学术讨论—第四章-血型与输血.docx
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1、第四章 血型与输血第一节 血型最早,血型是指存在于红细胞上特异性同种抗原而言,后来发现红细胞上具有的同种抗原远较想象的复杂,而且除红细胞外,白细胞、血小板上也都有同种抗原,这就使血型的概念有所扩大。目前可发理解为血型是血液系统的一种遗传多态性,是产生气壮山河原体抗体的遗传性状,池给缺乏某种抗原体的个体输入此种抗原时,可以刺激产生相应的抗体。只有极少数抗原为各类细胞所共有,如ABO和HLA抗原几乎存在于身体各种细胞,而大部分抗原则仅存在于红细胞、粒细胞、淋巴细胞或血小板中的某一种成分上。一、ABO血型系统目前已识别的血型中,以红细胞抗原检出的数量最多,约有400多种。按其性质和遗传上相关性,可分
2、别归类为若干血型系统,以及高频率、低频率血型抗原组等。在这些每人具有其中一小部分,其临床意义的重要程度,取决于此系统的抗体在体内破坏红细胞的能力,以及在人群中产生抗体的能力。ABO系统是第一个被描述的红细胞血型系统,于20世纪初由Landsteiner提出的,也是最具有临床意义的一个系统。根据Landsteiner的理论,红细胞有A、B两种抗原,并由这两种抗原及抗体在红细胞上存在的情况决定有四种ABO血型(表4-1)。表4-1 ABO血型分类血型红细胞上抗原血清中抗体AA抗BBB抗AO棗抗A,抗BABAB棗ABO血型中的天然抗体可以引起具有不配的抗原的红细胞产生迅速地、完全地血管内溶血,因此对
3、输血至关重要。输入ABO血型不合血液,将引起严重的输血反应,以至于发生死亡事故。(一)ABO系统抗原1ABO抗原的遗传:ABO血型的系统的产生及定位由3个离位点的基因所控制,即ABO、HB、Seee基因。基因Hb和Seee紧密相边第29对染色体上。关于ABO基因,先后有两种学说,即“两对独立的等位基因”和“三复等位基因”学说,现在一般都接受后者。这一学说于1924年由Betnstien提出,他认为在决定ABO血型遗传的基因座上,有A、B、O三个等位基因。现已知ABO遗传座位在第9号染色体的长臂三区四带。A、B基因对于O基因而言为显性基因。父母双方如各遗传给予代一个基因,则可组成6个基因型,因为
4、O为隐性基因,所以只有四种表型。(表4-2)从父母的血型,可推测子代的血型,从而有助于做亲子鉴定。(表4-3)表4-2 ABO血型的基因型与表型基因型表型OOOAO,AAABO,BBBABAB表4-3 ABO血型的遗传父母表型父母基因型子女可能表型(和基因型)AAAAAAAAAOAOAOA(AAA(AA、AO)A(AA、AO)或O(OO)BBBBBBBBBOBOBOB(BB)B(BB、BO)或O(OO)B(BB、BO)ABABABABAB(AB)A(AA)B(BB)OOOOOOO(OO)ABAABBAOBBAABOAOBOAB(AB)AB(AB)B(BO)AB(AB)A(AO)AB(AB)A(
5、AO)B(BO)O(OO)AOAAOOAOOOA(AO)A(AO)O(OO)AABAAABAOABAB(AB)A(AA)AB(AB)A(AA、AO)B(BO)BOBBOOBOOOB(BO)BABBBABBOABB(BO)O(OO)AB(AB)B(BB)ABOABOOAB(AB)B(BB、BO)A(AO)A(AO)B(BO)2ABO抗原的生物合成:基因ABO及H控制着A、B抗原的形成。每个人从父母处分别获得ABO基因,它们决定阒红细胞膜上有抗原。O基因为无效基因,它没有相应的答产生。H位点的两个等位基因之一,H产生一种酶,在其作用下生成A或B抗原的前身物质。ABH血型抗原决定簇的前身物质是红细胞
