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色谱流动相简介.ppt
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1、第三章第三章 色谱流动相色谱流动相色谱流动相决不仅仅是被分离物质色谱流动相决不仅仅是被分离物质的运载体,它直接影响到分离的好的运载体,它直接影响到分离的好坏,影响到测定的成功与否。坏,影响到测定的成功与否。5/10/20241.流动相的基本情况流动相的物理、化学性质及其纯度将直接影响到色谱系统的:1)稳定性2)分离效率3)分离速度4)检测灵敏度5/10/20242.流动相的基本种类GC永久性气体HPLC各种低沸点有机溶剂及水溶液5/10/20243.1.气相色谱流动相气相色谱流动相GC载气主要起运载作用,对不同分离模型影响不同:GSC:载气与组分一起与固体吸附剂作用,对分离影响明显。GLC:影
2、响气相速率方程的传质阻力相,需要合理选择载气种类。5/10/20244.1.不同载气的影响不同载气的影响低流速时重载气为好,柱效高。但高流速时则以轻载气为好,可以有较大的扩散系数,有利于改善液相传质。最好用氦气,用氢气比较危险。5/10/20245.2.从检测器考虑载气的影响从检测器考虑载气的影响热导检测器应该用氦气或氢气,可获高灵敏度。国外氢焰离子化检测器也用氦气。电子捕获检测器多用氮气或氩气。5/10/20246.3.载气粘度的影响载气粘度的影响载气粘度直接影响柱压降,进而影响柱效。要选粘度小的。有人用氨做载气,效果还不错。载气20的粘度(P)100的粘度(P)氢气二氧化碳氮气氦气氩气氨气
3、84135175194225981031872082282705/10/20247.4.载气纯度的影响载气纯度的影响载气纯度不高所引入的杂质易干扰微量组分的检出。不纯载气有时会产生负峰。5/10/20248.5.载气的净化方法载气的净化方法脱水:5A分子筛(低温下更妙)除氧:除烃:除CO2:5/10/20249.6.载气的选择载气的选择氢气效率高,但危险性大,可选用氢气发生器。高纯气体可为首选。三合一的气源值得考虑。5/10/202410.2.液相色谱流动相液相色谱流动相HPLC流动相除了起运载作用外,流动相除了起运载作用外,还直接参与分离,影响明显。还直接参与分离,影响明显。5/10/202
4、411.1.色谱流动相的基本要求色谱流动相的基本要求保持色谱柱的稳定性,因而:1)与固定相不互溶 (延长柱寿命)2)不发生不可逆吸附 3)有合适的pH值化学惰性不与样品及固定相发生反应。5/10/202412.1.色谱流动相的基本要求色谱流动相的基本要求适用于所选的检测器1)UV:在紫外线区“透明”2)示差:折射率与溶剂有较大差异 3)电化学检测器:电惰性。对样品有很强的溶解力。清洗与更换方便:可减少更换溶剂时的间隔时间。低价、毒性小、纯度高。5/10/202413.2.流动相的选择流动相的选择1)有合适的理化性质(沸点、粘度等,尽(沸点、粘度等,尽可能小一些)可能小一些)2)合适的强度(分配
5、系数要合适,简单样(分配系数要合适,简单样品可大,复杂样品要小)品可大,复杂样品要小)3)混合溶剂(有等度和梯度之分)(有等度和梯度之分)4)极性合适(需根据溶剂的性质而定)(需根据溶剂的性质而定)5/10/202414.3.流动相选择的一般方法先排除物理性质不合适先排除物理性质不合适的溶剂的溶剂(沸点、粘度、紫沸点、粘度、紫外吸收等外吸收等);在选择洗脱强度适当的在选择洗脱强度适当的溶剂溶剂(k在在110或或0.520之间之间);最后选择分离因子合适最后选择分离因子合适的溶剂(的溶剂(1.05)。5/10/202415.4.流动相的物理参数流动相的物理参数1)溶解度参数(溶剂极性的量度):与
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