全自动凝胶净化作业指导书.doc

全自动凝胶净化-浓缩-固相萃取系统的操作流程

1 主要用途
用于复杂基质中分子量差别较大的物质的分离、净化，以提高分析的灵敏度与准确性，同时延长色谱柱使用寿命的样品前处理系统。可进行预浓缩-GPC净化-浓缩在线联机，各部分也可单独使用。
2 操作规程
2.1 准备
检查各个部位连接是否正常，凝胶净化柱安装是否正确，样品管支架摆放位置是否正确、平稳。
2.2 开机：将仪器及电脑各部分的电源打开（原则上先开启GPC的电源），待检测器自检通过(大约6分钟)后再打开仪器的工作站，工作站显示联机通讯成功。（检查工作站中样品瓶的支架位置设置是否与仪器摆放支架统一）。
2.3 排气泡：如发现试剂瓶或连接管路中存在气泡，可将输液泵的放空阀打开后，使用洗耳球将气泡赶出，必要情况下可以运行输液泵，帮助将气泡快速流出。待气泡排出后，请务必将放空阀拧紧关闭。
2.4 设定方法：点击工作站左上角的【功能导航】选择【方法管理】后点【go】；
2.4.1 GPC方法：在左上方【方法配置】项的下方分别设置【方法名称】，然后在【Method Type】中选择【GPC】后点击【确定】按钮，然后点击弹出框中的【是（Yes）】按钮，然后单击左侧弹出的【GPC】图标，依次设置运行时间、检测波长、进样模式、进样体积、清洗体积、清洗次数、输液泵参数中的“Speed”项和收集模式，然后点击左侧中间位置的【保存当前】按钮后，再点击右上方的【保存】按钮。
2.4.2 浓缩方法：在左上方【方法配置】项的下方分别设置【方法名称】，然后在【Method Type】中选择【Concentration】后点击【确定】按钮，然后点击弹出框中的【是（Yes）】按钮，然后单击左侧的【Con.】图标，依次设置相关的浓缩方式、定容方式和浓缩参数等，然后点击左侧中间位置的【保存当前】按钮后，再点击右上方的【保存】按钮。
2.4.3 固相萃取方法：在左上方【方法配置】项的下方分别设置【方法名称】和“Method Type”中选择“SPE”然后点击“确定”按钮，然后点击弹出框的“是（Yes）”按钮，然后单击左侧的“SPE”项，然后根据实验需求分别选择左侧中间位置的【润洗“Condition”】、【样品“Sample Loading”】、【淋洗“Flow Path Rinsing”】、【洗脱“Elution”】、【清洗“Washing”】和【氮吹“N2 Purging”】项，选中其中一项后点击右侧的【→】选中后分别设置“收集次数”、“溶剂类型”、“体积”、“流速”和“时间”（其中除氮吹外其他几项可不设置时间）。其中【↑】【↓】可对编辑好的项目进行上下移动，【Del】可删除选中的项。
2.4.4 依据上述方法可分别编辑相应的组合方法。
2.5 批表设置： 点击工作站下方的【新建批表】按钮，然后，一次输入样品名称、编号、方法、进样位置、收集位置；配置浓缩仪的系统需要设置浓缩参数。
2.6 谱图：请将仪器配置的加密狗插入电脑的USB口，在【功能导航】中选择【谱图处理】然后点【go】进入谱图工作站界面。
2.7 摆放样品：请将样品及干净的收集瓶按照设定的方法整齐的摆放在液体工作站的相应的样品瓶支架上。
2.8 初始化： 点击工作站左侧的【初始化】按钮，待检测器信号值平稳后，工作站的左侧按钮由“灰色”恢复成“黑色”后在进行其他操作。
2.9 运行： 点击工作站的【批运行】或【单步运行】按钮，仪器则按照设定的方法进行样品处理工作。
2.10 关机操作
使用完仪器后，请点击工作站左侧下方的【手动操作】按钮，选择【GPC信息】项，点击【输液泵】中的【停止】按钮，将输液泵关闭后，再关闭工作站，然后分别将仪器及电脑的电源关闭。
3 注意事项
3.1 流动相：请按照凝胶净化色谱柱的规格要求配置相应的的流动相，流动相应满足实验过程需求，需要使用0.45微米的滤膜过滤并超声脱气混合均匀。如果实验样品的数量很多，应该一次性配好流动相充足的量，避免中途在往试剂瓶里添加。否则基线不稳。
3.2 样品或标准品制备：样品需使用流动相溶解并使用针式过滤器（0.45微米）过滤，装入样品瓶，将瓶垫、瓶盖平整地盖上并拧紧。
3.3 在使用自动进样、收集装置时，请您在使用过程中不要随便移动、变更样品盘上的样品架，因为该位置为我们的工程师再给您安装时以调整好了的，否则将会使进样针折断等事故发生。在实验结束以后，请尽可能的对其做一些防尘措施，以便延长其使用的寿命。
4 仪器维护
4.1 定期检查各电源线、连接管路线、接头是否老化，发现老化现象应及时维修。
4.2 仪器长时间不用时应将凝胶色谱柱取下，用特有的聚四氟堵头将其两端封好，在下次使用时在安装上，然后以其所使用的流动相冲洗十分钟以上（使其基线达到平稳）后，再进行使用。或定期运行仪器，保证净化柱内充满溶液。
4.3 发现浓缩杯内壁附有污浊物时应及时拆卸清洗，装回原位后，应进行定容体积校准。
5 期间核查
仪器每年验证一次，在验证后半年内做一次期间核查。
5.1 检查各电源线、各连接管路是否有老化、漏电及漏液现象。
5.2 输液泵流速是否稳定。
5.3 凝胶净化柱是否正常。
5.4 浓缩定容体积是否准确。
5.5 做好期间核查记录。