学术讨论—乙肝、HIV、梅毒检测技术2016.9.13.pptx
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1、第 1 页乙肝、乙肝、HIV、梅毒、梅毒(mid)(mid)实验室检验技术实验室检验技术甘肃省妇幼保健院 临床检验(jinyn)中心:赵翠生第一页,共九十五页。第 2 页综合综合(zngh)(zngh)产前检查服务产前检查服务+检测检测孕产妇参加(cnji)产前检查服务检测(jin c)前信息HBV 检测梅毒检测HIV检测全血细胞计数和其它检测取血样2第二页,共九十五页。第 3 页 梅毒梅毒(MID)(MID)的实验室检测的实验室检测3第三页,共九十五页。第 4 页梅毒梅毒(mid)(mid)病原体为梅毒螺旋体,属于(shy)密螺旋体属,苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidu
2、m subspecies pallidum)苍白亚种 梅毒 苍白螺旋体 地方亚种 地方性梅毒 极细亚种 雅司病密螺旋体属 品他螺旋体 品他病第四页,共九十五页。第 5 页梅毒血清学试验基本梅毒血清学试验基本(jbn)(jbn)实验室设备实验室设备检方法检方法检测样本类型检测样本类型必要设备必要设备血清血清血浆血浆全血全血RPR/TRUSTRPR/TRUST水平旋转仪TPPATPPA震荡仪ELISAELISA酶标仪、洗板机POCTPOCT检测检测无需特殊设备5第五页,共九十五页。第 6 页筛查时间筛查时间(shjin)(shjin)梅毒梅毒检测方法检测方法非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗
3、原血清学试验(RPRRPR或TRUSTTRUST检测)梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验(TPPATPPA、ELISAELISA或梅毒快速检测或梅毒快速检测)检测时间检测时间第一次产检(孕早期)第一次产检(孕早期)或下一次产检时如有必要,孕晚期再次检测此前无检测结果,则在分娩时检测6第六页,共九十五页。第 7 页梅毒梅毒(mid)(mid)的实验室检测方法的实验室检测方法显微镜检测显微镜检测法(诊断技术):法(诊断技术):(1)暗视野显微镜检查 (2)镀银染色检查血清学检测血清学检测法法(筛查技术)(筛查技术)非梅毒螺旋体抗原血清试验:检测检测非特异性抗体非特异性抗体(kngt)
4、(kngt):抗心磷脂抗体、即非特异 性抗体、反应素 梅毒螺旋体抗原血清试验:检测检测特异性梅毒螺旋体抗体特异性梅毒螺旋体抗体 第七页,共九十五页。第 8 页l 梅毒(mid)早期诊断的依据之一诊断的依据之一是病原学检测,即在组织或分泌物中检测到苍白螺旋体苍白螺旋体:暗视野显微镜 镀银染色镜检 梅毒梅毒(mid)(mid)检测技术检测技术8第八页,共九十五页。第 9 页u 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 RPR(快速血浆反应素环状卡片试验)TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)VDRL(性病研究(ynji)实验室试验)u梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 TP
5、PA(梅毒螺旋体颗粒凝集试验)ELISA(酶联免疫吸附试验)POCT(胶体金技术,快速检测、一站式检测)梅毒梅毒(mid)(mid)检测技术检测技术9第九页,共九十五页。第 10 页围产期梅毒检测围产期梅毒检测(jin c)(jin c)方法特点方法特点l 用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染梅毒l梅毒血清学检测筛查试验应具有的特点筛查试验应具有的特点具有较高的灵敏度较高的灵敏度和特异度特异度操作简单、容易获得、便宜(biny)尽可能在“当日”获得结果10第十页,共九十五页。第 11 页非梅毒螺旋体抗原非梅毒螺旋体抗原(kngyun)(kngyun)血清学试验血清学试验 梅毒螺旋体感染可产
6、生非特异性抗体非特异性抗体(非梅毒螺旋体抗体)非梅毒螺旋体抗体又称之为反应素,是抗心磷脂等抗原(kngyun)的抗体 随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高 除梅毒外,其他医学情况会造成非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性假阳性结果,包括结核、疟疾、妊娠和风湿关节炎、狼疮及硬皮病等自体免疫性疾病自体免疫性疾病11第十一页,共九十五页。第 12 页非梅毒螺旋体抗原非梅毒螺旋体抗原(kngyun)(kngyun)血清学试验的特点血清学试验的特点非梅毒螺旋体抗原血清学试验:非梅毒螺旋体抗原血清学试验:快速、简便、便宜 敏感性和特异性较高 硬下疳后1-2周变为阳性 可用于 筛查样本 评估评估(pn)(pn)对
