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《蛋白质合成》-.ppt
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1、第六章第六章 RNA RNA的翻译的翻译蛋白质蛋白质的合成的合成1整理ppt翻译(蛋白质的生物合成)翻译(蛋白质的生物合成):以氨基酸为原料以氨基酸为原料以以mRNAmRNA为模板为模板以以tRNAtRNA为运载工具为运载工具以核糖体为合成场所以核糖体为合成场所起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与合成后加工成为有活性蛋白质合成后加工成为有活性蛋白质2整理ppt6.1 6.1 参与蛋白质生物合成的物质参与蛋白质生物合成的物质氨基酸氨基酸mRNAmRNAtRNAtRNA核糖体核糖体酶及蛋白酶及蛋白质因子质因子ATPATP、GTPGTP3整理ppt6.1.1 tRNA
2、6.1.1 tRNA1.tRNA1.tRNA的结构的结构 二级结构分为五个二级结构分为五个主要的臂:主要的臂:携带氨基酸的接臂;携带氨基酸的接臂;TC TC臂臂;反密码子臂反密码子臂;双氢尿嘧啶双氢尿嘧啶(DHU)(DHU)臂;臂;附加臂。附加臂。4整理ppttRNAtRNA结晶的结晶的X X光衍射结果表明光衍射结果表明,所有的所有的tRNAtRNA分子均为分子均为L L形状形状5整理ppt2.tRNA2.tRNA作用作用是氨基酸的是氨基酸的是氨基酸的是氨基酸的 特异特异特异特异“搬运工具搬运工具搬运工具搬运工具”.”.”.”.起起起起“接合器接合器接合器接合器”作用作用作用作用mRNAmRN
3、AmRNAmRNA摆动配对摆动配对摆动配对摆动配对6整理ppt3.tRNA3.tRNA的种类的种类(1 1)起始)起始tRNAtRNA与延伸与延伸tRNAtRNA起始起始tRNAtRNA特异地识别翻译特异地识别翻译特异地识别翻译特异地识别翻译起始起始起始起始信号信号信号信号AUGAUGAUGAUG,原核生物起始,原核生物起始,原核生物起始,原核生物起始tRNAtRNAtRNAtRNA携带甲酰甲硫氨酸(携带甲酰甲硫氨酸(携带甲酰甲硫氨酸(携带甲酰甲硫氨酸(fMetfMetfMetfMet),真核生物),真核生物),真核生物),真核生物携带甲硫氨酸(携带甲硫氨酸(携带甲硫氨酸(携带甲硫氨酸(Met
4、MetMetMet)。)。)。)。只能结合于核糖体的只能结合于核糖体的只能结合于核糖体的只能结合于核糖体的肽位肽位肽位肽位延伸延伸tRNAtRNA在翻译在翻译在翻译在翻译延长延长延长延长中发挥作用中发挥作用中发挥作用中发挥作用只能结合于核糖体的只能结合于核糖体的只能结合于核糖体的只能结合于核糖体的氨基酰位氨基酰位氨基酰位氨基酰位7整理ppt(2 2)同功)同功tRNA(isoaccepting tRNAs)tRNA(isoaccepting tRNAs)携带氨基酸相同而反密码子不同的一组携带氨基酸相同而反密码子不同的一组tRNAtRNA称为同功称为同功tRNA(isoaccepting tRN
5、As)tRNA(isoaccepting tRNAs)。8整理ppt(3)(3)校正校正tRNAtRNA:抑制基因(:抑制基因(suppressorsuppressor)或校正)或校正基因基因v 无义抑制(无义抑制(nonsense suppressornonsense suppressor)9整理ppt10整理pptv错义抑制(错义抑制(missense missense suppressorsuppressor)11整理ppt校正校正tRNAtRNA的特点:的特点:v 校正校正tRNAtRNA必须与正常的必须与正常的tRNAtRNA竞争结合密码子竞争结合密码子v 无义突变的校正无义突变的校
6、正tRNAtRNA必须与释放因子(必须与释放因子(RFRF)竞争识别密码子竞争识别密码子v 错义突变的校正错义突变的校正tRNAtRNA必须与该密码的正常必须与该密码的正常tRNAtRNA竞争竞争v 校正效率很低,通常为校正效率很低,通常为1-51-5v 校正的相对性校正的相对性12整理ppt6.1.2 核糖体核糖体蛋白质制造厂蛋白质制造厂1.1.核糖体结构及种类核糖体结构及种类由大小二亚基组成由大小二亚基组成 给位(给位(P P位,肽位):位,肽位):起始时,起始时,tRNA tRNAi imetmet结合于核糖体的肽位结合于核糖体的肽位 延长成肽后,肽链转到此位。延长成肽后,肽链转到此位。
