JJF 1836-2020 微量分光光度计校准规范-(高清版).pdf
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1、中华人民共和国国家计量技术规范J J F1 8 3 62 0 2 0微量分光光度计校准规范C a l i b r a t i o nS p e c i f i c a t i o nf o rM i c r o-s p e c t r o p h o t o m e t e r s 2 0 2 0-0 7-0 2发布2 0 2 1-0 1-0 2实施国 家 市 场 监 督 管 理 总 局 发 布微量分光光度计校准规范C a l i b r a t i o nS p e c i f i c a t i o nf o rM i c r o-s p e c t r o p h o t o m e t
2、 e r sJ J F1 8 3 62 0 2 0 归 口 单 位:全国生物计量技术委员会 主要起草单位:中国计量科学研究院上海市计量测试技术研究院博奥生物集团有限公司 本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释J J F1 8 3 62 0 2 0本规范主要起草人:高运华(中国计量科学研究院)许 丽(上海市计量测试技术研究院)武利庆(中国计量科学研究院)王 东(博奥生物集团有限公司)梁 文(上海市计量测试技术研究院)李宝连(博奥生物集团有限公司)J J F1 8 3 62 0 2 0目 录引言()1 范围(1)2 引用文件(1)3 概述(1)4 计量特性(1)5 校准条件(2)5.1 环境条件
3、(2)5.2 校准用标准物质及试剂(2)6 校准项目和校准方法(2)6.1 示值误差(2)6.2 重复性(2)6.3 线性和线性范围(3)7 校准结果表达(3)8 复校时间间隔(3)附录A 示值误差的不确定度评定示例(4)附录B 校准原始记录参考格式(6)附录C 校准证书(内页)参考格式(7)J J F1 8 3 62 0 2 0引 言本规范依据J J F1 0 7 12 0 1 0 国家计量校准规范编写规则的要求编制,起草中参考了J J G1 7 82 0 0 7 紫外、可见、近红外分光光度计检定规程、G B/T2 6 8 1 02 0 1 1 可见分光光度计。本规范为首次发布。J J F1
4、 8 3 62 0 2 0微量分光光度计校准规范1 范围本规范适用于微量分光光度计的校准,对于其他类型的分光光度计仪,可参照本规范执行。2 引用文件本规范引用了下列文件:J J G1 7 82 0 0 7 紫外、可见、近红外分光光度计检定规程G B/T2 6 8 1 02 0 1 1 可见分光光度计凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本规范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。3 概述微量分光光度计体积小,样品用量少(12)L,由光源、单色器、吸收池、检测器以及信号指示系统五个部分组成。原理是基于物质对不同波长光的选择性吸收和朗伯-比尔(L a m b e
5、 r t-B e e r)定律对物质进行定量分析和定性鉴别,常用于核酸与蛋白质的定性、定量分析以及菌液浓度的定量。朗伯-比尔定律的数学表达式为:A=-l g(I/I0)=-l gT=k l c 式中:A 物质的吸光度;I0 入射的单色光强度;I 透射的单色光强度;T 物质的透射比;k 物质的吸光系数;l 被分析物质的光程;c 物质的浓度。检测时,用移液器将(12)L样品滴加到检测平台上,仪器自动完成测试,显示吸光度值,给出样品(核酸、蛋白质和荧光染料)定性和定量结果。4 计量特性4.1 示值误差4.2 重复性4.3 线性和线性范围1J J F1 8 3 62 0 2 05 校准条件5.1 环境
6、条件仪器使用允许的环境条件,温度:(1 53 5)、相对湿度:(1 08 0)%,校准过程中测量并记录环境的温度、相对湿度。5.2 校准用标准物质及试剂5.2.1 校准用标准物质校准时应采用有证标准物质,包括:D N A标准物质,其特性量值(1 0 20 0 0)n g/L,相对扩展不确定度 1 0%(k=2);R N A标准物质(1 0 20 0 0)n g/L,相对扩展不确定度1 0%(k=2)或 蛋 白 质 标 准 物 质(5 02 0 0 0)n g/L,相 对 扩 展 不 确 定度1 0%(k=2)。5.2.2 试剂电阻率达到1 8 Mc m(2 5)的蒸馏水或三羟甲基氨基甲烷-乙二
7、胺四乙酸(T E)缓冲溶液等,用于仪器空白校准用。5.2.3 移液器规格:最大量程2L、2.5L、1 0L,需检定合格。6 校准项目和校准方法6.1 示值误差选择D NA,R NA或蛋白质含量标准物质,用仪器自动设定的光程在仪器上分别测定2 6 0n m、2 8 0n m处吸光度值及对应的含量值,记录2 6 0n m(D NA或R NA)处或2 8 0n m(蛋白质)处3次含量值的算术平均数与标准值之差,按式(1)计算其示值误差。X=ni=1Xin-X0(1)式中:X 示值误差,n g/L;X0 标准值,n g/L;Xi 测定值,n g/L;n 测定次数。6.2 重复性选择D NA,R NA或
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