食品中真菌毒素的分布及其检测医学PPT课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,食品中真菌毒素的分布及其检测方法研究进展,上海市药品检验所中药室,郑 荣,3/1/2026,1,真菌毒素简介（种类，产生，危害，限度，检测方法等）,几种真菌毒素（黄曲霉素，赭曲霉素，呕吐毒素，伏马毒素，玉米赤烯酶酮，,T-2,毒素）,3/1/2026,2,真菌毒素的种类,真菌毒素（,Mycotoxin,），也称霉菌毒素，是真菌产生的次级代谢产物。,已知有,200,多种不同的真菌毒素，一般同时具有毒性强和污染频率高的特点。,其中包括黄曲霉毒素,B1,和,M1,（,Aflatoxins,，,FB1,、,FM1,）；,赭（棕）曲霉毒素,A,（,Ochratoxin,A,，,OA,）；,脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）（,Deoxynivalenol,DON,）；,玉米赤霉烯酮（,Zearalenone,ZEN(F-2),）；,T-2,毒素（,T-2 toxin,T-2,）；,伏马霉素；,展青霉素（棒曲霉毒素）（,Patulin,PTL,）；,杂色（柄）曲霉毒素（,terigmatocystin,）；串珠镰刀菌素（,Moniliformin,MF,）三硝基丙酸；二乙酰镳草镰刀菌烯醇（,Diacetoxyscirpenol,DAS,）、麦角碱、黄米毒素、岛青霉毒素、橘青霉素、皱褶青霉素、黄绿青霉素、红矢精、黄绿素、圆弧青霉偶氮酸和,F-2,毒素等。,3/1/2026,3,产生真菌毒素的霉菌,曲霉属,（,Aspergillus,Link,）：黄曲霉（,A.,flavus,）、寄生曲霉（,A.,parasiticus,）、赭曲霉（,A.,ochraceus,）、杂色曲霉（,A.,flavus,）、烟曲霉（,A.,flumigatus,）、构巢曲霉（,A.,nidulans,）和棒曲霉（,A.,clavus,）等。,青霉属,（,Penicillium,Link ex Fr,）：岛青霉（,P.,islandicum,）、橘青霉（,P.,citrinum,）、红色青霉（,P.,rubrum,）、展青霉（,P.,patulum,）和黄绿青霉（,P.,citreo-vinide,）等。,镰刀菌属,（,Fusarium,Link ex Fr,）：禾谷镰刀菌（,F.,graminearun,）、串珠镰刀菌（,F.,moniliforme,）、木贼镰刀菌（,F.,equiseti,）、茄病镰刀菌（,F.,solani,）、三线镰刀菌（,F.,tritinctum,）和镳草镰刀菌（,F.,sporotrichioides,）等。,3/1/2026,4,真菌毒素的危害,经济危害,由于真菌的寄生和真菌毒素的产生，严重影响农作物的产量，降低农产品和饲料品质，造成巨大经济损失。全世界每年由于霉变污染真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿美元。,在我国北纬,31,线以南地区采集的玉米、花生、花生油样品的阳性检出率为,22.9,68.1%,，每年使粮食减产,3,7,。,1973,年，小麦赤霉病大流行，穗发病率,50,以上，产量损失,10,40,。据调查，除粮食、饲料以外，在油料作物种子、水果、干果、蔬菜、调味品、烟草、麻类、乳和乳制品、鱼虾、肉类、发酵产品等都发现了不同程度的真菌毒素污染。,3/1/2026,5,常见的真菌毒素,饲料、原料,可能产生的条件,产生的真菌毒素,小麦、大麦,水分,15%,以上,AF,、橘青霉毒素,玉米,水分,13%,以上,AFL,、,ZEN,、,DON,、,T-2,花生饼,水分,14%,以上,AF,、环匹阿尼酸,豆粕,/,真菌毒素含量较少,稻谷,水分,15%,以上,ZEN,3/1/2026,6,真菌毒素的危害,健康危害,根据真菌毒素作用的靶器官或者真菌毒素引起的病理现象，可将真菌毒素分为肝脏毒、肾脏毒、神经毒、震颤毒等。人或动物摄入被真菌毒素污染的农、畜产品，或通过吸入及皮肤接触真菌毒素可引发多种中毒症状。如致幻，催吐，出血症，皮炎，中枢神经受损，甚至死亡。,动物试验和流行病学的调查结果还证实，许多真菌毒素还可在体内积累后产生致癌、致畸、致突变、类激素中毒，白细胞缺乏症等，对机体造成永久性损害。,某些癌症以及克山病等都与真菌毒素中毒有关。