微电流刺激在眼科中的应用清华大学.ppt
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1、微电流刺激在眼科中的应用郭虹2024/5/8 周三1.电疗法 Electro-Therapy 经经皮神皮神经电经电刺激刺激Transcutaneous Electrical Nerve Stimulation(TENS)干干扰电疗扰电疗法法Interferential Current(IFC)直流直流电疗电疗法法 Galvanic Stimulation(GS)微微电电流刺激流刺激Microcurrent stimulation(MCT)1818年关于电疗的漫画:灵药电万能药2024/5/8 周三2.微电流刺激的优势1969年,Wolcott 团队报告使用200-800微安电流加速伤口愈合,瘢
2、痕组织抗张强度更好,抗菌能力更强。安-舒二氏定律:弱刺激增强生理活动,强刺激抑制生理活动微电流更接近生物体组织修复时的自发生物电流。指指标TENSMCT电流强度毫安微安作用机理阻断神经传导促进损伤组织细胞的再生副作用高电流可能引起细胞电解1/3的病人有不适感刺激位置的皮肤轻微发红,10分钟后即可消失没有不适感人体感觉从轻微的麻刺感到肌肉抽动在感知阈值以下治疗后一旦停止,作用消失停止治疗后生物电继续变化2024/5/8 周三3.微电流刺激的作用增加ATP的产生增加蛋白合成增加离子交换加快细胞运输加快血流速度2024/5/8 周三4.文献汇报微电流刺激对视觉神经细胞存活与再生的作用细胞实验Reti
3、nal mller cells动物实验-RCS大鼠人体实验经角膜电刺激经皮电刺激2024/5/8 周三5.人眼解剖结果2024/5/8 周三6.视网膜光光2024/5/8 周三7.标题Direct effect of electrical stimulation on induction of brain-derived neurotrophic factor from cultured retinal mueller cells作者单位大阪大学医学院,日本发表期刊Investigated ophthalmology and visual science,2008,IF=3.431目的研究电流
4、刺激对脑源性神经营养因子的产生的作用相关性微电流刺激,视网膜,机理文献文献1 12024/5/8 周三8.问题电刺激对BDNF产生的作用机理是什么?2024/5/8 周三9.背景介绍Muller细胞:视网膜中主要的胶质细胞表达谷氨酸钠转运体-保护神经节细胞合成谷氨酰胺合成酶产生多种神经营养因子(BDNF,bFGF,IGF)Ca2+:第二信使L型电压依赖性钙通道-钙流入-神经营养因子电刺激引起钙流入从而诱发多种基因表达2024/5/8 周三10.实验方法Muller细胞培养 95%1代电刺激:AgCl针型电极(直径0.2mm)插入培养液 间隔20mm双相方波串 (脉宽1ms;频率20Hz;电流1
5、0mA)作用时间:30分钟微阵列分析RNA样本与包含31099个目标探针杂交量化实时聚合酶链反应RT-PCRBDNF的mRNA水平酶联免疫吸附法 BDNF蛋白水平L-VDCC阻滞的量化实时PCR(硝苯吡啶)2024/5/8 周三11.实验结果微阵列分析电刺激下,245个探针表达信号强度比对照组高两倍以上神经系统发育相关基因中BDNF的基因表达增加2.6倍BDNF mRNA上调2h,3h 增加1.2倍6h 降低2024/5/8 周三12.细胞内BDNF蛋白水平 6h细胞外BDNF蛋白水平 2024/5/8 周三13.L-VDCC阻滞 0mA 10mA 0mA+blocker 10mA+block
6、er2024/5/8 周三14.讨论钙离子通过L型电压依赖性钙离子通道流入muller细胞上调BDNF的转录Muller细胞不只合成BDNF,而且表达BDNF的特异受体BDNF对光感受器和神经节细胞有神经保护作用电刺激如何刺激L-VDCC的机制尚不明确2024/5/8 周三15.学到的知识细胞的培养细胞实验基因表达分析不足微阵列分析只选择了一种神经营养因子 BDNF进行分析2024/5/8 周三16.问题电刺激对BDNF产生的作用机理是什么?钙离子通过L型电压依赖性钙离子通道流入细胞上调BDNF的转录2024/5/8 周三17.标题Transcorneal electrical stimula
7、tion promotes the survival of photoreceptors and preserves retinal function in Royal College of surgeons rats作者单位大阪大学医学院,日本发表期刊Investigated ophthalmology and visual science,2007,IF=3.431目的研究电流刺激对视网膜光感受器细胞的作用相关性微电流刺激,视网膜,作用机理文献文献2 22024/5/8 周三18.问题本文采用的大鼠视网膜功能的评价方法是什么?2024/5/8 周三19.背景知识RCS大鼠(Royal Co
8、llege of Surgeon rat)在英国皇家外科学院(Royal College of Surgeons)最早培育成功而得名。此鼠有常染色体遗传性视网膜变性,基因型为rdy;是目前研究某些形式的视网膜色素变性、遗传性黄斑变性及脉络膜缺损等疾病的动物模型 视网膜色素变性(Retinitis pigmentosa,RP)感光细胞逐渐变性,进而演变成不可治愈的失明遗传缺陷或基因突变2024/5/8 周三20.实验动物6只RCS大鼠(光照:12小时暗12小时亮循环,光照度:100 lux)电极:双极性接触式电极电流:脉宽1ms;频率20Hz;电流50,100uA;双相方波;持续时间 1h效果分
9、析:视网膜功能:视网膜电图视网膜形态:组织学观察2024/5/8 周三21.100uASham 组织学观察2024/5/8 周三22.ONL,INL厚度随电流强度的改变2024/5/8 周三23.3周control 5周TES 5周Sham 9周TES 9周Sham2024/5/8 周三24.ONL,INL厚度随时间的改变2024/5/8 周三25.视网膜电图 ERGControlControlTESShamB波波a波b波2024/5/8 周三26.类暗暗视阈值反反应负响响应暗暗视阈值反反应阈值2024/5/8 周三27.讨论验证电刺激对光感受器细胞形态和功能上的保护延长光感受器的存活期减缓视
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