6、膜上含4个糖的低聚含有4个糖的低聚集糖链,由于各自的糖基转移酶作用决定抗物质的形成。首先由H基因控制形成岩藻糖转移酶,它把一个岩藻溏接于其前身物质,即红细胞膜上寡糖链的半乳糖上形成H物质。H物A、B抗原的前身物质,基因H是无资格 基因,没有终产物。基因A与B不直接产生抗原,而是分别生成酶A、酶B,酶A把一个N-乙酰半乳糖胺连接到H物质的D-法乳糖结构上,产生抗原A特性。酶B把一个D-半乳糖分子连接到H物质的半乳糖上形成B抗原特性。所以A和B活性的糖均连接在H物质的半乳糖上,两者之区别仅为一个糖基之差(图4-1)。如果这末端的半乳糖上既不连接N-乙酰半乳糖胺,又不连接半乳糖,则仞有H基因时,则仅
7、有H抗原物质的前身物质,因H基因不合成岩藻糖转移酶,所以HH纯合子没有H抗原。由于无H抗原,当然也就不能形成抗原A与B了,其结果是形成Oh型(孟买型)。(图4-2)图4-1 H,A,B抗原和糖结构图4-2 H,A,B及Lewis抗原形成示意图基因A比B更易引导形成高浓度的糖革转移酶,而使红细胞吏易转变到抗原A位点。O基因是无效基因,不能引导转移酶的产生,因此涌在H物质上连接糖基,其结果是O型红细胞的H抗原浓度最高。但不管是A型或B型红细胞上,都还有一定数最未转变的H抗原。H抗原活力强度的顺序为OA2A2BBA1A1B。3抗原的发生:5-6周胎儿红细胞已可测出ABH抗原,但整个妊娠期间其浓度增长
8、不快,即使到出生时还未发育完全,一般说新生儿A、B抗原位点较成人少,估计约丰当成人的25-50%,H抗原反应性也不如成人强。一般在生后18个月时才能充分表现出抗原性,此点在测定血型时应加以注意。此外,ABH抗原频率亦随种族而不同(表4-4)。表4-4 我国16个民族的ABO血型分布检查人数各种表型A1A2BOA1BA2B汉族1605501(31.19)7(0.44)496(30.88)435(27.09)163(10.15)4(0.25)维吾尔族1513423(27.96)19(1.26)483(31.92)416(27.50)150(9.91)22(1.45)回族1355396(27.23)
9、_384(28.34)487(35.94)115(8.49)_壮族1170248(21.20)_332(28.37)546(46.67)44(3.76)_蒙古族1112246(22.12)7(0.63)379(34.08)356(32.01)120(10.80)1(0.36)彝族1007285(28.30)3(0.30)303(30.09)334()33.1778(7.74)4(0.40)哈萨克族885189(21.36)13(1.47)264(29.83)336(37.97)73(8.25)10(1.13)佤族520119(38.27)1(0.19)112(21.54)135(25.95)7
10、2(13.85)1(0.19)傣族507112(2209)_150(29.59)205(40.43)40(7.89)_苗族50197(1936)棗206(4112)181(3613)17(339)棗白族500170(34.00)_117(23.40)157(31.40)56(11.20)_锡伯族34486(25.00)_138(40.12)84(24.42)34(9.88)2(0.58)景颇族20170(34.82)_41(20.40)76(37.81)13(6.47)1(0.05)乌孜别克族12933(2558)_50(38.76)33(25.58)11(8.83)2(1.55)柯尔克孜族1
11、2422(1774)1(0.81)49(39.52)43(34.68)9(7.26)_塔塔尔族3715(4054)_13(35.14)8(21.62)1(2.70)_4分泌型:ABH抗原不仅存在于红细胞膜上,月细胞,血小板及其它组织细胞上也可发现ABH抗原。事实上,组织细胞也能合成分泌可溶性ABH抗菌素原,所发ABH血型特异物质能在所有与ABH基因遗传有关的分泌物中发现,而存在于许多体液中,职唾液、尿液、泪液、胃液、胆法、羊水、血清等,但脑脊液中没有。这些可溶性抗原又被称为“血型物质”血型物质以唾液中有这种血型物质者为分泌物,无血型物质者为非分泌型。分泌型与非分泌型受控于Sese基因。这一对基