,3/1/2026,7,1973,年，湖北省黄岗、天门等,10,县发生赤霉病麦中毒,3000,余人，安徽省也有,200,余人中毒。,1991,年安徽、河南部分地区因特大洪涝灾害造成粮食霉变而在灾区农民中引起较大范围的真菌毒素中毒，一些地区的发病率超过,70%,自,1972,年至,1987,年，我国北方地区,13,个省发生食用变质甘蔗中毒病案,825,例，死亡,78,人，其中河北乐亭一次中毒死亡,8,人，而且相当比例的重病人遗留终生残疾,1989,年,5,月在内蒙古哲里木盟扎鲁特旗，由于居民食用玉米赤霉烯酮污染的荞麦造成乳腺病暴发，累计发病,103,例，患病率,14.49,。,在消化道癌高发区的河南林县，经流行病学调查发现，人们摄食中的,DON,、,T-2,毒素等含量与食管癌，贲门癌的发病率呈正相关,3/1/2026,8,已知的与人体有关的主要真菌毒素中毒症,菌种,易感染食品,毒素,主要症状及病变,黄曲霉,花生、大豆、菜豆、谷物及副产品,黄曲霉毒素,肝癌,赭曲霉,谷物、玉米、咖啡、火腿,赭曲霉毒素,人：巴尔干肾炎,猪：肾中毒症、肾癌,麦角菌,谷物及副产品,麦角碱、麦角毒碱、麦角胺、麦角克碱等,麦角中毒（手足麻木、痉挛、坏疽等）,三线镰刀菌,谷物及副产品,含有玉米赤霉烯酮的复合性毒素类,恶心、猪的发情作用,禾谷镰刀菌,麦类、玉米,赤霉病变毒素,急性胃肠炎,瓜哇镰刀菌素,马铃薯,牛的肺浮肿,拟分枝孢镰孢变种、三线镰刀菌,谷物及副产品、谷核,镰刀霉素,食物中毒性白血球缺失症,黄绿青霉以及橘青霉,米,一种抗菌素、橘霉素,对皮肤及粘膜的刺激、对肝脏、肾脏的毒性,圆瓜青霉、烟曲霉,玉米、饲料,青霉震颤素,A,、烟曲霉震颤素,牛、马、羊：痉挛、,扩展青霉,苹果、苹果酒和苹果汁,棒曲霉素,致癌性、变异原性,岛青霉,米,霉米上的樱红色、岛青霉毒素、瑰天精、赤醌茜素,肝的毒性、肝脏的变易及肝癌,黑葡萄穗霉,蔬菜残屑、秸杆、牧草,黑葡萄穗霉毒素,皮炎、卡他性咽狭炎、白血球缺失症、经过气管的作用,黑根霉,椰子、霉大豆,眩晕、痉挛、发绀（在瓜哇，起因于对霉大豆的消费）,禾谷镰刀菌、黄色镰刀菌、三线镰刀菌、串珠镰刀菌,玉米、麦类,玉米赤霉烯酮,猪：外阴肥大、流产、不妊、畸形,玉米、麦类、,T-2,毒素,3/1/2026,9,真菌毒素的限量规定,非洲：,15,个国家制订了限量规定,(,占,59%),亚洲和大洋洲：,26,个国家制订了限量规定,(,占,89%),拉丁美洲：,19,个国家制订了限量规定,(,占,92%),北美：,2,个国家,(100%),加拿大,:,伏马毒素、麦角碱,美国,:,fumonisins(B1+B2+B3),欧盟：已执行,:,食品和饲料中的,aflatoxin,、,ochratoxin A,；,苹果中的,patulin,提议,:,小麦和谷物中的,DON,3/1/2026,10,真菌毒素常用检测技术,3/1/2026,11,由于真菌毒素对人体的危害，因此其快速检测方法迅速得到发展，特别是生物化学方法，如亲和色谱法和酶联免疫吸附测定法。,在进行真菌毒素的检测时，大部分的毒素标准不仅很毒，而且非常难以得到，所以无毒素标准的方法适应了这种需求，如黄曲霉毒素荧光仪的使用。,由于毒素的分析属于痕量分析，因此在仲裁中最终必须通过气相或液相色谱方法进行准确定量,各国就此设置了一系列的技术壁垒，需要快速，准确，高效的方法,目前国际通用的方法为免疫亲和柱后衍生高效液相色谱法,3/1/2026,12,Aflatoxin,黄曲霉毒素,由,黄曲霉和寄生曲霉产生,五种,主要的黄曲霉毒素,:,B1,B2,G1,G2,和,M1,；,其中,B1,被认为是主要的有毒物质，,M1,为代谢产物,黄曲霉毒素,B1,主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素,M1,是动物摄入黄曲霉毒素,B1,后在体内经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁排出，一部分存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，其中以乳最为常见。,黄曲霉毒素,M1,的毒性和致癌性与黄曲霉毒素,B1,的基本相似。由于牛乳及其制品是人类、特别是婴儿的主要食品，所以其危害性更大。