农业农村部公告第628号-13-2022 转基因生物及其产品食用安全检测 抗营养因子 大豆中凝集素检测方法.pdf
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1、2022?12?19发布2023?03?01实施转基因生物及其产品食用安全检测抗营养因子大豆中凝集素检测方法液相色谱-串联质谱法04中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准备案号:XXXX-XXXX65.020.01BFood safety detection of genetically modified organisms and derivedproductsDetermination of antinutrient soybean agglutinin in soybeanby liquid chromatography-tandem mass spectrometry中华人民共和国
2、农业农村部发 布农业农村部公告第 628 号13?2022CCS农业农村部公告第 号 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任.本文件由中华人民共和国农业农村部提出.本文件由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口.本文件起草单位:农业农村部科技发展中心、中国农业大学、谱尼测试集团股份有限公司.本文件主要起草人:黄昆仑、梁晋刚、车会莲、张旭冬、杨柏崇、王军、韩诗雯、贺晓云、马丽艳、许文涛、罗云波.农业农村部公告第 号 转基因生物及其产品食用安全检测抗营养因子大豆中凝集素
3、检测方法液相色谱串联质谱法范围本文件规定了大豆中凝集素的液相色谱串联质谱检测方法.本文件适用于转基因大豆及其产品中大豆凝集素含量的测定.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法.术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.原理试样经研磨粉碎过筛后,提取蛋白质,定量、还原烷基化、酶解后,利用反相高效液相色谱进行多肽分离,质谱仪进行检测,保留时间与质谱进行定性,质谱外标法定量.试剂和材料除另有规定外,仅使
4、用分析纯试剂,水为符合G B/T 规定的一级水.甲酸(CHO,C A S号:):色谱纯.乙腈(CHC N,C A S号:):色谱纯.丙酮(CHO,C A S号:):色谱纯.S D S溶液():称取 gS D S,溶解在 mL水中.牛血清白蛋白(B S A).B S A工作试剂:取 份标准工作液A与份标准工作液B混合均匀.标准工作液A:分别称取 gB S A,g碳酸钠(N aC OHO),g酒石酸钠(N aCHO HO),g氢氧化钠(N a OH),g碳酸氢钠(N a HC O),溶解在L水中,用氢氧化钠溶液或固体碳酸氢钠调节p H至 .标准工作液B:取g五水硫酸铜(C u S O HO),溶解
5、在 mL水中.二硫苏糖醇溶液(m o l/L):称取 g二硫苏糖醇,溶解在mL水中,现用现配.碘乙酰胺溶液(mm o l/L):称取 g碘乙酰胺,溶解在mL水中.碳酸氢铵溶液(mm o l/L):称取 g碳酸氢铵,溶解在 mL水中.胰蛋白酶(称取 g胰蛋白酶,溶解到mL冰上预冷 m i n以上的 mm o l/L碳酸氢铵中,使用前配制).流动相.A液:甲酸,乙腈.B液:甲酸,乙腈.农业农村部公告第 号 标准多肽标准曲线分别配制 g/L、g/L、g/L、g/L、g/L合成的定性定量多肽(A L Y S T P I H I WD K)和定性定量复核多肽(N SWD P P N P H I G I
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