12、因的遗传与ABO及H基因无关。大约有80%的人有此基因。其基因型为SESE或H抗原特异性。其余20%人群的基因sese,称非分泌型。 Se基因为无效基因,这些人的分泌物中有A、B、H糖蛋白物质或抗原。Se基因如何调节组织分泌特细胞功能的确切机制尚不清楚。微量的水溶性血型物质即可被测定,因为它们具有可以与相应抗体反应的性质,因此也楞以中和世界形势抑制抗体与具有相应抗原的红细胞发生凝集。血型物质存在的意义有:测定唾液中血型物质辅助鉴定血型;中和ABO血型系统中的“天然抗体,”有助于检查免疫性抗体;检查羊水,预测胎儿ABO血型等。(二)ABO系统抗体:ABO血型系统抗体有“天然抗体”与免疫性抗体之分
13、。人类在没有可觉察的抗原刺激下而产生的抗原体谓之“天然抗体”。也就是说,人血清中存在的抗体能天然地与其自身红细胞所缺乏的A、B、抗原相对应(表4-1)。这种楞预见的相互关系是血型定型的依据。所谓天然抗体产生的杨制也可能是由一种无觉察的免疫刺激产生而得。人红细胞膜上的ABH抗原体定簇是一类比较简单寡溏,在生物界非血型抗原体所特有,有些细菌表面就有类似的糖链结构。因此这些细菌就具有与人红细胞ABH同样的抗原体性,而这些细菌广泛分布于环境中如食物与法埃上,甚至存在肠道内,它们不断给人以类A类B抗原的刺激。因此,红细胞上缺乏此种抗原有个体,经过接触,针对自己所缺乏的抗原而产生相应的抗体,故近来认为所谓
14、天然抗体实际体上也与是通过免疫而产生的。1抗A、抗B抗体:和一切抗体一样,血型抗体也是免疫球蛋白,天然抗体主要是IGM,免疫体主要是IGG。但这种区分界限也不十分明确,事实上人的IGM和IGG血型抗体往往同时存在。抗A和抗B可以完全是IGM,也可以是IGN与IGG,甚至是IGM、G、A 混合。总体而言,抗A与抗B主要是IGM,而O型血清中是以IGG为主。天然抗体IGM又称完全抗体或盐水抗体。两种血型抗体的主要区别见表4-5。表4-5 IGM和IGG抗A及B抗体的特性及区别IgMIgG温度低时抗体滴度增高温度升高时抗体滴度也增高容易被可溶性血型物质中和只能部分地被可溶性血型物质中和在疏基乙醇或二
15、硫苏糖醇中被子灭活不被疏基乙醇和二硫苏糖醇灭活存在于A型及B型个体血清中常存在于O型血清中,极少存在于非免疫性的A及B型个体血清中不能通过胎盘能通过胎盘在盐水中与相与相应红细胞发生凝集通常在盐水中不发生凝集,仅在酶处理或白蛋白溶液中发生凝集ABO抗体滴度变化很大,一般说O型血清抗体A滴度高于B型人,B型人的抗A又高于A型中的抗体B。人在出生前尚未产生抗体,生后几个月才开始形成自己的抗体,偶尔也会发现刚出生的新生儿就忆有有了抗体,5-6岁时达高峰。产生的抗体的功能一直延续到一命的晚期,但成人后其较价随年龄增长而逐渐降低。新生儿检测血型时应十分慎重,可因抗体效价低而凝集不明显,也可因母亲的IGM抗
16、A或抗B通过胎盘进入胎儿体内而影响测定。2抗A、B抗体:O型人血清中不仅有抗A、抗B抗体,还含有一种抗 A、B抗体,它与 A型或B型红细胞都能凝集,但当用 A或B型红细胞分别吸收时,不能将其分为特异的 A和抗B,即它与两种红细胞反应的活性不能通过特 异吸收来分离。即使用A和B型红细胞反复吸收,它仍保持与A和B型红细胞都发生的活性。所以抗 A、B具有的血清学活性不可能在抗 A和抗B的混合液中找到。这种现象的最好解释可能是O型,血清中的抗 A、B是一种直接针对 A和B抗原体共同的抗体结构。O型人血清的这种抗 A、B可能是IGM和IGG,或者是IGG、M、A的混合物。抗A、B抗体比抗A和抗B抗体更易
17、通过胎盘,也说明有IGG的存在。未经免疫的O型人血清中证明有少量抗A、B抗体。如有输血不当或因妊娠使O型人接触了A或B抗原,可以引起免疫型抗A、B抗体增加。(三)ABO系统亚型:亚型是指属同一血型抗原,但抗原结构和怀能或抗原位点数有一定差异所引起的变化。ABO血型系统中以A亚型最多见,A抗原的两个主要亚型是A1A和2B。用B型血清测定A型红细胞时,A1和B2亚型均与之凝集,如将其中抗A吸收掉,只剩下抗A1,则A1红细胞可以与之反应,而A2红细胞则不能与之反应。所以凡与抗A1血清凝集反应者为A1型,如果同时还与抗A凝集,则为A1B型,不与抗A1血清凝集者为A2或A2B型。我国人中A2和A2B型在