,国际,肿瘤研究机构定为一级致癌物,3/1/2026,13,黄曲霉毒素的化学性质,黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，在紫外线下，黄曲霉毒素,B1,、,B2,发兰色荧光，黄曲霉毒素,G1,、,G2,发绿色荧光。黄曲霉毒素,M1,是黄曲霉毒素,B1,在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。,黄曲霉毒素的分子量为,312-346,。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性及酸性溶液中较稳定，在强酸性溶液中稍有分解，在,pH 9-10,的强碱溶液中分解迅速。其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素,B1,的分解温度为,268,，因此，一般的加热煎煮无法除去，紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性。,3/1/2026,14,黄曲霉毒素对人体的危害,引起急、慢性中毒：,黄曲霉毒素是剧毒物质，其毒性相当于氰化钾的,10,倍，砒霜的,68,倍。黄曲霉毒素属肝脏毒，除抑制,DNA,、,RNA,的合成外，也抑制肝脏蛋白质的合成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒事件，国内外均有许多报导，最典型的是印度的霉变玉米事件，该事件直接导致了数十人丧生，数百人患上不同类型的肝脏疾病。,致癌性：,黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。它诱发肝癌的能力比二甲基亚硝胺大,75,倍，,1993,年黄曲霉毒素被世界卫生组织（,WHO,）的癌症研究机构划定为,I,类致癌物，是目前公认的致癌性最强的物质之一。另据世界卫生组织报导，黄曲霉毒素含量在,3050ug/kg,时为低毒，,50100ug/kg,时为中毒，,1001000ug/kg,时为高毒，,1000ug/kg,以上为极毒。,3/1/2026,15,商 品,国 家,文献发表年份,被分析的样品数,出现率,（,%,）,含量范围,(g/kg),玉米,印度,1997,2074,47,5-666,玉米,阿根廷,1996,2271,20,5-560,花生,印度,1996,2062,45,5-833,花生粉,印度,1995,380,97,8-6280,棉籽粉,英国,1997,21,71,5-25,干椰子粉,菲律宾,1995,9,100,23-186,巴西果,美国,1993,176,17,0-619,Pistachio,果,芬兰,1996,29,59,2-165,黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况,(1),3/1/2026,16,黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况,(2),商 品,国 家,文献发表年份,被分析的样品数,出现率,（,%,）,含量范围,（,g/kg,）,杏仁,美国,1993,44,1,0-372,大豆,阿根廷,1991,94,10,1-36,大米,厄瓜多尔,1997,99,9,7-40,小麦,乌拉圭,1996,123,20,2-20,干无花果,奥地利,1993,136,13,1-350,肉豆蔻,日本,1993,67,43,0-17,Chillies,果,巴基斯坦,1995,176,66,1-80,3/1/2026,17,中国及国际上对黄曲霉毒素的检测标准,品名,中国标准,美国标准,欧盟,玉米、花生、花生油，坚果和干果（核桃、杏仁）,20,g/kg(ppb),20,g/kg(ppb),2,、,4,、,5,、,8,、,10,、,15,g/kg(ppb),玉米及花生仁制品（按原料折算）,20,g,/kg(ppb),20,g/kg(ppb),2,、,4,、,5,、,8,、,10,、,15,g/kg(ppb),大米、其它食用油（香油、菜子油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油、玉米胚芽油、米糠油、棉籽油）,10,g,/kg(ppb),10,g/kg(ppb),2,、,4,g/kg(ppb),其它粮食（麦类、面粉、薯干）、发酵食品（酱油、食用醋、豆豉、腐乳制品）、淀粉类制品（糕点、饼干、面包、裱花蛋糕）,5,g/kg(ppb),5,g/kg(ppb),不得检出,牛乳及其制品（消毒牛乳、新鲜生牛乳、全脂牛奶粉、淡炼乳、甜炼乳、奶油）、黄油、新鲜猪组织（肝、肾、血、瘦肉）,0.5g/kg(ppb),0.5g/kg(ppb),0.05g/kg(ppb),3/1/2026,18,黄曲霉毒素检测方法（,1,）,传统检测方法,黄曲霉毒素分析一般采用,薄层色谱法,(TLC,）、高效液相色谱法（,HPLC,）和酶联吸附免疫法（,ELISA,）。