(高清正版)DB42T1698-2021辣椒疮痂病抗性鉴定技术规程.pdf
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1、 ICS 65.020.20 CCS B 05 DB42 湖北省地方标准 DB42/T 16982021 辣椒疮痂病抗性鉴定技术规程 Technical regulation for evaluation of pepper resistance to bacterial spot 2021-06-21 发布 2021-07-21 实施 湖北省市场监督管理局 发 布 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 接种.1 5 抗性鉴定接种操作.2 6 病情调查方法.3 7 抗病性评价.4 8 记载表格.4 附录A (资料性)辣椒疮痂病病原菌和生理小种.6 前言
2、 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由湖北省农业科学院经济作物研究所提出。本文件由湖北省农业农村厅归口。本文件起草单位:湖北省农业科学院经济作物研究所、湖北省蔬菜办公室、华中农业大学。本文件主要起草人:李宁、尹延旭、王飞、高升华、余楚英、姚明华、袁尚勇、焦春海、张成、张余洋。本文件实施应用中的疑问,可咨询湖北省农业农村厅,联系电话:027-87665821,邮箱:。对本文件的有关修改意见建议请反馈至湖北省农业科学院经济作物研究所,联系电话:027-87380
3、819,邮箱:。辣椒疮痂病抗性鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了辣椒疮痂病抗性鉴定的术语和定义、接种、抗性鉴定接种操作、病情调查方法、抗病性评价以及记载表格。本文件适用于辣椒疮痂病的抗病性鉴定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。NY/T 1858.5 番茄主要病害抗病性鉴定技术规程 第5部分:番茄抗疮痂病鉴定技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 感病对照 disease-susceptible con
4、trol 为辣椒品种Early Cal Wonder(ECW,感疮痂病品种),接种后的病情指数DI50。3.2 抗病对照 disease-resistant control 为辣椒材料ECW-20R(含 Bs2 基因),接种后的病情指数DI20。4 接种 4.1 病原物的纯化与保存 4.1.1 病原物的纯化 采集田间具有典型疮痂病症状的病叶,用常规组织平板稀释法从叶部病斑上分离病原物。分离物经过培养性状、菌体形态特征、生理生化反应、分子生物学鉴定等确认为黄单胞杆菌属细菌菌株,再进行分离物纯化和致病性测定。4.1.2 接种体保存 短期保存将新鲜菌落转移到保存培养基斜面上,28 下培养48 h后,
5、置4 下备用。长期保存将新鲜菌液加入已灭菌的脱脂牛奶中制成细菌悬浮液,经冷冻干燥抽真空后保存于密闭塑料管中,-20 以下的冰箱中长期保存。4.2 接种体繁殖和保存 4.2.1 接种体繁殖 用接种针挑取保存的疮痂病菌落,在NA培养基的平板上划线,置于28 恒温培养箱中培养36 h48 h,选取边缘清晰、有光泽、粘稠状的单菌落转移到培养基中28 恒温震荡培养16 h,加灭菌蒸馏水配制成浓度为2108 cfu/mL的菌悬液。5 抗性鉴定接种操作 5.1 鉴定室 鉴定室应具备可调节温度、湿度和光照的条件,创造良好的发病环境。5.2 设置对照 设“ECW”辣椒为感病对照品种,“ECW-20R”辣椒为抗病
6、对照品种;接种菌株Xcv23-1为湖北省辣椒疮痂病优势菌株,鉴定为生理小种P0;辣椒-番茄疮痂病菌模式菌株ICMP63(X.campestris pv.vesicatoria)为对照菌株(参见附录A)。5.3 育苗 待鉴定的辣椒种子经10%次氯酸钠溶液浸种8 min10 min,灭菌水冲洗干净后置于28 的恒温培养箱中催芽,露白后播种于育苗穴盘中。穴盘宜采用50孔穴盘,每穴播种1粒种子。育苗基质经121 高温蒸汽灭菌40 min。在20 30 温室或大棚中育苗,幼苗应生长健壮、大小一致。5.4 接种 5.4.1 接种时期 在幼苗4片6片真叶期进行接种。5.4.2 接种体浓度 宜为2108 cf
7、u/mL。5.4.3 鉴定设计 鉴定材料随机排列,每份鉴定材料重复3次,每次重复10株。5.4.4 接种方法 5.4.4.1 注射法接种 用去针头的注射器将菌悬液注入待鉴定辣椒的第3片到第4片叶背面,每片叶接种一个点,形成直径为1 cm2 cm的水浸区域。以接种辣椒-番茄疮痂病菌模式菌株ICMP63为对照,接种灭菌水为空白对照。5.4.4.2 喷雾法接种 按照NY/T 1858.5 的方法执行。以喷洒辣椒-番茄疮痂病菌模式菌株ICMP63为对照,喷洒灭菌水为空白对照。在鉴定材料数量较少情况下宜采用注射法,大量材料需鉴定情况下宜采用喷雾法。5.4.5 接种后的管理 采用注射接种法的,接种后在温度
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