18、A与AB型中占比例少于1%。A1B和A2抗原性质及抗菌素原点数量均有所不同,例如基因A1能生成高浓度的酶A,几乎能使所有的H物质转为A1抗原,A1型人血清中酶A的活性也远高于A型者。从成人红细胞膜上抗原定量估计,每个A1红细胞上A1抗原位点数为81-117万个,而A2红细胞上A2抗原位点则只有24-29万个。A型的其它亚型为数更少,而且与抗A反应更弱,有的只呈现混合外观(即在显微镜下可见少数凝集块混合于游离红细胞之间),有的甚至与抗A不反应,A3与抗A有当数凝块。A与A几乎无反应,但与O型血清可能发生程度不一凝集,这可能是因为O型鉴定时,应加O型血清,以防将A误定为O。A1与A2红细胞之区别及
19、A亚型分型要点分别见表4-6及表4-7。表4-6 A1红细胞与A2红细胞鉴别A1型红细胞A2型红细胞与抗A清反应4+2+与抗A1血清反应1+-抗原位点数目成人1000000250000脐血310000140000乙酰-D半乳糖胺转移酶在ph6时最多,活性较强在ph7时最多,活性较弱表4-7 A亚型分型要点与抗原血清反应血清中含抗-A1分泌型唾液血型物质吸收能力放散能力抗-A抗-A抗-A、BA14+3+4+-A、H强弱A22+-3+- +A、HA1A3MF-MF- +A、HA1AXW,-+常为+A-HA1AM-A、H弱强MF=I混合外观; W=弱凝集A2的抗原性弱,定型时很可能误定为O型,如果给
20、其输入O型血,不会有太大害处,但是如把A2供血者误码率定为O型并输给O型人,则受血者的抗A抗体可能与输入的A2红细胞反应引起血管内溶血性输血反应。B亚型较A亚型少见,其命名与A亚型类似,如其血清学类似A3、AX、AM者,其,分别命名为B3、BX、BM。国外尚未见B2亚型报道,我国曾报道1例B2和5例AB2型,其血清学特性类似A2和A2B。正常A型人血清用这种细胞吸收后,还剩下一种与正常B型细胞反应的抗体,称之为抗B1,以此分出B1、B2、AB1、AB2等亚型。(四)孟买型极少数人基因型为hh表型为Oh由于没有H基因,而h基因又为无效基因,因此其中红细胞上和唾液中不可能有H物质,因而也就不存在A
21、、B抗原体,所经Oh红细胞不被抗A、抗B或抗A、B所凝集,但其血清中抗A抗B与抗H,所经除与A、B型红细胞均能产生强反应外,还可与O型红细胞凝集,当怀疑Oh时,如其血清与O型红细胞凝集,可经确定其为Oh型。Oh型在孟买被首次发现,故又称孟买型。用荆豆提取的植物凝集素养抗H可以鉴别Oh型与O型,这种抗H可以与O型红细胞发生强凝集,却不能与Oh红细胞凝集,如用已知Oh血清鉴定Oh红细胞则更好。此外还有类孟买表现型Ah及Bh。此两类血型的红细胞上缺乏血清学足以检查出的H抗原,但却有少量A、B抗原,其红细胞可以分别与抗A和B抗 发生很弱的凝集。类孟买表现型是变H基因,中们生析少量H抗原,而所有H抗原皆
22、被基顺A与基因B转变成抗原A与抗原B。Ah 血清中A或抗B外,还含有抗H。由于孟买型及类孟买型极其少见,所以当需要输时,选择同型的供血者是非常困难的。(五)ABO血鉴定通常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原体存在的情况判断血型。常规的方法包括正向定型与反向定型,前者是用已知抗体特异性的血清上抗原红细胞的抗原,后者是用已知血型的红细胞检查血清中抗体,凡出现 凝集者为阳性,红细胞呈散在游离状态为阴性,所用抗A、抗B和抗A、B标准血清均采自健康人,并应符合下述条件:高度特异只能与相应的红细胞抗原发生凝集,无非特异性凝集;抗A血清效价在1:128以上,抗B血清效
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