,TLC,虽然简便，但灵敏度差；,HPLC,虽然灵敏度高，但样品处理烦琐，操作复杂，仪器昂贵。,ELISA,重复性差、试剂寿命短需要低温保存。此外，这些方法都具有如下共同的不足之处：（,1,）在操作过程中，需要使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物，对操作人员造成巨大的沾污危险。（,2,）在对样品进行预处理过程中，需要使用多种有毒、异味的有机溶剂，不仅毒害操作人员，而且污染环境。（,3,）操作过程烦琐、时间长，劳动强度大。（,4,）仪器设备复杂、笨重，难以实现现场快速分析。（,5,）灵敏度较差，无法满足欧盟等国的标准要求。,3/1/2026,19,黄曲霉毒素检测方法（,2,）,免疫亲和高效液相色谱法,分析速度快,灵敏度高，测定范围宽（,0.1-300ppb,），用荧光计法检测可以测定,0.1ppb,的黄曲霉毒素,M1,用,HPLC,检测可以测定,10ppt,的黄曲霉毒素,M1,。,采用单克隆抗体免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素或其它真菌毒素分离出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。,利用同一台仪器和相似的分析方法，还可以检测赭曲毒素、伏马毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（,DON,或称呕吐毒素）和,T-2,毒素。,3/1/2026,20,我室黄曲霉素检测方法,采用甲醇,-,水系统提取,提取液经过滤、稀释,滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化,用水将免疫亲和层析柱上的杂质除去，以甲醇将黄曲霉毒素洗脱下来,洗脱液定容后通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定含量。,3/1/2026,21,黄曲霉素,G2,、,G1,、,B2,和,B1,的高效液相色谱图,3/1/2026,22,黄曲霉素,G2,、,G1,、,B2,、,B1,定性检测限为,0.9,、,1.5,、,0.9,和,1.5pg,，定量检测限为,2.25,、,7.5,、,2.25,和,7.5pg,。,检测,限,回收率,试验,满足,50,120,的要求（随样品基质，添加水平等因素而变化）,3/1/2026,23,赭曲霉毒素的化学性质,赭曲霉毒素包括,A,、,B,、,C,等,7,种结构类似的化合物，其中以赭曲霉毒素,A,毒性最大，也称之为棕曲霉毒素。,赭曲霉毒素,A,是稳定的无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀碳酸氢钠溶液，微溶于水。将赭曲霉毒素,A,的乙醇溶液贮于冰箱中一年以上也无损失，但应避光保存，如接触紫外线，几天就会分解。,3/1/2026,24,赭曲霉毒素的产生,产生赭曲霉毒素,A,的曲霉属主要是淡褐色曲霉属（,A.alutaceus,）、硫磺色曲霉属（,A.Sulphureus,），菌核,(,A.sclerotium,),、蜂蜜味曲霉属,(,A.melleus,),、洋葱曲霉（,A.,alliaceus,）、孔曲霉（,A.,ostianus,）、纯绿青霉,(P.,viridicatum,),和圆弧青霉（,P.,cyclopium,）也能产生赭曲霉毒素,A,。,曲霉属产生赭曲霉毒素,A,的条件是中温,寒冷气候。青霉属产生赭曲霉毒素,A,的地区主要是亚热带,3/1/2026,25,赭曲霉毒素,A,（,Ochratoxin,A,）中毒,研究资料表明，该毒素可损害动物的肾脏及肝脏损害，有致畸和致癌作用，并被认为与人类的巴尔干肾病有关。,由于其也有致癌后果，国际癌症研究机构,IARC,将其定为,2B,类致癌物。