7、受位(受位(A A位,氨基酰位):位,氨基酰位):延长成肽时,氨基酰延长成肽时,氨基酰tRNAtRNA就加入此位。就加入此位。13整理ppt核糖体种类核糖体种类(胞质中胞质中)游离的核糖体游离的核糖体-合成细胞固有蛋白合成细胞固有蛋白 与粗面内质网结合的核糖体与粗面内质网结合的核糖体-合成带有信合成带有信号肽的分泌性蛋白质号肽的分泌性蛋白质14整理ppt2 2 核糖体的装配核糖体的装配15整理ppt16整理ppt多核糖体多核糖体多核糖体多核糖体一条一条一条一条mRNAmRNAmRNAmRNA链上同时具有许多个核糖体链上同时具有许多个核糖体链上同时具有许多个核糖体链上同时具有许多个核糖体(每隔(
8、每隔(每隔(每隔80808080核苷酸有一个核糖体)核苷酸有一个核糖体)核苷酸有一个核糖体)核苷酸有一个核糖体)一条一条一条一条mRNAmRNAmRNAmRNA可同时合成多条多肽链可同时合成多条多肽链可同时合成多条多肽链可同时合成多条多肽链17整理ppt3.核糖体的活性位点核糖体的活性位点(1)mRNA结合位点在结合位点在16SrRNA的的3端有一段端有一段顺序同多数原核生物的顺序同多数原核生物的mRNA(AUG上游上游3-9个碱个碱基基)的核糖体结合位点有互补关系,以便使的核糖体结合位点有互补关系,以便使mRNA结合在小亚基上。结合在小亚基上。18整理ppt(2)P位点肽酰基位点位点肽酰基位
9、点亦称肽基部位或放位,是与延伸中的肽酰亦称肽基部位或放位,是与延伸中的肽酰tRNA的结合位点。偏于小亚单位(小亚基的结合位点。偏于小亚单位(小亚基“头部头部”,大,大亚基亚基“座斗、扶手座斗、扶手”)。)。19整理ppt(3)A位点氨酰基位点位点氨酰基位点 亦称氨基酸部位或受位,是接受氨酰基亦称氨基酸部位或受位,是接受氨酰基tRNA的的部位,偏于大亚单位(大亚基部位,偏于大亚单位(大亚基“座斗座斗”,右侧,右侧“扶扶手手”;小亚基;小亚基“头部头部”和和“颈部颈部”)。)。20整理ppt(4)肽酰转移后与即将释放的)肽酰转移后与即将释放的tRNA结合的位点结合的位点E位点,偏于小亚单位。位点,
10、偏于小亚单位。21整理ppt与肽酰与肽酰tRNA由由A部位移位到部位移位到P部位有关的转部位有关的转移酶的结合位点移酶的结合位点 亦称转移酶亦称转移酶,简称,简称G因子,位于大亚基。因子,位于大亚基。肽酰转移酶的催化位点肽酰转移酶的催化位点亦称转移酶亦称转移酶I或或T因子,是肽链形成时,催化因子,是肽链形成时,催化氨基酸之间形成肽键的肽合成酶氨基酸之间形成肽键的肽合成酶(催化催化P位位上肽酰上肽酰tRNA的羟基与处在的羟基与处在A位上氨酰基位上氨酰基tRNA的氨基之间形成肽链的氨基之间形成肽链)。位于大亚基上。位于大亚基上22整理ppt6.1.3 6.1.3 可溶性蛋白质因子可溶性蛋白质因子起
11、始因子起始因子延长因子延长因子释放因子释放因子initiation factorsinitiation factors IF IFeukaryote initiation factors eukaryote initiation factors eIFeIFelongation factors elongation factors EF EFeukaryote elongation factors eukaryote elongation factors eEFeEFrelease factors release factors RFRF23整理ppt6.1.4 6.1.4 能量与酶能量与酶
12、ATP、GTP,多种酶多种酶24整理ppt62 肽链的合成肽链的合成原核生物原核生物氨基酸的活化与转运氨基酸的活化与转运肽链合成的起始肽链合成的起始肽链的延长肽链的延长 “核糖体循环核糖体循环”肽链合成的终止肽链合成的终止蛋白质的加工、修饰蛋白质的加工、修饰25整理ppt一、氨基酸的活化与转运一、氨基酸的活化与转运酶酶酶酶 催化反应催化反应催化反应催化反应氨基酰氨基酰氨基酰氨基酰tRNAtRNAtRNAtRNA合成酶合成酶合成酶合成酶绝对专一性绝对专一性绝对专一性绝对专一性 1 1 1 1个个个个A.AA.AA.AA.A1 1 1 1个氨基酰个氨基酰个氨基酰个氨基酰tRNAtRNAtRNAtR
