学术讨论—二细菌的生长繁殖消毒与灭菌.ppt
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1、细细菌菌感感染染的的检检测测(jin c)第一页,共四十七页。实验二实验二 细菌的生长繁殖细菌的生长繁殖(fnzh)、消毒与灭消毒与灭菌菌一、讨论:一、讨论:o1 1、消毒灭菌的方法、实验室生物安全、消毒灭菌的方法、实验室生物安全o2 2、细菌的人工培养、细菌的人工培养(piyng)(piyng):培养:培养(piyng)(piyng)基、细菌培养基、细菌培养(piyng)(piyng)技术、细技术、细菌生长现象菌生长现象二、示教:二、示教:o1 1、消毒灭菌的常用方法、消毒灭菌的常用方法o2 2、药敏实验、药敏实验o3 3、培养基制备、种类、用途、培养基制备、种类、用途o4 4、细菌生长现象
2、观察、细菌生长现象观察三、操作:细菌的接种(液体、半固体、固体培养基)三、操作:细菌的接种(液体、半固体、固体培养基)第二页,共四十七页。(一)消毒灭菌方法、实验室生物一)消毒灭菌方法、实验室生物(shngw)(shngw)安全安全1.1.常用术语常用术语o消毒消毒(disinfection)(disinfection):利用理化因素杀死物体或环境中病原利用理化因素杀死物体或环境中病原(bngyun)(bngyun)微微生物的措施。并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原生物的措施。并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原(bngyun)(bngyun)微生物微生物o灭菌灭菌(sterilization)
3、(sterilization):利用理化因素杀死物体上所有微生物的过利用理化因素杀死物体上所有微生物的过程,包括芽胞。程,包括芽胞。o无菌操作(无菌操作(aseptic technique)aseptic technique):防止细菌进入人体或其他物品防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。的操作技术。第三页,共四十七页。(2 2)常用)常用(chn yn)(chn yn)方法方法o物理物理消毒消毒(xio d)(xio d)灭菌法:灭菌法:热力灭菌法:干热灭菌法、湿热灭菌法热力灭菌法:干热灭菌法、湿热灭菌法 辐射杀菌法:电离辐射辐射杀菌法:电离辐射-X-X、射线射线 非电离辐射非电离辐射-紫
4、外线、日光、微波紫外线、日光、微波 滤过除菌法:滤过除菌法滤过除菌法:滤过除菌法 干燥低温抑菌法:抑菌和灭菌干燥低温抑菌法:抑菌和灭菌o化学化学消毒灭菌法:消毒灭菌法:o生物消毒灭菌法生物消毒灭菌法第四页,共四十七页。热力(rl)灭菌法o干热灭菌干热灭菌(mi jn)(mi jn)n焚烧、烧灼、焚烧、烧灼、红外线红外线n干烤(干烤(160170/2h160170/2h)第五页,共四十七页。热力(rl)灭菌法o湿热灭菌湿热灭菌n巴氏消毒法:巴氏消毒法:6230min 6230min 或或72 30sec72 30secn煮沸法煮沸法 30min 30minn流动流动(lidng)(lidng)蒸
5、气消毒法蒸气消毒法n间歇蒸气灭菌法间歇蒸气灭菌法 n高压蒸气灭菌法:高压蒸气灭菌法:121,1.05Kg/cm121,1.05Kg/cm2 2(15(15个大个大气压气压),20min),20min第六页,共四十七页。辐射辐射(fsh)杀菌法杀菌法电离辐射:电离辐射:X X、射线射线n原理原理:通过产生通过产生OHOH、O O2 2等活性游离基进行杀菌等活性游离基进行杀菌(sh jn)(sh jn);通过破坏;通过破坏DNADNA的结构导致菌体死亡的结构导致菌体死亡非电离辐射:非电离辐射:紫外线紫外线、微波、超声波、日光、微波、超声波、日光第七页,共四十七页。辐射辐射(fsh)杀菌法杀菌法:非