,赭曲毒素浓度为,1mg/kg,左右时，使家禽的产蛋率下降；超过,5mg/kg,时，会对肝脏组织和肠产生损坏。,3/1/2026,26,容易受到赭曲霉毒素污染的农副产品,绿咖啡豆、咖啡制品、,葡萄干、,大豆、玉米、大米、花生、棉籽、麦类、绿豆、,啤酒、葡萄汁、调味品、,草本植物、猪肾。,3/1/2026,27,赭曲毒素,A,在各种商品中的存在情况（,1,）,商 品,国 家,文献发表年份,被分析的样品数,出现率,（,%,）,含量范围,(,g,/kg),大麦,德国,1998,67,97,25-27000,小麦,丹麦,1997,50,80,50-4550,黑麦,丹麦,1997,266,29,10-2124,燕麦,丹麦,1997,121,20,42-350,小麦,瑞士,1997,153,34,73-2395,大麦,/,小麦,英国,1997,240,56,50-34868,绿咖啡,日本,1997,35,74,100-1740,3/1/2026,28,赭曲毒素,A,在各种商品中的存在情况（,2,）,商 品,国 家,文献发表年份,被分析的样品数,出现率,（,%,）,含量范围,(,g,/kg),绿咖啡,英国,1997,22,50,50-5787,可可粉,英国,1996,50,100,225-37000,干果,英国,1996,48,98,600-37650,酒,德国,1996,64,89,550-6320,调味品,/,本草植物,德国,1996,317,27,6-7132,3/1/2026,29,赭曲霉毒素在饲料中的污染情况,饲料,国家,样品数量,污染率（,%,）,污染浓度范围（,PPB,）,麦类,波兰,150,5.3,50-200,混合,波兰,203,4.9,10-50,大麦,南斯拉夫,191,2.0,45-5125,大麦、燕麦,瑞典,84,8.0,16-409,麦类,加拿大,29,62.0,30-27000,麦类,丹麦,33,57.6,28-27500,3/1/2026,30,中国部分地区谷物中赭曲霉毒素,A,的污染情况,谷物,样品数,阳性阳性数,阳性率（,%,）,含量范围（,ug,/kg),平均含量（,ug,/kg),小麦,610,12,2,8-32,玉米,796,10,1.25,8-30,大米,36,0,总计,1442,22,1.5,8-30,17,3/1/2026,31,赭曲霉毒素,A,的限量标准,国际食品法典委员会提议：赭曲霉毒素,A,在小麦、大麦、黑麦及其它们的制品中不得超过,5ug/kg,。,瑞士：猪混合料,200ug/kg,家禽混合料,1000ug/kg,。,欧盟,:,速溶咖啡,-6,烤制咖啡,-3,干果,-2,干无花果,-8 g/kg,。,德国,2003,年制定了最新的标准,:,咖啡及其制品中的赭曲霉毒素,A5g/kg,。,3/1/2026,32,赭曲霉毒素的检测方法,AOAC 2000.03,免疫亲和柱,+HPLC,法测定大麦中的赭曲霉毒素,AOAC 2000.09,免疫亲和柱,+HPLC,法测定烤制咖啡中的赭曲霉毒素,AOAC 2001.01,免疫亲和柱,+HPLC,法测定酒和啤酒中的赭曲霉毒素,3/1/2026,33,伏马菌素特性,伏马菌素（,Fumonisins,）,1988,年被发现，其主要是由真菌,F.,moniliforme,和,F.,proliferatum,产生的次级代谢产物。,粮食在加工、贮存、运输过程中易受上述两种真菌污染，特别是当温度适宜，温度较高时，更利于其生长繁殖，产生一类结构性质相似的毒素，其中以伏马菌素,B1,、,B2,和,B3,为主。,为一类相关的极性、水溶性代谢产物，为多氢醇和丙三羧酸的双酯化合物,对热很稳定，不易被蒸煮破坏,3/1/2026,34,FB,1,对饲料污染的情况在世界范围内普遍存在，且对粮食作物的污染情况较严重，其污染的饲料主要为以玉米为原料的饲料。,表现出促癌活性，不仅是促癌剂，而且是一个完全的致癌物,对猪产生肺水肿综合症（,PPE,），并被怀疑可诱发人类的食道癌等疾病，从而对畜牧业及人类的健康构成威胁）,羊的肝病样改变和肾病,大鼠的肝坏死和心室内形成血栓,抑制鸡的免疫系统，增强二乙基亚硝胺的致肿瘤作用,可导致马产生白脑软化症（,ELEM,），神经性中毒而呈现意识障碍、失明和运动失调，甚至造成死亡）,对我国海门地区进行的,3,年的跟踪研究结果表明：伏马毒素还可使人导致肝癌,伏马菌素危害性,3/1/2026,35,伏马毒素在玉米及饲料中的发生情况,商 品,国 