13、NA合成酶合成酶合成酶合成酶活化活化活化活化A.A-A.A-A.A-A.A-活化活化活化活化“-COOH”“-COOH”“-COOH”“-COOH”消耗消耗消耗消耗2 2 2 2个个个个ATPATPATPATP活化活化活化活化A.A+tRNA A.A+tRNA A.A+tRNA A.A+tRNA 氨基酰氨基酰氨基酰氨基酰tRNAtRNAtRNAtRNA26整理ppt酶的两个位酶的两个位点点结合位点结合位点结合正确的结合正确的A.A A.A 活活化化水解位点水解位点保证保证A.AA.A序列的正确性序列的正确性27整理ppt第一步反应第一步反应第二步反应第二步反应消耗消耗2ATP3-CCA-OH2
14、8整理ppt二、肽链合成的起始二、肽链合成的起始所需的条件所需的条件游离的核糖体大小亚基游离的核糖体大小亚基mRNA 5mRNA 5端的起始信号端的起始信号起始起始tRNA-tRNAtRNA-tRNAi imetmetGTPGTP三种可溶性起始因子三种可溶性起始因子(IF)(IF)29整理ppt三种起始因子三种起始因子三种起始因子三种起始因子IFIFIFIF1 1 1 1IFIFIFIF2 2 2 2 IFIFIFIF3 3 3 3辅助辅助辅助辅助IFIFIFIF3 3 3 3有有有有GTPGTPGTPGTP酶活性酶活性酶活性酶活性特异识别特异识别特异识别特异识别fmet-tRNAfmet-t
15、RNAfmet-tRNAfmet-tRNAi i i imetmetmetmet形成形成形成形成fmet-tRNAfmet-tRNAfmet-tRNAfmet-tRNAi i i imetmetmetmet-IF-IF-IF-IF2 2 2 2-GTP-GTP-GTP-GTP促进促进促进促进30S30S30S30S小亚基结合小亚基结合小亚基结合小亚基结合mRNAmRNAmRNAmRNA终止时:促使核糖体解离终止时:促使核糖体解离终止时:促使核糖体解离终止时:促使核糖体解离30整理ppt30s30s30s30s起始复合物形成起始复合物形成起始复合物形成起始复合物形成1.1.1.1.核糖体亚基的拆
16、离核糖体亚基的拆离核糖体亚基的拆离核糖体亚基的拆离2.mRNA2.mRNA2.mRNA2.mRNA在小亚基上就位在小亚基上就位在小亚基上就位在小亚基上就位3.3.3.3.fmet-tRNAfmet-tRNAfmet-tRNAfmet-tRNAf f f fmetmetmetmet的结合的结合的结合的结合 起始序列(起始序列(起始序列(起始序列(SD SD SD SD 序列)序列)序列)序列)30S30S30S30S小亚基与小亚基与小亚基与小亚基与mRNAmRNAmRNAmRNA识别、识别、识别、识别、结合结合结合结合IFIFIFIF1 1 1 1、IFIFIFIF3 3 3 3协助协助协助协助
17、 fmet-tRNAfmet-tRNAfmet-tRNAfmet-tRNAf f f fmetmetmetmet-IF-IF-IF-IF2 2 2 2-GTP-GTP-GTP-GTP 通过其反密码与通过其反密码与通过其反密码与通过其反密码与mRNAmRNAmRNAmRNA上上上上的起始密码的起始密码的起始密码的起始密码AUGAUGAUGAUG相配对相配对相配对相配对31整理pptSDSD序列序列(shine-Dalgarnoshine-Dalgarnoshine-Dalgarnoshine-Dalgarno序列序列):-):-原核生物原核生物1.1.位于起始密码上游位于起始密码上游2525个核
18、苷酸,个核苷酸,2.2.序列富含嘌呤序列富含嘌呤(如如AGGA/GAGGAGGA/GAGG)的一段序列。)的一段序列。3.3.能和原核生物能和原核生物16s rRNA16s rRNA相应的富含嘧啶序列相应的富含嘧啶序列 互补。互补。4.4.在在IFIF3 3、IFIF1 1促进下和促进下和30S30S亚基结合。亚基结合。32整理ppt70s70s70s70s起始复合物起始复合物起始复合物起始复合物形成形成形成形成1.IF1.IF1.IF1.IF3 3 3 3脱落脱落脱落脱落2.50S2.50S2.50S2.50S大亚基结合大亚基结合大亚基结合大亚基结合3.3.3.3.GTP GDP+PiGTP
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- 蛋白质合成 蛋白质 合成
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