7、治疗的反应对治疗的反应 鉴别复燃还是再次感染鉴别复燃还是再次感染12第十二页,共九十五页。第 13 页确保非梅毒确保非梅毒(mid)(mid)螺旋体抗原血清学试验螺旋体抗原血清学试验质量的关键点质量的关键点1.按照标准操作程序(SOPs)进行操作2.2.推荐使用评价推荐使用评价(pngji)(pngji)特性较好的试剂特性较好的试剂*3.按照统一的标准报告结果4.4.开展实验室质控(开展实验室质控(QCQC)和参加室间能力验证()和参加室间能力验证(PTPT)*由中国疾病预防控制中心性病中心国家(guji)参比实验室提供13第十三页,共九十五页。第 14 页非梅毒非梅毒(mid)(mid)螺旋
8、体抗原血清学试验螺旋体抗原血清学试验抗体滴度通常与疾病活动度有关抗体滴度通常与疾病活动度有关治疗后(可能几个月)非梅毒(mid)螺旋体抗原血清学试验通常转变为不反应不反应如果用同一种实验,相同试验滴度4 4倍变化倍变化(如从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32)为临床显著变化临床显著变化有些病人,抗体滴度可始终处于较低水平,有时可持续终生(血清固定血清固定)注意:注意:病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检测方法(RPR、TRUST)进行连续多次检测;RPRRPR和和TRUSTTRUST方法均有效,但检测的滴度结果不能直接进行比较方法均有效,但检测的滴度结果不能直接进行比较14第十
9、四页,共九十五页。第 15 页治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验抗体抗体(kngt)(kngt)滴度变化的临床意义滴度变化的临床意义一期梅毒和二期梅毒:成功治疗,抗体(kngt)滴度应3个月后下降2倍6个月后下降4倍 一期梅毒:1年后抗体滴度转阴 二期梅毒:2年后抗体滴度转阴晚期梅毒:治疗后抗体滴度缓慢下降 50%的病人2年后抗体滴度仍为阳性15第十五页,共九十五页。第 16 页梅毒螺旋体抗原梅毒螺旋体抗原(kngyun)(kngyun)血清学试验血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体 可用于确认非梅毒螺旋体抗原血
10、清学试验的阳性结果确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果,排除,排除(pich)(pich)其假阳性其假阳性 阳性结果可持续存在,即使治疗后仍可为阳性阳性结果可持续存在,即使治疗后仍可为阳性。*梅毒螺旋体抗原(kngyun)血清学试验与疾病的活动度无关与疾病的活动度无关,不不能用于鉴别现症感染还是既往感染,也不能用于能用于鉴别现症感染还是既往感染,也不能用于判断疗效判断疗效*一期梅毒治疗病人中,一期梅毒治疗病人中,15%-25%15%-25%可在可在2-32-3年后转为血清学阴性年后转为血清学阴性16第十六页,共九十五页。第 17 页妊娠期梅毒妊娠期梅毒(mid)(mid)检测检测p 所有孕
11、产妇所有孕产妇应进行梅毒筛查检测:孕期尽早孕期尽早(如果可能,在孕早期时)以及 如果在分娩前/临产时没有筛查检测结果(ji gu),在分娩时检测p 筛查检测可应用以下任何一类方法:非梅毒螺旋体抗原血清学试验(滴度)或 梅毒螺旋体抗原血清学试验p 所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另一类检测方法进行复检确认是否为现症所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另一类检测方法进行复检确认是否为现症 梅毒梅毒p 所有产妇及所生婴儿出院前,产妇梅毒检测结果都应记录在病历中,以确保需要时给予治疗17第十七页,共九十五页。第 18 页孕产妇梅毒检测孕产妇梅毒检测(jin c)(jin c)流程流程非梅毒螺旋体抗原血
12、清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验孕产妇孕产妇治疗后,随访监测非梅毒螺旋治疗后,随访监测非梅毒螺旋体抗原血清学试验体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验每3个月进行非梅毒螺旋体抗原血清个月进行非梅毒螺旋体抗原血清学试验学试验如果需要进行治疗如果需要进行治疗报告:报告:非梅毒螺旋体抗原血清学非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性试验阴性报告:两种检测均阳性两种检测均阳性治疗病人治疗病人报告:报告:梅毒螺旋体抗原血清梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性学试验阴性报告:报告:非梅毒螺旋体抗原