家,文献年份,样品数,出现率,%,含量范围,g/kg,玉米饲料,英国,1998,67,97,25-27000,玉米饲料,英国,1997,50,80,50-4550,玉米饲料,英国,1997,266,29,10-2124,玉米饲料,美国,1997,121,20,42-350,玉米饲料,台湾,1997,153,34,73-2395,玉 米,中国,1997,240,56,50-34868,玉 米,印度,1997,35,74,100-1740,玉 米,乌拉圭,1997,22,50,50-5787,玉 米,阿根廷,1996,50,100,225-37000,玉 米,巴西,1996,48,98,600-37650,玉 米,德国,1996,317,27,6-7132,玉 米,赞比亚,1995,20,100,20-1710,3/1/2026,36,伏马菌素在饲料中的推荐限量,饲料（玉米及其产品）,限量标准,(FB1+FB2+FB3),mg/kg,马和兔,5,（不超过日食量的,20%,）,猪和鲶鱼,20,（不超过日食量的,20%,）,产子发,反刍动物、家禽、貂,30,（不超过日食量的,20%,）,大于,3,个月饲养用于屠宰的反刍动物、饲养用于制作裘皮的貂,60,（不超过日食量的,20%,）,用于屠宰的家禽,100,（不超过日食量的,20%,）,其它各种牲口和宠物,10,（不超过日食量的,20%,）,3/1/2026,37,其它国家和地区对玉米中伏马菌素含量的限量标准,(mg/kg),：,韩国、南非、中国台湾,7.9,德国、意大利,1,3/1/2026,38,美国,FDA,对伏马毒素在人类食品中的推荐限量标准,人类食品,推荐限量标准,(FB1+FB2+FB3)(mg/kg),玉米面及其制品（脂肪含量小于,2.25%,）,2,玉米面及其制品（脂肪含量大于,2.25%,）,4,干玉米麸,4,用于做润湿粉糊生产的净化玉米,4,用于做爆玉米花的干净玉米,3,3/1/2026,39,伏马菌素的检测方法,薄层色谱法,气相色谱法（,GC,）,ELISA,法,HPLC,法,免疫亲和柱净化,-,荧光法,免疫亲和柱净化,-HPLC,法,3/1/2026,40,玉米赤霉烯酮的性质,白色结晶,对热稳定,120,下加热,4h,未见分解,溶解性能,溶于碱性水溶液、乙醚、苯、氯仿 等溶剂,有,15,种以上的衍生物,3/1/2026,41,玉米赤霉烯酮的毒性,玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性，对动物具有较强的危害作用，会给畜牧业带来一定危害,玉米赤霉烯酮至少能够对一种哺乳动物具有致畸效应,玉米赤霉烯酮对免疫系统的具有潜在毒害作用,3/1/2026,42,玉米赤霉烯酮的发生情况,玉米赤霉烯酮首先从赤霉病玉米中分离，其主要存在于玉米和玉米制品中，小麦、大麦、高粱、大米中也有一定程度的分布。,3/1/2026,43,玉米,赤霉烯酮,在各种商品中的发生情况,商 品,国 家,文献年份,样品数,出现率,%,含量范围,g/kg,玉米饲料,英国,1998,67,52,20-1800,谷物,埃及,1997,135,18,5-45,家禽饲料,阿根廷,1997,300,1,30-280,小麦,德国,1997,445,31,1-8036,大麦,德国,1997,240,22,2-311,玉米,加拿大,1997,126,69,5-647,大麦,加拿大,1997,210,1,4-21,小麦,瑞士,1996,154,16,10-121,小麦,瑞士,1996,123,4,10-18,霉烂的玉米,美国,1996,98,67,100-21400,玉米,阿根廷,1996,2271,30,5-2000,小麦,保加利亚,1996,140,69,10-120,3/1/2026,44,我国部分地区小麦中玉米赤霉烯酮的污染情况,地区,样品数,阳性样品数,阳性率（）,平均值含量范围（,g,/kg,）,江苏,54,35,64.8,0.051(0-0.30),安徽,83,19,22.9,0.032(0-0.30),河南,60,7,11.7,0.008(0-0.05),甘肃,101,41,40.6,0.015(0-0.30),江西,41,5,12.2,0.006(0-0.06),上海,100,33,33.0,0.011(0-0.30),总计,439,140,31.9,0.051(0-0.78),3/1/2026,45,部分国家和地区对玉米赤霉烯酮的限量标准,国家,食品品种,允许限量,(g/kg,