6、电离辐射:非电离辐射.紫外线:紫外线:200 200 300nm 300nm日光日光(最佳:最佳:265265266nm)266nm)n原理:导致原理:导致DNADNA分子构型改变分子构型改变DNADNA复制出现差错复制出现差错n用途:只用于空气和物品表面用途:只用于空气和物品表面(biomin)(biomin)的消毒(注意防护)的消毒(注意防护).微波:细菌体内的蛋白质、核酸等分子在微波场下高速旋转、振微波:细菌体内的蛋白质、核酸等分子在微波场下高速旋转、振动,细菌蛋白质凝固、核酸变性而死亡。动,细菌蛋白质凝固、核酸变性而死亡。n常用于对非金属器械的消毒,优点是无污染而且迅速常用于对非金属器
7、械的消毒,优点是无污染而且迅速 。.超声波是指频率大于超声波是指频率大于20kHz20kHz的声波,其频率高,波长短,定向性的声波,其频率高,波长短,定向性好,穿透力强。好,穿透力强。n原理:空化作用原理:空化作用n用途:液体或可放置液体中不影响其性能的物品用途:液体或可放置液体中不影响其性能的物品 第八页,共四十七页。滤过(l u)除菌法o贝克菲滤器贝克菲滤器 o蔡氏滤器蔡氏滤器 o玻璃滤器玻璃滤器 o膜滤器膜滤器n孔径孔径 0.22um-0.45um 0.22um-0.45um除菌除菌n空气过滤器空气过滤器:无菌棉花、活性炭及细玻无菌棉花、活性炭及细玻璃纤维等璃纤维等n可对空气进行可对空气
8、进行(jnxng)(jnxng)过滤除菌过滤除菌第九页,共四十七页。2、化学(huxu)消毒灭菌法o常用消毒剂常用消毒剂(disinfectants)(disinfectants)的杀菌机制的杀菌机制n使菌体蛋白变性或凝固使菌体蛋白变性或凝固n干扰微生物酶系统和影响其代谢干扰微生物酶系统和影响其代谢(dixi)(dixi)n损伤细胞壁、细胞膜损伤细胞壁、细胞膜环氧乙烷消毒环氧乙烷消毒(xio d)设备设备第十页,共四十七页。化学化学(huxu)(huxu)消毒灭菌法消毒灭菌法高效消毒剂高效消毒剂high-level high-level 中效消毒剂中效消毒剂intermediate-level
9、intermediate-level低效消毒剂低效消毒剂 low-levellow-level可杀死包括细菌芽胞可杀死包括细菌芽胞在内所有微生物在内所有微生物不能杀死芽胞,可杀不能杀死芽胞,可杀死细菌繁殖体、真菌、死细菌繁殖体、真菌、大多数病毒大多数病毒可杀死大多数细菌繁可杀死大多数细菌繁殖体,对真菌、病毒殖体,对真菌、病毒杀灭力弱杀灭力弱1.1.含氯消毒剂含氯消毒剂2.2.过氧化物消毒剂过氧化物消毒剂3.3.醛类消毒剂醛类消毒剂4.4.环氧乙烷环氧乙烷1.1.含碘消毒剂含碘消毒剂2.2.醇类消毒剂醇类消毒剂1.1.季铵盐类季铵盐类2.2.氯已定氯已定3.3.高锰酸钾高锰酸钾第十二页,共四十七
10、页。医疗器械物品的消毒医疗器械物品的消毒(xio d)灭菌灭菌o高危器械物品高危器械物品 n需进入无菌组织的物品。需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌所有这些物品都应该灭菌。o中危器械物品中危器械物品 n不进入无菌组织但接触黏膜的器械。不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒采用消毒(xio d)(xio d)即可即可。o低危器械物品低危器械物品 n只只接接触触未未损损伤伤皮皮肤肤但但不不进进入入无无菌菌组组织织和和不不接接触触黏黏膜膜的的物物品品。一一般般用用后后清清洗洗、消消毒即可。毒即可。o快速周转的医疗器械快速周转的医疗器械第十三页,共四十七页。室内空气消毒室内空气消毒(xio
11、 d)灭菌灭菌a.物理消毒法物理消毒法 n紫外线照射(紫外线照射(1.5W/m3,1h)最常用;)最常用;n滤滤过过除除菌菌:空空气气通通过过孔孔径径小小于于0.2 m的的高高效效过过滤滤装装置置以以除去细菌和带菌尘埃除去细菌和带菌尘埃(chn i)b化学消毒法化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸包括化学消毒剂喷雾和熏蒸n过氧乙酸喷雾、熏蒸;过氧乙酸喷雾、熏蒸;n过氧化氢喷雾;过氧化氢喷雾;n二氧化氯溶液喷洒;二氧化氯溶液喷洒;n中草药点燃烟熏中草药点燃烟熏第十四页,共四十七页。手和皮肤手和皮肤(p f)的消毒的消毒o用肥皂用肥皂(fizo)(fizo)和流动水经常并正确洗手和流动水经常并正确