13、血清学非梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性试验阳性梅毒螺旋体抗原血清学试梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性验阴性报告:报告:梅毒螺旋体抗原血清学试梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性验阳性非梅毒螺旋体抗原血清学非梅毒螺旋体抗原血清学试验阴性试验阴性阳性反应阴性反应阴性反应阳性反应阳性反应或阴性反应阳性反应阴性反应阳性反应第十八页,共九十五页。第 19 页HIVHIV感染感染(gnrn)(gnrn)病人的梅毒血清学试验病人的梅毒血清学试验一些HIV感染病人,其梅毒(mid)血清学试验结果不典型,包括滴度超常高或超常低滴度不断变动如果临床表现提示早期梅毒,而血清学试验结果与此不一致,考虑病灶活检 或暗视野显微镜检查注
14、意:注意:对于大多数HIV感染病人而言,梅毒血清学试验是诊断梅毒感染、随访观察疗效准确、可靠(kko)的检测方法19第十九页,共九十五页。第 20 页梅毒血清学检测梅毒血清学检测(jin c)(jin c)结果的解释结果的解释非梅毒螺旋体非梅毒螺旋体试验试验梅毒螺旋体梅毒螺旋体试验试验临床参考意义临床参考意义+-RPR假阳性 考虑其他医学状况*+现症梅毒现症梅毒-+既往感染既往感染或极早期梅毒极早期梅毒-排除梅毒感染由于免疫缺陷,也可发生于艾滋病晚期*包括结核、疟疾(n ji)、风湿性关节炎或妊娠。20第二十页,共九十五页。第 21 页 暴露暴露(BOL)(BOL)婴儿的梅毒检测婴儿的梅毒检测
15、21第二十一页,共九十五页。第 22 页梅毒暴露婴儿先天梅毒暴露婴儿先天(xintin)(xintin)梅毒检测梅毒检测 母体非梅毒螺旋体和梅毒螺旋体IgGIgG抗体可通过胎盘,所以应谨慎地对婴儿梅毒血清学抗体可通过胎盘,所以应谨慎地对婴儿梅毒血清学试验结果进行解释试验结果进行解释 婴儿需要接受预防性治疗还是规范的抗梅毒治疗应根据:母亲确诊梅毒感染母亲治疗情况婴儿梅毒感染的临床表现、实验室或放射线检查结果母亲及婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较(尽可能在同一个实验室使用(shyng)相同的试验方法)22第二十二页,共九十五页。第 23 页先天梅毒先天梅毒(mid)(mid)的诊断的诊
16、断先天梅毒的诊断标准:先天梅毒的诊断标准:梅毒暴露婴儿具有以下梅毒暴露婴儿具有以下(yxi)(yxi)条件之一:条件之一:任何先天梅毒临床表现暗视野显微镜检梅毒螺旋体阳性(+)梅毒螺旋体IgM抗体阳性*RPR/TRUST检测阳性,滴度比母亲分娩前最近一次滴度高4倍及以上RPR/TRUST监测随访中,任何一次滴度不下降或反而上升满满1818月龄后,月龄后,TPPATPPA检测阳性检测阳性*IgM抗体反映近期感染(gnrn),可帮助鉴别婴儿先天梅毒,但我国尚不能广泛开展23第二十三页,共九十五页。第 24 页梅毒梅毒(mid)(mid)暴露婴儿的评估暴露婴儿的评估梅毒暴露婴儿:l婴儿RPR检测 婴
17、儿RPR检测不能使用脐带血,因其易被母体血液 污染,从而出现假阳性结果l检查先天梅毒临床表现:非免疫性水肿、黄疸(hungdn)、肝脾大、鼻炎、皮疹、末端肢体假性麻痹l对可疑病灶或体液进行暗视野显微镜检查24第二十四页,共九十五页。第 25 页先天梅毒检测先天梅毒检测(jin c)(jin c)流程流程 婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测梅毒暴露婴儿母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量检测(应同时进行梅毒螺旋体抗原血清学试验,用于随访诊断)组织或分泌物暗视野显微镜检,有条件进行IgM抗体检测报告母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测滴度水平滴度水平报告婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验检
18、测滴度水滴度水平平报告暗视野显微镜检或IgM抗体检测结果阳性阴性没有梅毒感染的症状有梅毒感染的症状25第二十五页,共九十五页。第 26 页梅毒检测梅毒检测(jin c)(jin c)小结小结p早期梅毒早期梅毒诊断可根据在组织诊断可根据在组织或或分泌物样本中通过显微检测分泌物样本中通过显微检测(jin c)(jin c)到苍白螺旋体而诊断到苍白螺旋体而诊断p应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒感染过程中产生的非特异抗体。滴度通常与疾病的活滴度通常与疾病的活动度有关,因此可用于监测对治疗的反应动度有关,因此可用于监