）,奥地利,小麦、裸麦,60,硬麦,60,巴西,玉米,200,中国,小麦、玉米,60,法国,谷物、菜油,200,罗马尼亚,所有食品,30,俄罗斯,硬质小麦、面粉,1000,小麦胚芽,1000,乌拉圭,玉米、大麦,200,3/1/2026,46,玉米赤霉烯酮的检测方法,薄层色谱法（,TLC,）：,适用于小麦及其制品和玉米及其制品中,ZEN,的测定，方法的灵敏度为,50g/kg,酶联免疫吸附法（,ELISA,）：,适用于谷物,/,饲料、啤酒、血清和尿中玉米赤霉烯酮含量的测定，最低检出限分别为,1250,ng,/kg,，,250,ng,/kg,，,50,ng,/kg,免疫亲和柱净化高效液相色谱法（,IA-HPLC,）：,适用于谷物（玉米、小麦、大麦、大米）、油籽（大豆、油菜籽）和食用植物油中玉米赤霉烯酮的测定，方法的检测限：,0.005 mg/kg,以免疫亲和柱净化建立的荧光法和,HPLC,法简便快速，特异性强，稳定性好，可用于实际样品的检测,3/1/2026,47,呕吐毒素,脱氧雪腐镰刀菌烯醇,(,deoxynivalenol,;,缩写,DON),又称呕吐毒素,(,vomitoxin,),。属单端孢霉烯族化合物。据文献报道，由镰刀菌产生的单端孢霉烯族化合物已有,60,余种，但天然污染谷物的只有几种,该毒素,1970,年首先由日本科学家诸冈信从日本香川县感染赤霉病的大麦中发现，并分离提纯出来。由于它能引起猪等动物产生呕吐现象，由此命名为“呕吐毒素”。,3/1/2026,48,呕吐毒素的毒性,DON,的主要产毒菌为禾谷镰孢菌,(,F.graminearum,),，该毒素是目前已知的单端孢霉毒素中毒性最小的毒素，小鼠经口,LD50=9.2mg/kg,，其广泛地存在于温热地区的饲料之中。,DON,的产毒菌株适宜在阴凉、潮湿的气候条件下生长，当谷物的水分含量为,22,时，在很短时间内，谷物中即可产生大量的,DON,，霉变玉米中往往同时存在,DON,和,ZEN,。,3/1/2026,49,呕吐毒素对人畜的危害,呕吐毒素中毒与动物疾病,畜禽呕吐毒素中毒后的一般表现为厌食、恶心、呕吐、腹泻，影响免疫和繁殖机能，并导致血磷和碱性磷酸酯酶的活性下降。呕吐毒素能引起猪食欲减退或废绝，呕吐，体重下降，流产，死胎和弱仔，抑制免疫机能和降低机体抵抗力。,呕吐毒毒素与人类的健康,人的中毒症状是胃部不适，恶心、呕吐、头痛、头晕、腹痛、腹泻。还可有全身无力、口干、流涎，少数患者有发烧、颜面潮红等症状。,3/1/2026,50,呕吐毒素在各种商品中的存在情况,商 品,国 家,文献发表年份,被分析的样品数,出现率（,%,）,含量范围（,g/kg,）,大麦,加拿大,1998,117,100,30-15790,玉米粉,英国,1998,40,98,50-5000,小麦,阿根廷,1997,40,80,300-4500,小麦,阿根廷,1997,60,93,100-9250,小麦,德国,1997,445,91,3-20538,大麦,德国,1997,240,81,2-4764,小麦,加拿大,1997,2311,33,10-10500,小麦制品,加拿大,1997,1257,43,10-4060,玉米,加拿大,1997,283,86,20-4090,小麦,瑞士,1996,154,62,10-3010,小麦,瑞士,1996,205,87,20-3000,大麦,/,玉米,韩国,1996,45,76,5-442,小麦,保加利亚,1996,140,67,50-1800,小麦制品,美国,1996,562,48,100-3800,谷物,挪威,1996,2814,77,30-62050,3/1/2026,51,我国部分地区小麦中,DON,的污染情况,地区,样品数,阳性样品数,阳性率（,%,）,平均值,(,g/kg,）,含量范围,(,g/kg,）,江苏,202,54,26.7,40,未检出,-400,安徽,150,80,53.3,340,未检出,-4000,河南,97,56,57.7,40,未检出,-400,甘肃,135,77,57.0,2050,未检出,-20000,江西,100,31,31.0,40,未检出,-480,贵州,31,3,9.7,40,未检出,-800,上海,100,100,100,340,未检出,-2000,3/1/2026,52,部分国家粮谷中呕吐毒素的允许限量标准,国家,粮谷种类,允许限量,(g/kg,）,奥地利,小麦、裸麦,500,硬麦,700,加拿大,未清洗软质小麦,2000,供加工婴儿食品的未清洗软质小麦,1000,供加工麦麸的未清洗软质小麦,2000,进口的非主食食品（按面粉或麦麸算）,1200,俄罗斯,硬质小麦、面粉、小麦胚芽,1000,美国,供人类食用的磨粉用小麦,2000,供人类食用的小麦终产品,1000,加工饲料用的小麦及制品（猪和小动物,10%,，其它家畜禽,50%,）,4000,中国,小麦、面粉、玉米、玉米粉,1000,3/1/2026,53,呕吐毒素的检测方法,薄层色谱法：,适用于小麦及其制品,(,蛋糕、饼干、面包等,),和玉米中呕吐毒素的测定。