼原虫利杜体 Amastigote(Leishman-Donovan body).白蛉 S Sandfly .结肠小袋纤毛虫滋养体 Balantidium coliBalantidium coli tr trophozoite ophozoite .结肠小袋纤毛虫包囊 Balantidium coliBalantidium coli tr trophozoite ophozoite 2.示教内容学习示教内容学习:3.Operation and observation 操作和观察碘液观察活动阿米巴观察碘染包囊.直接涂片法观察活动阿米巴滋养体和碘染色法观察包囊：操作前先看“碘液染色法”视频；取1张载玻片，先用吸管吸取阿米巴培养基，在载玻片左右各滴1滴，然后在其中1滴另滴加1滴碘液（如右图），加盖玻片，先10镜下观察，然后转40倍镜观察；用过的载玻片请放到指定的铝锅内！3.Operation and observation 操作和观察.直接涂片法观察活动的阴道毛滴虫：用吸管吸取阴道毛滴虫培养基，滴1滴玻片上，加盖玻片即可，先10镜下观察，光线稍弱，然后转40倍镜观察；用过的载玻片请放到指定的铝锅内！3 3）提交实验报告方法：）提交实验报告方法：双击“教师机”图标打开文件夹“上传”打开你本人所在组别对应的文件夹，如“1组”粘贴实验报告。2 2）实验报告命名格式：）实验报告命名格式：学号姓名-4，例如 20070001张三-4 3.3.实验报告要求及提交实验报告要求及提交：1 1）本）本次实验报告内容次实验报告内容:要求要求 4 4 张图片张图片溶组织内阿米巴未成熟包囊 E.histolyticaI mmature cyst 蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 G.lamblia trophozoite 蓝氏贾第鞭毛虫包囊 G.lamblia cyst 阴道毛滴虫滋养体 T.vaginalis trophozoite 离开实验室前做好以下工作离开实验室前做好以下工作：1.清点玻片标本，按顺序摆放整齐并放到指定地方；2.清理桌面，包括清理垃圾、将油瓶、擦镜液和擦镜纸归位，摆放整齐；3.本次课特别强调用擦镜纸沾擦镜液擦干净油镜头和高倍镜头！4.整理好显微镜、电脑关机；5.将凳子收入桌子下面；5.值日生留下做实验室清洁工作。1.简述溶组织内阿米巴的致病机制。2.如何用病原学方法诊断急性阿米巴痢疾病人？检查时应注意什么？3.阴道毛滴虫是怎样传播的，如何进行防治？4.蓝氏贾第鞭毛虫滋养体引起腹泻的原因？5.简述黑热病的贫血机制。课后思考：课后思考：患者，女，28岁，浙江宁波人，已婚，患者自农村来沪做保姆已有2年，自觉劳累后腰酸，白带多，有时伴黄色带有泡沫伴黏液，阴道经常瘙痒，时闻腥臭味，月经正常，但经量较大。妇科检查：外阴部有红肿，子宫颈糜烂度，阴道涂片查到大量阴道毛滴虫，还有红细胞、白细胞和上皮细胞，遵医嘱服灭滴灵并外用栓剂后，症状好转，但年终探亲返回后症状又出现，再次服药后得以痊愈。问题：1阴道毛滴虫传播的因素有哪些？2.患者后来为何又有症状出现？患者应如何防治？课后讨论课后讨论 Case 1 患者，女，6岁，因“腹泻9天，发烧、腹痛及脓血便7天”入院，发病前8天有跌入粪坑史。查体：体温38，全腹有轻压痛，腹中部可触及移动的肠样肿块，入院数日后大便呈果酱色，腹痛加重，2日后出现全腹痛伴肌紧张，剖腹探查，见右下腹有一炎性肿块，盲肠坏疽,有3cm2cm的穿孔灶，阑尾已坏疽脱落。术后采用抗阿米巴治疗，因治疗无效，术后46小时死亡。尸检：腹腔右侧有散在小脓肿20余处，结肠、空肠、回肠均可见溃疡，以结肠为甚且深，在黏膜下找到阿米巴滋养体。问题：1这小孩是如何感染溶组织内阿米巴的?2.典型的阿米巴痢疾患者有何症状？粪便有何特点?3.溶组织内阿米巴病变的部位多发生在何处？为什么会引起肠穿孔？课后讨论课后讨论 Case 2