12、洗手o病原微生物污染时应用消毒剂消毒病原微生物污染时应用消毒剂消毒 第十五页,共四十七页。消毒灭菌消毒灭菌(mi jn)(mi jn)的方法的方法热力热力(rl)(rl)灭菌法灭菌法辐射辐射(fsh)(fsh)杀菌法杀菌法滤过除菌法滤过除菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法干热灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 高效消毒剂高效消毒剂中效消毒剂中效消毒剂低效消毒剂低效消毒剂第十六页,共四十七页。3 3、实验室生物、实验室生物(shngw)(shngw)安全安全o生物安全(生物安全(biosafetybiosafety)是生物技术安全的简
13、称)是生物技术安全的简称o狭狭义义的的指指现现代代生生物物技技术术的的研研究究、开开发发、应应用用及及转转基基因因生生物物可可能能对对生生物物多多样样性性、生生态态环环境境和和人人类类健健康康产产生潜在的危害。生潜在的危害。o广义的指与生物有关的各种因素广义的指与生物有关的各种因素 对社会、经济、人类健康及生态对社会、经济、人类健康及生态(shngti)(shngti)环境所产生的危害或潜在风险。环境所产生的危害或潜在风险。第十七页,共四十七页。(1)生物)生物(shngw)安全的内容安全的内容o转基因生物、外来入侵转基因生物、外来入侵(rqn)物种、环境污染物种、环境污染o病原微生物(感染性
14、疾病、人畜共患疾病、动物病原微生物(感染性疾病、人畜共患疾病、动物疾病、食源性疾病、医院感染)疾病、食源性疾病、医院感染)o实验室泄漏:实验室泄漏:o生物武器、生物恐怖生物武器、生物恐怖o遗传资源保护遗传资源保护o合成生物技术合成生物技术o转基因及其它新型生物技术转基因及其它新型生物技术第十八页,共四十七页。事故引发事故引发(yn f)的的生物危害生物危害 o是是由由进进行行病病原原体体研研究究、教教学学、诊诊断断、治治疗疗、生生物物制制品品研研发发和和生生产产等等机机构构的的事事故故导导致致病病原原体体泄泄漏漏,引引发发了了传传染染病病暴暴发发的的生生物物灾灾害害。这这类类生生物物灾灾害害往
15、往往往影响较大,危害范围小,造成局部灾害大,持续短影响较大,危害范围小,造成局部灾害大,持续短n19791979年年,苏苏联联国国防防微微生生物物与与病病毒毒研研究究所所炭炭疽疽芽芽孢孢(y(y bo)bo)干干粉粉制制剂剂车车间间的的加加压压系系统统爆爆炸炸,约约1010公公斤斤芽芽孢孢(y(y bo)bo)粉粉剂剂泄泄漏漏,造造成成斯斯维维尔尔德德洛洛夫夫斯克城数百人伤亡。斯克城数百人伤亡。n20032003年年9 9月月新新加加坡坡国国立立卫卫生生研研究究院院BSLBSL3 3实实验验室室发发生生研研究究人人员员感感染染SRASSRAS病毒的事故。病毒的事故。n20032003年年121
16、2月月我我国国台台湾湾省省一一实实验验室室也也发发生生了了研研究究人人员员感感染染SRASSRAS病病毒毒的的事故,事故,n20042004年年4 4月我国国家月我国国家CDCCDC的专业实验室发生了的专业实验室发生了SARSSARS的实验室人员感染。的实验室人员感染。第十九页,共四十七页。(2)如何实现)如何实现(shxin)实验室生物安全?实验室生物安全?加强管理,规范行为,消除隐患,确保安全加强管理,规范行为,消除隐患,确保安全 如何管?如何管?依法、规范管理依法、规范管理 管那些?管那些?病原微生物、实验室设立、病原微生物、实验室设立、风险评估、实验活动风险评估、实验活动(hu dng
17、)(hu dng)、实验、实验 装备、废弃物、人员装备、废弃物、人员第二十页,共四十七页。类类 别别根据传染性、感染后对个体或者群体的危害程度,根据传染性、感染后对个体或者群体的危害程度,第一类第一类能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物发现或者已经宣布消灭的微生物 。第二第二类类能够引起人类或者动物严重疾病,比较容易直接或者间接在人能够引起人类或者动物严重疾病,比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三第三类类能够引起人或动物
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