该方法操作简，但比较费时,(48,小时左右,),灵敏度、特异性较差。,气相色谱法,：适用于谷物中呕吐毒素测定。该方法需进行衍生化，操作烦琐、重现性较差。不适合于大批量样品检测。,微柱法：,适用于小麦、玉米、大豆、高粱等农产品中呕吐毒素的快速筛选。该方法操作简便，但特异性较差，用于定性分析和快速筛选。,酶联免疫吸附测定法：,适用于谷物及其制品中呕吐毒素测定。该方法快速、灵敏、准确、可定量、操作简便、无需贵重仪器设备，且对样品纯度要求不高，适用于大批量样品的检测。,免疫亲合柱,-,高效液相色谱法 和荧光计法,：适用于谷物及其饲料中呕吐毒素测定。该方法分析速度快、操作简便、灵敏、准确。特效性强,分离效率和回收率高,正确性和可靠性强。,3/1/2026,54,T-2,毒素,主要产毒菌株,自然界多种农作物致病菌可以产生,T-2,毒素，其中大多来自镰孢菌属，如早熟禾拟分枝孢镰孢菌（,F.sporotrichioides,）、枝孢镰孢菌（,F.sporotrichiella,）、梨孢镰孢菌（,F.poae,）和三隔镰孢菌（,F.tritinctum,）等。,产毒条件,产毒能力随真菌种类而异，同时受到环境因素的影响。枝孢镰孢菌的最适产毒条件为基质含水量为,40%-50%,，温度,3-7,；在玉米和黑麦中产毒能力较强，其次为大麦、大米和小麦,3/1/2026,55,T-2,毒素的毒性,T-2,毒素主要作用于增殖活跃的细胞，如骨髓、肝、黏膜上皮和淋巴细胞等，对淋巴细胞的损害最为严重。,该毒素能抑制细胞蛋白质及,DNA,合成，干扰生物体能量和脂质代谢，对生物膜功能及多种酶活性也有明显作用。,T-2,毒素还可引起机体过氧化损伤。动物实验表明，其毒性因使用剂量分为急性、亚急性和慢性。,T-2,毒素还具有致畸性和弱的致癌性，但不具有致突变性。,3/1/2026,56,T-2,毒素的检测,薄层色谱法（,TLC,）、酶联免疫法（,ELISA),、气相色谱（,GC,）与电子捕获检测器（,ECD,）或火焰离子化检测器（,FID,）或者质谱仪联用、液相色谱与质谱联用,免疫亲和柱净化柱前衍生,-,高效液相色谱法：,具有高选择性和抗干扰性，是目前国际上较为常用的检测真菌毒素样品前处理方法之一。采用特效性的单克隆抗体免疫技术为分离手段，可以将真菌毒素分离出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。方法的检出限可达,0.01mg/kg,。,3/1/2026,57,棒曲霉素（展青霉素）,棒曲霉素,(,patulin,),，,又叫展青霉素，它是由一些毛霉目真菌种类,(,青霉菌、曲霉菌和丝衣菌等,),产生的一种有毒的次级新陈代谢产物，多产生在发霉的水果、谷类和其他食品中。,棒曲霉素为无色针状结晶,溶点为,100,，分子量为,154,，能溶于水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和氯仿，在碱性溶液中不稳定、易被破坏，而在酸性环境中稳定性增加。,3/1/2026,58,棒曲霉素的危害,由于棒曲霉素在动物实验中能引起动物的致畸性、致突变性和致癌性,，,所以引起了世界各国卫生、毒理医学、食品生产和安全等方面专家学者的极大关注，多数进口国已有明确的限量要求,。,世界卫生组织,(WTO),规定了食品中棒曲霉素的最高限量为,50,/,，目前欧盟已有更严格要求的趋势。,3/1/2026,59,棒曲霉素的检测,目前国内外测定棒曲霉素多采用,TLCS,法和,HPLC,法。,TLCS,法操作较为复杂、费时，并且只能提供半定量结果，而且有共萃取现象，尤其是与,5-,羟甲基,-2-,糠醛,(HMF),有共萃取现象，灵敏度也较低。,HPLC,法现已成为国内外对棒曲霉素检测与监测的通用方法。,3/1/2026,60,THANKS!,3/1/2026,61,