DB45_T2205-2020甘蔗及其制品中葡聚糖的测定方法 免疫比浊法.pdf
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1、ICS 67.180CCS X 30DB45广西壮族自治区地方标准DB 45/T 22052020甘蔗及其制品中葡聚糖的测定方法免疫比浊法Test method for dextran in sugarcane and its products-Immune Turbidimetrymethod2020-11-13 发布2020-12-20 实施广西壮族自治区市场监督管理局发 布DB45/T 22052020I前言本文件按照 GB/T 1.12020标准化工作导则第 1 部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由广西壮族自治区糖业发展办公室提出并宣贯。本文件由广西糖业标准化技术委员会
2、归口。本文件起草单位:广西糖业集团有限公司、广东省生物工程研究所(广州甘蔗糖业研究所)、广西壮族自治区分析测试研究中心、广西壮族自治区产品质量检验研究院、广西糖业集团防城精制糖有限公司。本文件主要起草人:柳颖、林荣珍、常国炜、马步、邓卫利、杨宇格、刘桂云、缪路、黎志德、张九花、杨华、林金梅、方海香、梁达奉。DB45/T 220520201甘蔗及其制品中葡聚糖的测定方法免疫比浊法1范围本文件规定了甘蔗及其制品中葡聚糖含量免疫比浊法的测定。本文件适用于广西境内甘蔗及其制品中葡聚糖含量为3.5 mg/L600 mg/L的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的
3、条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 9289制糖工业术语3术语和定义GB/T 9289界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1葡聚糖dextran又称右旋糖酐,是蔗糖经明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)转化形成的,一种完全由-D-吡喃葡萄糖单体构成的多糖,分子式C6H10O5n,分子量通常为数万至数百万。4原理利用葡聚糖与葡聚糖单克隆抗体特异性反应,形成葡聚糖-葡聚糖单克隆抗体复合物析出,使反应体系浊度增加,浊度增量和葡
4、聚糖含量成正比,通过增量浊度与标准系列来比较定量。5试剂5.1除非另有说明,本标准所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682 规定的一级水。5.2盐酸(HCl)溶液(1+99):量取 1 mL 盐酸,加入 99 mL 水,混匀。5.3缓冲溶液:称取 0.800g 氯化钠(NaCl)、0.020g 氯化钾(KCl)、0.363g 十二水合磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O)和 0.024g 磷酸二氢钾(KH2PO4),溶于 90mL 水中,以盐酸溶液(1+99)调 pH 至 7.2,移入 100 mL 容量瓶,定容。5.4蔗糖储备液(250 g/L):称取 25.0 g 蔗糖(C12H22O
5、11,优级纯,且葡聚糖含量低于 5 mg/kg),用水溶解,移入 100 mL 容量瓶,定容。5.5葡聚糖标准品:CAS 号:9004-54-0,纯度99。DB45/T 2205202025.6葡聚糖标准储备液(1 mg/mL):称取葡聚糖标准品 2 g(准确至 0.1 mg)于已恒重的称量瓶内,放于干燥箱内在 105 下干燥 3 h,取出,放在干燥器内,冷却至室温,称量(准确至 0.1 mg),计算葡聚糖标准品中的水分含量。根据葡聚糖标准品的水分含量,迅速称取未经干燥的葡聚糖,使其含无水葡聚糖约 0.1000 g,加入 2.0 mL 水溶解成糊状,放置约 10 min,不时搅拌,使粒子均匀水
6、化,当有凝胶物存在时,多次加入少量水至约 25mL 将凝胶状物溶解,移入 100mL 容量瓶,定容。此溶液现配现用。5.7葡聚糖标准系列溶液:分别吸取葡聚糖标准储备液(1 mg/mL)0 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL 于 10 mL 容量瓶,再分别吸取蔗糖储备液(250 g/L)6 mL 于上述 6 个 10 mL 容量瓶中,定容。此葡聚糖标准系列溶液的质量浓度分别为 0mg/L、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L 和 100mg/L。可根据样品中葡聚糖的实际含量配制相应质量浓度的葡聚糖标准系列溶液,质量浓度不超过 600 mg
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