19、测对治疗的反应梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒螺旋体抗原血清学试验检测对抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体,可用于确认临床诊断确认临床诊断或非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果,可反映任何阶段的梅毒暴露或非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果,可反映任何阶段的梅毒暴露p先天梅毒的诊断复杂,应根据:先天梅毒的诊断复杂,应根据:1.母亲梅毒感染状态2.母亲梅毒治疗情况3.婴儿梅毒感染的临床表现、实验室或X线检查结果4.母亲、婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度水平的比较5.随访26第二十六页,共九十五页。第 27 页HIVHIV和和HBVHBV的实验室检测的实验室检测(jin c)(jin c)第二十七页,
20、共九十五页。第 28 页HIVHIV和和HBVHBV筛查检测筛查检测(jin c)(jin c)p筛查检测n 用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染HIV和HBVHIV抗体检测乙肝表面抗原(HBsAg)检测n 筛查检测应筛查检测应具有较高的灵敏度和特异度操作简单、容易获得、便宜(biny)尽可能在“当日”获得结果28第二十八页,共九十五页。第 29 页何时何时(h sh)(h sh)使用何种检测?使用何种检测?HIVHBV检测方法检测方法 HIV HIV快速检测快速检测 和/或 ELISA HBsAg HBsAg检测检测 如果有条件,其他乙肝 标记物检测检测时间检测时间第一次产检(孕早期)第
21、一次产检(孕早期)或下一次产检时此前未检测,分娩时应检测第一次产检(孕早期)第一次产检(孕早期)或下一次产检时此前未检测,分娩时应检测29第二十九页,共九十五页。第 30 页 HIVHIV试验试验(SHYN)(SHYN)和检测和检测30第三十页,共九十五页。第 31 页HIVHIV检测检测(jin c)(jin c):抗体检测:抗体检测(jin c)(jin c)p 一个(y)人感染了HIV病毒后,体内将产生特异性抗体 对抗HIV病毒*p HIV抗体通常在感染后4 6周出现,但也有时也会 在感染后3个月才出现p 从感染HIV病毒到出现特异的HIV抗体的一段时期 称为“窗口期”标准的标准的HIV
22、HIV诊断检测是识别诊断检测是识别(shbi)(shbi)HIVHIV抗体抗体*注意:注意:*与其他大多数疾病不同,与其他大多数疾病不同,HIVHIV抗体没有保护性作用。抗体没有保护性作用。31第三十一页,共九十五页。第 32 页HIVHIV抗体检测抗体检测(jin c)(jin c)类型类型快速检测快速检测ELISAELISA免疫印迹(免疫印迹(WBWB)准确性准确性灵敏度灵敏度特异度特异度非常高非常高几乎几乎100%100%99%99%非常高非常高几乎几乎100%100%99%99%因为特异度极高,用于因为特异度极高,用于检测结果不确定样本的检测结果不确定样本的确认试验确认试验成本成本+结
23、果报告时间结果报告时间11小时小时33天天1010天天需要专门实验室设备需要专门实验室设备否否是是是是对检验人员技术要求对检验人员技术要求高高否否是是是是32第三十二页,共九十五页。第 33 页HIVHIV检测:病毒检测:病毒(bngd)(bngd)核酸检测核酸检测这些检测这些检测检测HIV感染者血液或血浆中的病毒必须由经过专门培训的实验室人员操作实验室需有资质,并配备专门设备昂贵,不是针对所有人进行的常规(chnggu)检测方法PCRPCR(多聚酶连反应法)检测(多聚酶连反应法)检测HIV DNAHIV DNA定性检测血液中是否含有病毒,用于诊断诊断1818月龄内婴儿是否感染月龄内婴儿是否感
24、染HIVHIVHIV RNAHIV RNA定量检测病毒载量病毒载量,用于监测对抗病毒治疗的反应监测对抗病毒治疗的反应33第三十三页,共九十五页。第 34 页HIVHIV筛查检测结果筛查检测结果(ji gu)(ji gu)的含义的含义HIV筛查检测结果“阴性阴性(-)(-)”:受检者没有受检者没有 感染HIV或者或者受检者已经感染了HIV,但处于窗口期:3个月后再次进行检测HIV筛查检测结果“阳性阳性(+)(+)”:病人可能可能已经感染HIV,但应再次重复(chngf)检测、另一种方法复检或确诊检测34第三十四页,共九十五页。第 35 页HIVHIV确认确认(qurn)(qurn)试验结果的含义
25、试验结果的含义l 如果筛查检测结果(ji gu)阳性阳性,两次重复检测中1次或2次检测结果为阳性阳性,需要进行确认试验l 免疫印迹法(WB)确认试验结果:-阳性,阳性,病人确认确认感染HIV阴性,阴性,受检者没有受检者没有感染HIV不确定,不确定,结果为“不确定”,受检者必须在4周后再次采血,重复前述所有步骤进行检测35第三十五页,共九十五页。第 36 页中国中国(zhn u)(zhn u)预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播HIVHIV检测流程检测流程在产前检查服务中开展整合的检测在产前检查服务中开展整合的检测(jin c)(jin c)咨询所采用的咨询所采用的HIV
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